— вторичная структура — Биохимия
Вторичная структура белка – это способ укладки полипептидной цепи в более компактную структуру, при которой происходит взаимодействие пептидных групп с образованием между ними водородных связей.
Формирование вторичной структуры вызвано стремлением пептида принять конформацию с наибольшим количеством связей между пептидными группами. Тип вторичной структуры зависит от устойчивости пептидной связи, подвижности связи между центральным атомом углерода и углеродом пептидной группы, размером аминокислотного радикала. Все указанное вкупе с аминокислотной последовательностью впоследствии приведет к строго определенной конфигурации белка.
Выделяют два возможных варианта вторичной структуры: в виде «каната» – α-спираль (α-структура), и в виде «гармошки» – β-складчатый слой (β-структура). В одном белке, как правило, одновременно присутствуют обе структуры, но в разном долевом соотношении. В глобулярных белках преобладает α-спираль, в фибриллярных – β-структура.
Вторичная структура образуется только при участии водородных связей между пептидными группами: атом кислорода одной группы реагирует с атомом водорода второй, одновременно кислород второй пептидной группы связывается с водородом третьей и т.д.
Участие водородных связей в формировании вторичной структуры |
Укладка белка в виде α-спирали |
α-Спираль
Данная структура является правозакрученной спиралью, образуется при помощи водородных связей между
Формированию спирали препятствуют пролин и гидроксипролин, которые из-за своей циклической структуры обусловливают «перелом» цепи, т.е. ее принудительный изгиб как, например, в коллагене.
Высота витка спирали составляет 0,54 нм и соответствует высоте 3,6 аминокислотных остатков, 5 полных витков соответствуют 18 аминокислотам и занимают 2,7 нм.
β-Складчатый слой
В этом способе укладки белковая молекула лежит «змейкой», удаленные отрезки цепи оказываются поблизости друг от друга. В результате пептидные группы ранее удаленных аминокислот белковой цепи способны взаимодействовать при помощи водородных связей.
Укладка белка в виде β-складчатого слоя
Под направлением белковой цепи понимают направление от N-конца (N-концевой аминокислоты) к C-концу (С-концевой аминокислоте).
Ориентация реагирующих участков может быть параллельна (когда соседние цепи идут в одном направлении) или антипараллельна (цепи идут в противоположном направлении). Таких взаимодействующих друг с другом участков одного белка может быть от двух до пяти.
Надвторичная структура и доменные белки
Методом рентгеноструктурного анализа доказано существование еще двух уровней организации белковой молекулы: надвторичная структура и доменные белки — промежуточные между вторичными и третичными структурами.
Надвторичная структура обусловлена наличием ансамблей взаимодействующих между собой вторичных структур. Это агрегаты, в которых а-спинные и ß-структурные участки в белках взаимодействуют друг с другом и между собой. Например, надвторинною структурой является суперспирализо-вана а-спираль, в которой два а-спиральные полипептидные цепи скручиваются между собой, создавая левую суперспираль (рис. 8). Короткие участки этой суперспираль встречаются в глобулярных белках (бак-ородопсин, гемеритрин), но, как правило, в наиболее благоустроенной форме, в фибриллярных белках. В структуре кератина три а-спиральные цепи скручиваются в надвторинну структуру, образуя первичный агрегат — протофибрилл, которые затем, в свою очередь, объединяются в более сложную организацию белков — микрофибрилл, образующих волос. Такая структура объясняет, почему шерсть является эластичной, легко растягивается и после снятия усилия постепенно восстанавливает свою длину. Так что межмолекулярные связи слабые, шерсть не отмечается прочностью.
Коллагеновая спираль. Коллаген один из самых распространенных белков организма человека, на его долю приходится около 30% общего количества белка. Это волокнистый, нерастворимый в воде белок. Вместе с другими веществами он образует коллагеновые волокна, которые составляют основную массу соединительной ткани человека. Единичный цепь коллагена (первичная структура) содержит около тысячи аминокислотных остатков и похож на ломаную линию, поскольку почти все полипеп-тидний цепь построен из повторяющихся триплетов состава (гли-о-о-OH), т.е. содержит остатки антиспиральних аминокислот. Поэтому при формировании вторичной структуры он не может давать типовых а-спиралей, имеющих винтовую симметрию, и имеет форму сильно вытянутой спирали (а-цепи). Три параллельно вытянутые а-цепи скручиваются в надвторинну структуру — суперспираль (проколлаген или тропоколлагена), которая стабилизируется водородными связями между триплетами различных цепей. Спиральные цепи сильно приближены друг к другу, и в целом суперспираль имеет компактную структуру. Плоские кольца пролина и гидроксипролина, регулярно чередуются вдоль цепи, как и мижланцюгови связи между а-цепями тропоколлагена, придают ей жесткости, поэтому коллаген устойчивый к растяжению.
Коллаген имеет большое значение в медицинской практике. Полученные на основе этого биополимера коллагеновые пленки, губки, применяются для закрытия ран при кровотечении, для лечения ожогов, трофических язв. Продукт частичного гидролиза коллагена желатин применяется для приготовления растворов, повышают свертываемость крови при остановке кровотечений (желудочных, кишечных и др..). Препарат желати-ноль — продукт гидролиза желатина в изотоническом растворе натрия хлорида, содержащий ряд свободных аминокислот, применяют как плазме-мозаминюючий средство.
Другая распространенная группа супервторинних структур — различные варианты так называемых ßаß-структур, в которых а-спираль взаимодействует с двумя складчатыми ß-слоями. Чаще всего встречается структура ßaßaß, показана на рис. 9, а также ßßß (лактатдегидрогеназа, стафилококковая нукле-аза, Т4-лизоцим и др..).
Многие крупные глобулярных белков, образованных вследствие определенной пространственной укладки одной полипептидной цепи, содержащие структурно и функционально обособленные участки (будто маленькие глобулы), которые имеют определенную автономию. Они слабо взаимодействуют между собой и получили название доменов, а вся молекула — доменный белок. В молекуле доменных белков участки, содержащие фрагменты вторичной структуры (а-спирали, ß-структуры и их сочетания), образованные одним и тем же полипептидной цепи и соединены между собой как бы короткими перемычками этого же цепи. В среднем в состав доменов входит 100-150 остатков аминокислот, что соответствует «маленькой глобулы» с поперечником примерно 2,5 нм. Вместе с тем, встречаются и гораздо большие домены. Вероятнее всего, что функциональные домены, в которых молекулярная масса больше 20000, содержат несколько структурных доменов. В составе целого ряда ферментов, например, содержатся отдельные Коферы-нтзвьязуючи и каталитические домены. Сейчас домены считают фундаментальными элементами структуры белковой молекулы, а соотношение и характер компоновки а-спиралей и ß-слоев позволяет понять гораздо больше по эволюции белковых молекул и филогенетических связей, чем сравнение первичных структур.
Структурные домены и доменные белки по количеству а-спиралей и ß-структур, а также по характеру расположения в доменах разделяют на несколько классов или групп:
1. а-Белки, в структуре которых преобладают а-спирали (миоглобин, гемоглобин, кальцийсвязывающий белки).
2. ß-белки, которые построены, в основном, из антипараллельных ß-слоев (химотрипсин).
3. а + ß-белки. В структуре этих белков есть участки, которые полностью состоят из а-спиралей, и участки, полностью построены из ß-слоев, в основном, из антипараллельных (инсулин, лизоцим, рибонуклеаза, цитохром b5).
4. а / ß-Белки: а-спирали и ß-структуры чередуются за ходом цепи. При этом большинство ß-структур, преимущественно параллельных, локализованы в центре, где они изгибаются, образуя жесткую основу (гексокиназа, карбоксипептидаза, лактатдегидрогеназа и др..).
5. Доменные белки без внятной вторичной структуры.
Белки водородные связи — Справочник химика 21
Водородная связь служит причиной некоторых важных особенностей воды — вещества, играющего огромную роль в процессах, протекающих в живой и неживой природе. Она в значительной мере определяет свойства и таких биологически важных веществ как белки и нуклеиновые кислоты. [c.156]
Белковая цепь приобретает чрезвычайную устойчивость, сворачиваясь в правостороннюю а-спираль (рис. 21-17). В такой структуре аминокислотные остатки направлены наружу от оси спирали, а группы С=0 одного витка спирали связаны с группами Н—N следующего витка водородными связями. Водородные связи образуются между сильно электроотрицательными атомами, например Р или О, и атомами водорода с небольшим локальным избытком положительного заряда. Такие связи имеют главным образом электростатическое происхождение и зависят от способности двух атомов к тесному сближению. Атомы О и Р, имеющие небольшие размеры, способны давать такие связи более крупные атомы О обычно не могут образовать водородных связей. В белках водородные связи играют очень важную роль они возникают между кислородным атомом карбонильной группы и атомом водорода аминогруппы, принадлежащими полипептидной цепи. Как видно из рис. 21-13, частично двоесвязный характер пептидной связи С—N не только обеспечивает плоскостность пептидного звена, но также делает атом кислорода несколько отрицательным, а атом азота с присоединенным к нему атомом водорода несколько положительными. Это и создает благоприятные условия для образования водородных связей. [c.316]
Белки-это полимеры аминокислот. Фибриллярные белки являются основным структурным материалом волос, кожи, ногтей, мышц и сухожилий. В этих структурах белковые цепи свернуты спиралями в многожильные тяжи или связаны друг с другом водородными связями в листы. Глобулярные белки включают ферменты, молекулы-переносчики и антитела. В белках этого типа цепи могут иметь вид спиралей или листов, но затем эти структуры многократно перегибаются, сворачиваясь в компактные, изолированные молекулы. [c.338]
Однако, зная только порядок расположения аминокислот, нельзя еще представить себе совершенно отчетливо все уровни организации белковой молекулы. Даже прн осторожном нагревании белки нередко необратимо утрачивают свойства, присущие им в природном состоянии, иными словами, происходит денатурация белков. Причем обычно денатурация не сопровождается расщеплением полипептидной цепи чтобы расщепить цепь, нужны более жесткие условия. Следовательно, цепи образуют какую-то определенную структуру под действием слабых вторичных связей . В образовании таких вторичных связей обычно участвует атом водорода, находящийся между атомами азота и кислорода. Такая водородная связь в двадцать раз слабее обычной валентной связи. [c.130]
[c.293]Наиболее важный класс глобулярных белков образуют биологические катализаторы, ферменты. Они характеризуются каталитическим механизмом, позволяющим им ускорять достижение конкретной реакцией состояния термодинамического равновесия, а также специфичность к субстрату, благодаря которой они способны делать выбор между потенциальными молекулами субстратов, воздействуя на одни из них и отказываясь воздействовать на другие. Участок поверхности фермента, на котором происходит катализ, называется активным центром. Механизм катализа может осуществляться при помощи заряженных групп, доноров и акцепторов электрона или протона, а также при помощи атомов металла в активном центре фермента. Избирательность ферментов обусловливается формой их поверхности и характером взаимодействия с субстратом, например водородной связью, электростатическим взаимодействием или гидрофобным притяжением. Фермент и его субстрат соответствуют друг другу по форме и размеру, как ключ и замок. [c.339]
Полипептидные цепи способны образовывать а-спиральную конформацию (рис. 6.10). Такая конформация характеризуется максимальным насыщением водородных связей вдоль оси спирали. Боковые заместители аминокислотных звеньев направлены наружу и находятся вне спирали. Дополнительным фактором, фиксирующим а-спиральную конформацию макромолекулы белка, является образование внутрицепных дисульфидных (цистиновых), сложноэфирных и солевых связей. Возникновение двойных и тройных спиралей обусловлено интенсивными межмолекулярными взаимодействиями между ними. Такие спиральные одно- и многоцепочечные макромолекулы являются примером стержнеобразных жестких цепей, характеризующихся /ф [c.344]
Водородная связь (рис. VI 1.9,л) — взаимодействие между атомом водорода (несущим частичный положительный заряд) и атомами с высокой электроотрицательностью — кислородом или азотом. В белковых цепях атомы водорода, ковалентно связанные с атомами азота, взаимодействуют с атомами кислорода соседней цепи или другого участка этой же цепи. Все активные белки содержат сотни водородных связей, расположенных тесно вдоль их цепей. Многие водородные связи служат для удержания белковой цепи в шарообразной или плоской форме. [c.454]
Во многих фибриллярных белках цепь распрямлена не полностью, а скручена в спираль, как телефонный провод. Одни водородные связи удерживают эту спираль, а другие — связывают цепи между собой. Это происходит, например, в белке волос, как показано на рис. VII. 10. [c.454]
Важную роль при снятии диэлектрических изотерм играет точность диэлектрических измерений. Так, повышение точности измерения приращения электроемкости конденсатора АС по мере увлажнения находящегося в нем образца позволило провести более детальный, чем это делалось ранее, анализ диэлектрических изотерм сорбции воды на белках [659]. Полученные зависимости АС(а) имеют вид ломаных линий (рис. 15.1, кривая 4), причем первая точка излома находится в области заполнения активных центров сорбента молекулами воды. Основываясь на данных ЯМР, можно предположить, что первому участку диэлектрической изотермы соответствует сорбция молекул на двух активных центрах с помощью двух водородных связей, второму, с большим наклоном ДС/а, — сорбция молекул с помощью одной Н-связи и третьему участку, с еще большим значением АС/а, — сорбция молекул воды на ранее сорбированных молекулах. [c.245]
Между отдельными группами вторичной структуры белков могут также образовываться внутримолекулярные водородные связи, в результате чего отдельные участки спирали сближаются, молекулы изгибаются и свертываются в клубок иди складываются — формируется третичная структура белка. В ее образовании большую роль играют также межмолекулярные взаимодействия полярных групп аминокислот, которые локализуются на внешней поверхности молекул и образуют водородные связи с водой. [c.271]
При нагревании водородные связи разрываются — вторичная структура белка при 60—70° С разрушается, происходит его денатурация. Нуклеиновые кислоты выдерживают нагревание до 100° С и действие разбавленных щелочей и кислоты. Отсюда видно, что их строение более прочное, что характерно для структур, играющих роль матриц. [c.41]
Типичными полярными и нейтральными боковыми радикалами обладают Ser, ys, Thr, Arg, Gin и Thr. Они способны образовывать внутри- и межцепные водородные связи. Эти звенья могут располагаться в макромолекуле белка как внутри, так и на поверхности глобулы. Звенья Asp и Glu, как правило, находятся также на поверхности частиц белков. Формирование вторичной структуры белка зависит как от особенностей первичной структуры, так и от внешних (влажность, pH, температура) условий. [c.342]
Физико-химические свойства белков в значительной степени определяются их высоким молекулярным весом, амфо-терностью аминокислот и лабильностью вторичной и третичной структур белка. Водородные связи, 1юддерживающие вторичную структуру белка, очень непрочны и легко разрушаются уже при нагревании раствора белка до 60—70° или при действии 8 М раствора мочевины. В результате наблюдается, так называемое, плавление вторичной структуры белка, ведущее к изменению таких физико-химических свойств раствора белка, как светорассеяние, вязкость и оптическое вращение. Белок с разрушенной вторичной структурой становится гидрофобным и имеет тенденцию выпадать в осадок. [c.54]
Фуппы (-СОО -NHз и др.), а гидратация полярных заместителей — ориентацией молекул воды в результате образования водородных связей. Молекулы гидратно-связанной белком воды можно представить в виде монослоя вокруг ионизированных И полярных групп полипептида, в то время как гидрофобные ра- [c.359]
На основании известных фактов о том, что ири любых pH (скажем, ири физиологическом значении 7,35), ионной силе и даже диэлектрической проницаемости аминокислоты и белки могут существовать в различных ионизационных состояниях, можно ожидать, что молекулы эти будут взаимодействовать с водной средой благодаря образованию ионных (электростатических) п водородных связей. Вот почему каждый белок обладает присущей ему специфической степенью гидратации, или, другими словами, он должен связаться с определенным количеством воды для того, чтобы сохранить свою целостную структуру. Молекулы [c.43]
Водородная связь отличается исключительным сочетанием свойств — прежде всего сравнительно небольшой прочностью, меньшей, чем для типичных химических связей, но несколько большей, чем для ван-дер-ваальсовских связей, и направленностью. В ходе эволюции материи в земных условиях это сделало водородную связь основой механизма структурирования на надмолекулярном уровне и воспроизведения по соответствующим шаблонам сложнейших молекул, который безотказно и достаточно быстро дей- ствует в организмах при свойственных им невысоких температурах. Широко известные спиральные структуры белков, РНК и ДНК приобретают свою сложную, несимметричную конфигурацию благодаря водородным связям и легко перестраиваются в процессе жизнедеятельности организмов только потому, что система водородных связей, так же как застежка, называемая молнией, прочна, но легко разъединяется связь за связью, не требуя больших затрат энергии. И так же легко смыкается вновь. Подчеркнем, что в основе механизма редупликации молекул в организмах лежит строгая направленность водородных связей. [c.90]
Рентгенографический анализ помог установить расположение молекул воды в кристаллах различных белков [25]. При анализе рубредоксина получена особенно ясная картина, в которой было идентифицировано 127 молекул воды. Так как метод дифракции рентгеновских лучей дает картину, усредненную во времени, степень заселенности центров, удерживающих воду, варьирует от 1 до 0,3, а некоторые центры взаимно исключают друг друга. Имеется несколько плотных сетчатых структур, состоящих из атомов воды и белка, которые связаны системой водородных связей. В этой модели большая часть воды находится от белка на расстоянии длины водородных связей, образуемых атомами белка. Однако 25% воды находится на расстоянии 4 А или больше. При этом пик функции распределения соответствует расстоянию 4 или 4,5 А. Последняя величина равна расстоянию между ближайшими соседними атомами в воде или во льду. Вода, находящаяся на расстоянии 4 А или больше, не контактирует с атомами белка и представляет собой воду многослойного покрытия. Авторы полагают, что вода в полимолекулярных слоях не обнаруживается при измерениях термодинамических свойств. По-видимому, вода может быть локализована в результате образования молекулами, находящимися на поверхности белка, водородных связей и вег же будет проявлять термодинамические свойства, неотличимые от свойств растворителя в объеме (см. заключительную часть). [c.125]
Согласно результатам кристаллографического исследования, упорядоченная вода в кристалле ИТПЖБ состоит из небольшого набора молекул, связанных с белком водородными связями. В соответствии с вычислениями по методу Монте-Карло в результате взаимодействий вода — вода и белок — вода более чем удвоенное количество воды находится в упорядоченном состоянии. Различие между экспериментально установленной и расчетной структурой растворителя может быть частично обусловлено присутствием в кристалле, исследованном рентгенографическим методом, неорганических ионов. Хотя концентрация солей внутри кристалла неизвестна, однако асимметрическая ячейка может содержать до 5 остатков фосфорной кислоты и до 10 ионов калия. Присутствие этих ионов в различных положениях снижает упорядоченность растворителя настолько, что в настоящее время мы не можем этого оценить. К дополнительным причинам, из-за которых наблюдается расхождение в этих двух описаниях, авторы относят также проблемы, связанные как с техникой кристаллографического исследования, так и с техникой вычислений. [c.217]
До недавнего времени специалисты по вопросам структуры макромолекул полагали, что белки (а также, возможно, монослои липидов) связываются друг с другом в основном благодаря водородным связям. В белках водородная связь, как правило, образуется между атомом кислорода карбонильной группы и атомом водорода амидной группы и возможна она при межатомных расстояниях, не превышающих 2 А. Такие расстояния возникают при наложении полипептидной цепи на соседние цепи или при ее складывании на себя. Полагают, что в комплексах белков с липидами группы, способные к образованию водородных связей, обладая выраженной полярностью, ориентируются таким образом, чтобы расположиться [c.48]
В белках водородные связи могут быть внутри- и межцепочечными. Внутрицепочечные водородные связи стабилизируют а-спиральные, а межцепочечные — р-складчатые структуры (рис. 1 и рис. 2). Электростатические взаимодействия, называемые также ионными, или солевыми, предположительно образуются диссоциированными свободными карбоксильными группами моноаминодикарбоновых аминокислот и протониро- [c.12]
Большая часть полярных атомных групп на поверхности белков и нуклеиновых кислот расположена близко друг к другу, так что молекула воды в гидратной оболочке может связываться с поверхностью двумя водородными связями [138— 140]. Поэтому хорошей моделью для изучения свойств воды полярной поверхности биополимеров могут служить полифунк-циональные низкомолекулярные соединения со сближенными полярными группами, такие, например, как сахара, аминокислоты и др. [c.54]
Ферменты — высокомолекулярные белковые соединения, состоящие из аминокислот, связанных пептидными связями. В составе природных белков встречается около двадцати аминокислот. Молекулярная масса ферментов лежит в пределах от 10 до 10 . Молекула фермента в своем составе имеет чередующиеся полярные группы СООН, ННа, МН, ОН, 5Н и другие, а также гидрофобные группы. Первичная структура фермента обуславливается порядком чередования различных аминокислот. В результате теплового хаотического движения макромолекула фермента изгибается, свертывается в рыхлые клубки. Между отдельными участками полипептидной цепи возникает межмолекулярное взаимодействие, приводящее к образованию водородных связей другие участки могут взаимодействовать за счет электростатических или ван-дер-ваальсовых сил [c.632]
Натуральный шелк представляет собой нить, полученную размоткой коконов шелкопряда в условиях интенсивного набухания при гидротермических обработках. Получаемая таким образом нить характеризуется сложным морфологическим строением два фиброиновых стержня соединяются в единую нить с помощью серициновой прослойки. После дополнительного удаления серицина до содержания его 20-25% коконная нить превращается в шелк-сырец, а при более глубокой отмывке (до 4-5%) — в натуральный шелк. В зависимости от своих функций (формирования армирующей основы шелка — фиброиновых стержней или обеспечения связи между ними) полипептидные цепи имеют первичную структуру, включающую большее (в фиброине) или меньшее (в серицине) количество гидрофобных аминокислотных звеньев, но четкое различие между этими белками отсутствует (рис.6.12). Связь между ними обеспечивается проходными цепями, дисульфидными и сложноэфирными мостиками, межмолекулярными водородными связями, а также через небелковые фрагменты, например через монозы. [c.376]
Новейшие работы показали, что белковые молекулы, несмотря на их исключительную сложность, состоят из комбинаций сравнительно небольшого числа а-аминокислот. Тем не менее и. это количество уводит нас в теорию больших чисел. Известно, что в образовании белковых молекул участвует до 28 а-а-минокислот. Если допустить, что в состав белков входит лишь 10 различных аминокислот, из которых каждая встречается только один раз, то можно получить 401=3 628 800 изомерных молекул, в случае 15 различных аминокислот 15 = 1 307 947 368 ООО изомерных молекул, не считая таутомерных, скрученных, циклических и обладаклцих водородными связями форм. [c.540]
Огромное многообразие структурных и функциональных свойств белков обусловлено, таким образом, большим количеством известных органических структур. В воде, как реакционной среде, можно иметь аминокислоты как неполярные (конформационнолабильные или жесткие), так и неполярные (связанные водородными связями) или ионные (сольватированные) как ароматические, так и алифатические аминокислоты, обладающие как восстанавливаемыми, так и окисляемыми группами. Таким образом, почти вся энциклопедия органохнмических реакций может быть закодирована в полипептидной цепи и ее третичной структуре. Наконец, поскольку все аминокислоты существуют в ь (либо 5)-конфигурации, понятно, что хиральность играет существенную роль в упорядочении структуры. [c.16]
Между различными участками спиральной цепи белков (кислородом карбонильных групп и водородом аминогрупп) возникают водородные связи. Именно наличие большого количества водородных связей в полипептрцщой цепи делает возможным образование спирали и стабилизирует ее. Лршейное расстояние вдоль оси спирали между двумя однородньши атомными групшфовками полипептида составляет 1,5 А. Один виток спирали включает 3,6 единиц аминокислотных остатков. Эт о соответствует линейному расстоянию между витками спирали вдоль ее оси, равному 5,4 А. [c.270]
Для проявления биологической активности некоторые белки должны сначала образовать макрокомплекс, состоящий из нескольких третичных структур белковых субъединиц, которые связаны вторичными валентными силами (ионное притяжение, водородные связи). Подобные способы пространственной организации нескольких полипептидных субъединиц — это четвертичная структура белка, которая определяет степень ассоциации третичных структур в биологически активном материале. Например, белком с четвертичной структурой является гемоглобин, который состоит из четырех субъединиц (клубков) миогло-бина — дэух молекул а-гемоглобина, каждая из которых содержит гем. [c.272]
Как все закручено
Мы привыкли представлять себе ДНК в виде двойной спирали — но это лишь одно из множества ее обличий. С тех пор, как Уотсон и Крик опубликовали свою модель, в клетках человека нашли тройную и четверную спираль ДНК, а еще кресты, шпильки и другие варианты переплетения — некоторые проще нарисовать, чем описать словами.
Набросать идей
Уотсон и Крик не были единственными, кто корпел над трехмерной моделью ДНК. Они даже не были первыми. На обрывках биохимических данных можно было построить самые разные молекулярные формы, и вариантов было множество.
Условия задачи у всех были одинаковы. На начало 1953 года уже было понятно, как устроен нуклеотид:
остаток фосфорной кислоты,
сахар,
одно из азотистых оснований: аденин (А), гуанин (Г), тимин (Т) или цитозин (Ц).
Еще было известно, что азотистые основания разбросаны по цепи не случайно: в любой молекуле ДНК суммарное количество аденинов и гуанинов строго равнялось количеству тиминов и цитозинов. Кроме того, на всех рентгеновских снимках Розалинд Франклин и Рэймонда Гослинга, независимо от того, какой участок ДНК на них был запечатлен, сама нить имела одну и ту же толщину. Это означало, что форма остается неизменной при любой последовательности нуклеотидов.
Из этих вводных Лайнус Полинг и Роберт Кори собрали свою модель — тройную спираль, ощетинившуюся со всех сторон азотистыми основаниями (фосфату и сахару биохимики отвели роль внутреннего стержня). Эта конструкция выглядела неустойчивой: было непонятно, почему отрицательно заряженные фосфатные группы в центре спирали не отталкиваются друг от друга.
Структура ДНК по версии Полинга и Кори
Linus Pauling, Robert B. Corey / PNAS, 1953
Эту проблему решил Брюс Фрезер, вывернув конструкцию наизнанку: в его варианте три нити смотрели фосфатами наружу. Азотистые основания были обращены внутрь, однако Фрезер так и не смог объяснить, по какому принципу они соединены.Модель Уотсона и Крика с закрученной вправо двойной спиралью оказалась самой устойчивой. Как и Фрезер, ученые расположили фосфаты снаружи, а азотистые основания — внутри. Был в этой модели и четкий принцип их противопоставления: А на одной цепи всегда соединялся с Т на другой, а Г — с Ц. Это объясняло, почему толщина конструкции стабильна — пары А-Т и Г-Ц примерно одинакового размера.
Карандашный набросок структуры ДНК, сделанный Фрэнсисом Криком
Wellcome Images / CC BY-SA 4.0
Потом были и другие попытки пересобрать ДНК в новую форму. Голландский биохимик Карст Хугстин, например, заметил, что можно соединить те же самые пары нуклеотидов другими гранями, — так спираль тоже оставалась стабильной, но получалась тоньше. Другие авторы изображали ДНК в виде спирали с чередующимися правым и левым поворотами, или даже в виде двух двойных спиралей, которые образуют единую четверку. И хотя существование Уотсон-Криковской двойной спирали с тех пор много раз подтвердилось, в XXI веке продолжают размышлять о том, какие формы принимает нить ДНК внутри клетки, где ее разглядеть намного сложнее, чем в пробирке. Правда, ни одна из альтернативных идей до сих пор не оказалась достаточно хороша, чтобы отказаться от классической правозакрученной двойной спирали.Уотсон и Крик сделали нечто большее, чем просто разрешили споры о форме ДНК. Их модель сразу же объяснила, как эта форма работает: взаимно однозначное соответствие делает каждую нить шаблоном для другой. Имея только одну из цепей, по ней всегда можно восстановить вторую — на этот принцип опираются все современные модели передачи генетической информации.
Тем не менее, большинство «отвергнутых» идей в чем-то оказались верны. За почти 70 лет пристального разглядывания ДНК в ней удалось обнаружить практически все возможные виды соединения оснований, другие спирали и даже левый поворот.
Свернуть не туда
Уже сама по себе двойная спираль может быть устроена по-разному. Это заметила еще Розалинд Франклин, хотя и не предполагала, что перед ней спираль, да еще и двойная. В обычных условиях, напоминающих внутриклеточные, ДНК на снимках биолога имела «рыхлую» форму, которую Франклин назвала В-ДНК. Но если влажность в пробирке опускалась ниже 75 процентов, получалась А-ДНК, пошире и поплотнее.
А (слева) и В (справа) формы ДНК, какими их увидела Розалинд Франклин
Rosalind Franlkin, Raymond Gosling / Acta Crystallographica, 1953
Как выяснилось потом, А-ДНК действительно закручена туже: в ней на виток спирали уходит 10 нуклеотидов, а не 11, как в В-ДНК. И расположены они не перпендикулярно оси симметрии спирали, а под углом: если в В-ДНК нуклеотиды обычно изображают горизонтальными черточками, в А-ДНК их следовало бы рисовать косыми.Уотсон и Крик выбрали В-ДНК в качестве основы для своей модели и не прогадали. Позже оказалось, что В-вариант действительно встречается в клетке гораздо чаще, и сейчас его считают основной формой существования ДНК, а все отклонения часто обозначают общим термином «не-В ДНК».
Более того, реальная двойная спираль почти никогда не соответствует своей идиллической модели. В живых системах В-ДНК, как правило, скручена чуть сильнее, чем предсказывали Уотсон и Крик, и среднее число нуклеотидов на виток спирали в ней — не 10 и не 11, а около 10,5. Кроме того, отдельные пары нуклеотидов постоянно отклоняются от положенной «горизонтали» (это называют «пропеллерным поворотом») поэтому спираль никогда не бывает абсолютно гладкой и ровной — то тут, то там по ее бокам торчат шероховатости: концы нуклеотидов под разными углами.
«Пропеллерный» поворот нуклеотидов в В-ДНК
James D. Watson et al. / Molecular Biology of the Gene, 2008
Позже оказалось, что витки спирали могут не только лежать туже или расслабленнее, но и вовсе закручиваться против часовой стрелки (например, влево закручена спираль башни «Эволюция» в Москва-сити, явно символизирующая нить ДНК). По странному стечению обстоятельств, именно такую ДНК увидели в 1979 году, когда появилась наконец возможность рассмотреть нуклеиновые кислоты с высоким разрешением. Это все еще была двойная спираль, но совсем другой формы: 12 нуклеотидов на виток, еще тоньше, чем В-ДНК и закрученная не вправо, а влево. Торчащие ее на поверхности фосфатные группы образовывали не плавную спираль, а зигзаг, поэтому новый вариант назвали Z-формой.А-ДНК (слева), B-ДНК (по центру), Z-ДНК (справа)
Mauroesguerroto / wikimedia commons / CC BY-SA 4.0
Это, конечно, не означало, что Уотсон-Криковская модель неверна. Z-форму удалось получить при достаточно экзотических условиях — в растворе с высокой концентрацией солей. И в клетке она тоже получается из В-ДНК лишь при определенных обстоятельствах: например, когда «напряжение» на цепи слишком высоко и его необходимо сбросить. Напряжение появляется из-за чрезмерного скручивания: нити ДНК и так завернуты друг относительно друга, но образованная ими двойная спираль накручивается на какой-нибудь белок (например, гистон), возникает так называемая суперспирализация. Переход в Z-форму помогает сбросить напряжение и развернуть лишние витки — а это, в свою очередь, важно, чтобы с ДНК могли связываться новые белки, например, полимераза при транскрипции.Поэтому ДНК часто принимает Z-форму при транскрипции генов. Более того, чем больше при этом Z-ДНК, тем активнее идет транскрипция. Гистоны с Z-ДНК связаться не могут, поэтому полимеразе никто не мешает заниматься своим делом. И этим, кстати говоря, активно пользуются опухолевые клетки, у которых левозакрученная спираль вовремя возникает перед нужными им генами.
Башня «Эволюция» (на переднем плане) имеет вид левозакрученной ДНК
mos.ru / CC BY-SA 4.0
Потом нашлись и другие формы двойной спирали. В зависимости от влажности, содержания солей и последовательности нуклеотидов в конкретном участке, ДНК может еще сильнее удлиняться (Е-ДНК) или сжиматься (C- и D-ДНК), включать в себя ионы металлов (М-ДНК) или вытягиваться так, что вместо азотистых оснований в центре спирали оказываются фосфатные группы (S-ДНК). А после того, как в список добавились другие типы внутриклеточной ДНК, вроде ядерной N-ДНК и рекомбинантной R-ДНК (которые, впрочем, попали в этот список не из-за своей формы, а положения в клетке или происхождения), в английском алфавите для вариантов ДНК практически закончились буквы. Тому, кто решит открыть еще какую-нибудь неканоническую форму, придется выбирать из пяти свободных: F, Q, U, V, и Y. A-ДНК — двухцепочечная, чуть толще, чем В.
B-ДНК — та, которую построили Уотсон и Крик.
C-ДНК — двухцепочечная, 9,3 нуклеотида на виток.
D-ДНК — двухцепочечная, узкая: 8 нуклеотидов на виток, содержит много тиминов.
E-ДНК — двухцепочечная, еще уже: 15 нуклеотидов на два витка.
G-ДНК — четверная спираль с гуаниновыми тетрадами.
H-ДНК — тройная спираль.
I-ДНК — две двойные спирали, которые держатся вместе притяжением своих цитозинов.
J-ДНК — еще одна тройная спираль, которую образуют повторы АЦ.
K-ДНК — ДНК трипаносом, особенно богатая аденинами.
L-ДНК — ДНК, в основе которой лежит L-дезоксирибоза (а не D-, как обычно).
M-ДНК — В-ДНК в комплексе с двухвалентными металлами.
N-ДНК — ядерная ДНК.
O-ДНК — точка начала удвоения ДНК у бактериофага λ.
P-ДНК — тройная спираль Полинга и Кори.
R-ДНК — рекомбинатная ДНК (полученная встраиванием чужеродного фрагмента).
S-ДНК — двухцепочечная, вытянута в 1,6 раз сильнее, чем В-форма.
T-ДНК — похожа на D-форму, встречается у бактериофага Т2.
W-ДНК — синоним Z-ДНК.
X-ДНК — двухцепочечная спираль, которую образуют повторы АТ.
Z-ДНК — двухцепочечная левозакрученная.
Попасть в переплет
Помимо всевозможных форм двойной спирали и способов ее плетения, ДНК иногда распадается на отдельные нити, которые образуют в шпильки, кресты и другие двуцепочечные фигуры. Случается и так, что уже существующая двойная спираль обрастает новыми соседями.
В 1985 году выяснилось, что Полинг и Кори тридцать лет назад были правы: тройная спираль ДНК (H-ДНК) существует. Однако устроена она совсем не так, как они предполагали. В настоящей тройной спирали две цепи соединяются стандартным, Уотсон-Криковским способом, а третья примыкает к ним сбоку, ложась в большую бороздку между цепями. При этом азотистые основания третьей, дополнительной нити соединяются с основными парами не классическим способом, а как бы сбоку — теми самыми связями, которые предсказывал Карст Хугстин. Он тоже, в некотором роде, оказался прав.
Тройная спираль, как и многие альтернативные формы ДНК, тоже возникает в ответ на суперспирализацию цепи. Однако, в отличие от Z-формы, она не поддерживает транскрипцию, а наоборот, ей препятствует. РНК-полимераза, которая привычно расплетает две нити перед собой, не всегда справляется с тем, чтобы разделить триплекс. Поэтому если в гене или его регуляторных областях образуется тройная спираль, он работает хуже прочих.
Варианты образования тройной спирали. Уотсон-Криковские пары обозначены черным, добавочный третий нуклеотид выделен цветом
Yutaro Yamagata et al. / Chemistry Europe, 2015
Бывает и так, что соединяются не две и не три, а сразу четыре цепи ДНК. Чтобы это произошло, в одном месте должны встретиться четыре гуаниновых нуклеотида — и неважно, находятся они на двух цепях одной нити или на четырех разных нитях, не связанных друг с другом. Каждый гуанин образует неклассическую, хугстиновскую пару с двумя соседями, а все вместе они создают квадратную гуаниновую тетраду. Если рядом с ними находятся другие гуанины, способные создать квадрат, то из них складывается стэк — стопка, которая удерживает рядом четыре цепи ДНК.Гуаниновая тетрада (сверху) и варианты расположения цепей в квадруплексе (снизу)
Jochen Spiegel et al. / Trends in Chemistry, 2020
Все 30 лет, что прошли с момента открытия квадруплексов, количество процессов, в которых они так или иначе замешаны, растет. Известно уже больше двух сотен белков, которые могут избирательно распознавать гуаниновые тетрады — вероятно, последние выполняют роль своего рода генетической разметки, очередного способа регулировать упаковку и транскрипцию генов. Например, они часто встречаются в промоторах (регуляторных участках, с которых начинается транскрипция) разных генов. Совсем недавно ученым даже удалось отличить разные типы рака груди через наборы квадруплексов — от них, в свою очередь, зависело, какие гены в опухолевых клетках были гиперактивны. Чем дальше мы вглядываемся в молекулу ДНК, тем больше замечаем отклонений от давно привычной модели. Двойная спираль — не единственная и не окончательная структура ДНК, а лишь одна (пусть и самая частая) из поз, которую та принимает в непрерывном танце. Повинуясь велению нуклеотидной последовательности, нить ДНК сжимается и разжимается, изгибается, закручивается и принимает бесконечное число (прекрасных) форм. Ни одна из них — не окончательная: альтернативные структуры ДНК переходят друг в друга, конкурируют с В-формой и между собой, подчиняются сигналам клеточных белков и сами направляют их работу.Найти и возглавить
Неканонические формы ДНК, при всем своем разнообразии, не возникают в случайных местах. Устойчивость им придает определенный набор нуклеотидов в их составе, поэтому и появляются они лишь в тех участках цепи, где для них есть «удобная» последовательность.
Так, например, в ДНК есть определенные участки, которые особенно охотно сворачиваются в зигзаг. Это места, где чередуются пары Г-Ц: после левого поворота в них каждый второй нуклеотид принимает «неправильную» форму, отсюда и ломаный профиль всей Z-формы. Это означает, что последовательности, склонные принимать Z-форму, можно найти прямо в тексте — если видите ГЦГЦГЦГЦГЦГЦ, то вряд ли прогадаете. Так в одной работе, например, насчитали 391 такой участок в человеческом геноме.
Места, в которых может образоваться тройная спираль, тоже можно узнать по характерной последовательности нуклеотидов. Третья цепь присоединяется либо по принципу комплементарности — то есть к паре Г-Ц добавляется еще один Г, образуя Г-Ц*Г — либо «к своему» — и получается Г*Г-Ц. Поэтому часто такая конструкция возникает в тех местах ДНК, где подряд идет несколько одинаковых (например, ГГГГГ) или химически близких (АГГААГ) нуклеотидов и где они образуют палиндромные (зеркальные) повторы.
Точно также по тексту ДНК можно предсказать и появление квадруплексов. По результатам только одного секвенирования (собственно, прямого перевода ДНК в буквы), в геноме человека их нашлось более 700 тысяч. Не все они, вероятно, встречаются in vivo — для этого соответствующем нитям ДНК нужно оказаться рядом в одной точке сложно устроенного клеточного ядра — однако это может означать, что четырехспиральным структурам отведена какая-то специфическая роль в жизни клетки.
Далеко не всегда образование альтернативных форм ДНК идет клетке на пользу: большинство из них куда менее прочны, чем обычная В-ДНК, и гораздо чаще рвутся. Поэтому последовательности, которые склонны образовывать не-В формы, становятся участками генетической нестабильности и повышенного мутагенеза. Одни исследователи видят в этом двигатель эволюции — если такие участки появляются в генах, связанных с развитием организма. Другие же винят альтернативные формы ДНК во всех видах болезней, связанных со случайными мутациями и перестановками в геноме — от опухолей до шизофрении и аутизма.
Получается, что ДНК содержит не только информацию о строении клеточных белков и РНК, но и о том, какие формы эта информация может принимать, помимо Уотсон-Криковского стандарта. А уже от этих форм, в свою очередь, зависит то, что с этой информацией произойдет: сможет ли клетка ее реализовать или ген, будет вечно молчать, а то и вовсе сломается, породив какие-то дополнительные мутации.
Вероятно, мы научимся однажды вмешиваться в этот процесс — можно было бы, например, построить цепь нуклеотидов, которая имитировала бы третью цепь в спирали и «подсунуть» ее в нужное время в нужном месте, чтобы заблокировать работу какого-нибудь нежелательного гена в клетке. Были даже более смелые предложения — использовать тройную спираль для прицельного редактирования генома: ввести в клетку нуклеотид, который сможет образовать с целевым участком ДНК тройную спираль и побудить систему репарации заменить этот участок на «здоровый» вариант с другой хромосомы.
А пока мы этому только учимся, остается признать структуру ДНК еще одним видом информации — помимо генетической (нуклеотидного «текста») и эпигенетической (доступности генов для считывания) — который несет в себе наш геном. И нам еще предстоит научиться с ним работать, влияя через форму на содержание, или наоборот.
Полина ЛосеваКак все закручено. 21 вариант того, как может выглядеть ваша ДНК
Мы привыкли представлять себе ДНК в виде двойной спирали — но это лишь одно из множества ее обличий. С тех пор, как Уотсон и Крик опубликовали свою модель, в клетках человека нашли тройную и четверную спираль ДНК, а еще кресты, шпильки и другие варианты переплетения — некоторые проще нарисовать, чем описать словами.
Набросать идей
Уотсон и Крик не были единственными, кто корпел над трехмерной моделью ДНК. Они даже не были первыми. На обрывках биохимических данных можно было построить самые разные молекулярные формы, и вариантов было множество.
Условия задачи у всех были одинаковы. На начало 1953 года уже было понятно, как устроен нуклеотид:
остаток фосфорной кислоты,
сахар,
одно из азотистых оснований: аденин (А), гуанин (Г), тимин (Т) или цитозин (Ц).
Еще было известно, что азотистые основания разбросаны по цепи не случайно: в любой молекуле ДНК суммарное количество аденинов и гуанинов строго равнялось количеству тиминов и цитозинов. Кроме того, на всех рентгеновских снимках Розалинд Франклин и Рэймонда Гослинга, независимо от того, какой участок ДНК на них был запечатлен, сама нить имела одну и ту же толщину. Это означало, что форма остается неизменной при любой последовательности нуклеотидов.
Из этих вводных Лайнус Полинг и Роберт Кори собрали свою модель — тройную спираль, ощетинившуюся со всех сторон азотистыми основаниями (фосфату и сахару биохимики отвели роль внутреннего стержня). Эта конструкция выглядела неустойчивой: было непонятно, почему отрицательно заряженные фосфатные группы в центре спирали не отталкиваются друг от друга.
Структура ДНК по версии Полинга и Кори
Linus Pauling, Robert B. Corey / PNAS, 1953
Эту проблему решил Брюс Фрезер, вывернув конструкцию наизнанку: в его варианте три нити смотрели фосфатами наружу. Азотистые основания были обращены внутрь, однако Фрезер так и не смог объяснить, по какому принципу они соединены.
Модель Уотсона и Крика с закрученной вправо двойной спиралью оказалась самой устойчивой. Как и Фрезер, ученые расположили фосфаты снаружи, а азотистые основания — внутри. Был в этой модели и четкий принцип их противопоставления: А на одной цепи всегда соединялся с Т на другой, а Г — с Ц. Это объясняло, почему толщина конструкции стабильна — пары А-Т и Г-Ц примерно одинакового размера.
Карандашный набросок структуры ДНК, сделанный Фрэнсисом Криком
Wellcome Images / CC BY-SA 4.0
Потом были и другие попытки пересобрать ДНК в новую форму. Голландский биохимик Карст Хугстин, например, заметил, что можно соединить те же самые пары нуклеотидов другими гранями, — так спираль тоже оставалась стабильной, но получалась тоньше. Другие авторы изображали ДНК в виде спирали с чередующимися правым и левым поворотами, или даже в виде двух двойных спиралей, которые образуют единую четверку. И хотя существование Уотсон-Криковской двойной спирали с тех пор много раз подтвердилось, в XXI веке продолжают размышлять о том, какие формы принимает нить ДНК внутри клетки, где ее разглядеть намного сложнее, чем в пробирке. Правда, ни одна из альтернативных идей до сих пор не оказалась достаточно хороша, чтобы отказаться от классической правозакрученной двойной спирали.
Уотсон и Крик сделали нечто большее, чем просто разрешили споры о форме ДНК. Их модель сразу же объяснила, как эта форма работает: взаимно однозначное соответствие делает каждую нить шаблоном для другой. Имея только одну из цепей, по ней всегда можно восстановить вторую — на этот принцип опираются все современные модели передачи генетической информации.
Тем не менее, большинство «отвергнутых» идей в чем-то оказались верны. За почти 70 лет пристального разглядывания ДНК в ней удалось обнаружить практически все возможные виды соединения оснований, другие спирали и даже левый поворот.
Свернуть не туда
Уже сама по себе двойная спираль может быть устроена по-разному. Это заметила еще Розалинд Франклин, хотя и не предполагала, что перед ней спираль, да еще и двойная. В обычных условиях, напоминающих внутриклеточные, ДНК на снимках биолога имела «рыхлую» форму, которую Франклин назвала В-ДНК. Но если влажность в пробирке опускалась ниже 75 процентов, получалась А-ДНК, пошире и поплотнее.
А (слева) и В (справа) формы ДНК, какими их увидела Розалинд Франклин
Rosalind Franlkin, Raymond Gosling / Acta Crystallographica, 1953
Как выяснилось потом, А-ДНК действительно закручена туже: в ней на виток спирали уходит 10 нуклеотидов, а не 11, как в В-ДНК. И расположены они не перпендикулярно оси симметрии спирали, а под углом: если в В-ДНК нуклеотиды обычно изображают горизонтальными черточками, в А-ДНК их следовало бы рисовать косыми.
Уотсон и Крик выбрали В-ДНК в качестве основы для своей модели и не прогадали. Позже оказалось, что В-вариант действительно встречается в клетке гораздо чаще, и сейчас его считают основной формой существования ДНК, а все отклонения часто обозначают общим термином «не-В ДНК».
Более того, реальная двойная спираль почти никогда не соответствует своей идиллической модели. В живых системах В-ДНК, как правило, скручена чуть сильнее, чем предсказывали Уотсон и Крик, и среднее число нуклеотидов на виток спирали в ней — не 10 и не 11, а около 10,5. Кроме того, отдельные пары нуклеотидов постоянно отклоняются от положенной «горизонтали» (это называют «пропеллерным поворотом») поэтому спираль никогда не бывает абсолютно гладкой и ровной — то тут, то там по ее бокам торчат шероховатости: концы нуклеотидов под разными углами.
«Пропеллерный» поворот нуклеотидов в В-ДНК
James D. Watson et al. / Molecular Biology of the Gene, 2008
Позже оказалось, что витки спирали могут не только лежать туже или расслабленнее, но и вовсе закручиваться против часовой стрелки (например, влево закручена спираль башни «Эволюция» в Москва-сити, явно символизирующая нить ДНК). По странному стечению обстоятельств, именно такую ДНК увидели в 1979 году, когда появилась наконец возможность рассмотреть нуклеиновые кислоты с высоким разрешением. Это все еще была двойная спираль, но совсем другой формы: 12 нуклеотидов на виток, еще тоньше, чем В-ДНК и закрученная не вправо, а влево. Торчащие ее на поверхности фосфатные группы образовывали не плавную спираль, а зигзаг, поэтому новый вариант назвали Z-формой.
А-ДНК (слева), B-ДНК (по центру), Z-ДНК (справа)
Mauroesguerroto / wikimedia commons / CC BY-SA 4.0
Это, конечно, не означало, что Уотсон-Криковская модель неверна. Z-форму удалось получить при достаточно экзотических условиях — в растворе с высокой концентрацией солей. И в клетке она тоже получается из В-ДНК лишь при определенных обстоятельствах: например, когда «напряжение» на цепи слишком высоко и его необходимо сбросить. Напряжение появляется из-за чрезмерного скручивания: нити ДНК и так завернуты друг относительно друга, но образованная ими двойная спираль накручивается на какой-нибудь белок (например, гистон), возникает так называемая суперспирализация. Переход в Z-форму помогает сбросить напряжение и развернуть лишние витки — а это, в свою очередь, важно, чтобы с ДНК могли связываться новые белки, например, полимераза при транскрипции.
Поэтому ДНК часто принимает Z-форму при транскрипции генов. Более того, чем больше при этом Z-ДНК, тем активнее идет транскрипция. Гистоны с Z-ДНК связаться не могут, поэтому полимеразе никто не мешает заниматься своим делом. И этим, кстати говоря, активно пользуются опухолевые клетки, у которых левозакрученная спираль вовремя возникает перед нужными им генами.
Башня «Эволюция» (на переднем плане) имеет вид левозакрученной ДНК
mos.ru / CC BY-SA 4.0
Потом нашлись и другие формы двойной спирали. В зависимости от влажности, содержания солей и последовательности нуклеотидов в конкретном участке, ДНК может еще сильнее удлиняться (Е-ДНК) или сжиматься (C— и D-ДНК), включать в себя ионы металлов (М-ДНК) или вытягиваться так, что вместо азотистых оснований в центре спирали оказываются фосфатные группы (S-ДНК). А после того, как в список добавились другие типы внутриклеточной ДНК, вроде ядерной N-ДНК и рекомбинантной R-ДНК (которые, впрочем, попали в этот список не из-за своей формы, а положения в клетке или происхождения), в английском алфавите для вариантов ДНК практически закончились буквы. Тому, кто решит открыть еще какую-нибудь неканоническую форму, придется выбирать из пяти свободных: F, Q, U, V, и Y.
A-ДНК — двухцепочечная, чуть толще, чем В.
B-ДНК — та, которую построили Уотсон и Крик.
C-ДНК — двухцепочечная, 9,3 нуклеотида на виток.
D-ДНК — двухцепочечная, узкая: 8 нуклеотидов на виток, содержит много тиминов.
E-ДНК — двухцепочечная, еще уже: 15 нуклеотидов на два витка.
G-ДНК — четверная спираль с гуаниновыми тетрадами.
H-ДНК — тройная спираль.
I-ДНК — две двойные спирали, которые держатся вместе притяжением своих цитозинов.
J-ДНК — еще одна тройная спираль, которую образуют повторы АЦ.
K-ДНК — ДНК трипаносом, особенно богатая аденинами.
L-ДНК — ДНК, в основе которой лежит L-дезоксирибоза (а не D-, как обычно).
M-ДНК — В-ДНК в комплексе с двухвалентными металлами.
N-ДНК — ядерная ДНК.
O-ДНК — точка начала удвоения ДНК у бактериофага λ.
P-ДНК — тройная спираль Полинга и Кори.
R-ДНК — рекомбинатная ДНК (полученная встраиванием чужеродного фрагмента).
S-ДНК — двухцепочечная, вытянута в 1,6 раз сильнее, чем В-форма.
T-ДНК — похожа на D-форму, встречается у бактериофага Т2.
W-ДНК — синоним Z-ДНК.
X-ДНК — двухцепочечная спираль, которую образуют повторы АТ.
Z-ДНК — двухцепочечная левозакрученная.
Попасть в переплет
Помимо всевозможных форм двойной спирали и способов ее плетения, ДНК иногда распадается на отдельные нити, которые образуют в шпильки, кресты и другие двуцепочечные фигуры. Случается и так, что уже существующая двойная спираль обрастает новыми соседями.
В 1985 году выяснилось, что Полинг и Кори тридцать лет назад были правы: тройная спираль ДНК (H-ДНК) существует. Однако устроена она совсем не так, как они предполагали. В настоящей тройной спирали две цепи соединяются стандартным, Уотсон-Криковским способом, а третья примыкает к ним сбоку, ложась в большую бороздку между цепями. При этом азотистые основания третьей, дополнительной нити соединяются с основными парами не классическим способом, а как бы сбоку — теми самыми связями, которые предсказывал Карст Хугстин. Он тоже, в некотором роде, оказался прав.
Тройная спираль, как и многие альтернативные формы ДНК, тоже возникает в ответ на суперспирализацию цепи. Однако, в отличие от Z-формы, она не поддерживает транскрипцию, а наоборот, ей препятствует. РНК-полимераза, которая привычно расплетает две нити перед собой, не всегда справляется с тем, чтобы разделить триплекс. Поэтому если в гене или его регуляторных областях образуется тройная спираль, он работает хуже прочих.
Варианты образования тройной спирали. Уотсон-Криковские пары обозначены черным, добавочный третий нуклеотид выделен цветом
Yutaro Yamagata et al. / Chemistry Europe, 2015
Бывает и так, что соединяются не две и не три, а сразу четыре цепи ДНК. Чтобы это произошло, в одном месте должны встретиться четыре гуаниновых нуклеотида — и неважно, находятся они на двух цепях одной нити или на четырех разных нитях, не связанных друг с другом. Каждый гуанин образует неклассическую, хугстиновскую пару с двумя соседями, а все вместе они создают квадратную гуаниновую тетраду. Если рядом с ними находятся другие гуанины, способные создать квадрат, то из них складывается стэк — стопка, которая удерживает рядом четыре цепи ДНК.
Гуаниновая тетрада (сверху) и варианты расположения цепей в квадруплексе (снизу)
Jochen Spiegel et al. / Trends in Chemistry, 2020
Все 30 лет, что прошли с момента открытия квадруплексов, количество процессов, в которых они так или иначе замешаны, растет. Известно уже больше двух сотен белков, которые могут избирательно распознавать гуаниновые тетрады — вероятно, последние выполняют роль своего рода генетической разметки, очередного способа регулировать упаковку и транскрипцию генов. Например, они часто встречаются в промоторах (регуляторных участках, с которых начинается транскрипция) разных генов. Совсем недавно ученым даже удалось отличить разные типы рака груди через наборы квадруплексов — от них, в свою очередь, зависело, какие гены в опухолевых клетках были гиперактивны.
Чем дальше мы вглядываемся в молекулу ДНК, тем больше замечаем отклонений от давно привычной модели. Двойная спираль — не единственная и не окончательная структура ДНК, а лишь одна (пусть и самая частая) из поз, которую та принимает в непрерывном танце. Повинуясь велению нуклеотидной последовательности, нить ДНК сжимается и разжимается, изгибается, закручивается и принимает бесконечное число (прекрасных) форм. Ни одна из них — не окончательная: альтернативные структуры ДНК переходят друг в друга, конкурируют с В-формой и между собой, подчиняются сигналам клеточных белков и сами направляют их работу.Найти и возглавить
Неканонические формы ДНК, при всем своем разнообразии, не возникают в случайных местах. Устойчивость им придает определенный набор нуклеотидов в их составе, поэтому и появляются они лишь в тех участках цепи, где для них есть «удобная» последовательность.
Так, например, в ДНК есть определенные участки, которые особенно охотно сворачиваются в зигзаг. Это места, где чередуются пары Г-Ц: после левого поворота в них каждый второй нуклеотид принимает «неправильную» форму, отсюда и ломаный профиль всей Z-формы. Это означает, что последовательности, склонные принимать Z-форму, можно найти прямо в тексте — если видите ГЦГЦГЦГЦГЦГЦ, то вряд ли прогадаете. Так в одной работе, например, насчитали 391 такой участок в человеческом геноме.
Места, в которых может образоваться тройная спираль, тоже можно узнать по характерной последовательности нуклеотидов. Третья цепь присоединяется либо по принципу комплементарности — то есть к паре Г-Ц добавляется еще один Г, образуя Г-Ц*Г — либо «к своему» — и получается Г*Г-Ц. Поэтому часто такая конструкция возникает в тех местах ДНК, где подряд идет несколько одинаковых (например, ГГГГГ) или химически близких (АГГААГ) нуклеотидов и где они образуют палиндромные (зеркальные) повторы.
Точно также по тексту ДНК можно предсказать и появление квадруплексов. По результатам только одного секвенирования (собственно, прямого перевода ДНК в буквы), в геноме человека их нашлось более 700 тысяч. Не все они, вероятно, встречаются in vivo — для этого соответствующем нитям ДНК нужно оказаться рядом в одной точке сложно устроенного клеточного ядра — однако это может означать, что четырехспиральным структурам отведена какая-то специфическая роль в жизни клетки.
Далеко не всегда образование альтернативных форм ДНК идет клетке на пользу: большинство из них куда менее прочны, чем обычная В-ДНК, и гораздо чаще рвутся. Поэтому последовательности, которые склонны образовывать не-В формы, становятся участками генетической нестабильности и повышенного мутагенеза. Одни исследователи видят в этом двигатель эволюции — если такие участки появляются в генах, связанных с развитием организма. Другие же винят альтернативные формы ДНК во всех видах болезней, связанных со случайными мутациями и перестановками в геноме — от опухолей до шизофрении и аутизма.
Получается, что ДНК содержит не только информацию о строении клеточных белков и РНК, но и о том, какие формы эта информация может принимать, помимо Уотсон-Криковского стандарта. А уже от этих форм, в свою очередь, зависит то, что с этой информацией произойдет: сможет ли клетка ее реализовать или ген, будет вечно молчать, а то и вовсе сломается, породив какие-то дополнительные мутации.
Вероятно, мы научимся однажды вмешиваться в этот процесс — можно было бы, например, построить цепь нуклеотидов, которая имитировала бы третью цепь в спирали и «подсунуть» ее в нужное время в нужном месте, чтобы заблокировать работу какого-нибудь нежелательного гена в клетке. Были даже более смелые предложения — использовать тройную спираль для прицельного редактирования генома: ввести в клетку нуклеотид, который сможет образовать с целевым участком ДНК тройную спираль и побудить систему репарации заменить этот участок на «здоровый» вариант с другой хромосомы.
А пока мы этому только учимся, остается признать структуру ДНК еще одним видом информации — помимо генетической (нуклеотидного «текста») и эпигенетической (доступности генов для считывания) — который несет в себе наш геном. И нам еще предстоит научиться с ним работать, влияя через форму на содержание, или наоборот.
Полина Лосева
Оригинал
Читайте также:
Эрогенные зоны собственного тела и тела партнера оказались зеркальны
Астероид Психея оказался похож на металлическую губку
Биопринтер-эндоскоп напечатал живыми клетками на стенке модели желудка
БЕЛКИ значение слова, meaning of БЕЛКИ in English. Русский словарь Colier
БЕЛКИ Строение. Белки — это полимеры, т.е. молекулы, построенные, как цепи, из повторяющихся мономерных звеньев, или субъединиц, роль которых играют у них ?-аминокислоты. Общая формула аминокислот
где R — атом водорода или какая-нибудь органическая группа.
Белковая молекула (полипептидная цепь) может состоять всего лишь из относительно небольшого числа аминокислот или из нескольких тысяч мономерных звеньев. Соединение аминокислот в цепи возможно потому, что у каждой из них имеются две разные химические группы: обладающая основными свойствами аминогруппа, Nh3, и кислотная карбоксильная группа, СООН. Обе эти группы присоединены к ?-атому углерода. Карбоксильная группа одной аминокислоты может образовать амидную (пептидную) связь с аминогруппой другой аминокислоты:
После того как две аминокислоты таким образом соединились, цепь может наращиваться путем добавления ко второй аминокислоте третьей и т.д. Как видно из приведенного выше уравнения, при образовании пептидной связи выделяется молекула воды. В присутствии кислот, щелочей или протеолитических ферментов реакция идет в обратном направлении: полипептидная цепь расщепляется на аминокислоты с присоединением воды. Такая реакция называется гидролизом. Гидролиз протекает спонтанно, а для соединения аминокислот в полипептидную цепь требуется энергия.
Карбоксильная группа и амидная группа (или сходная с ней имидная — в случае аминокислоты пролина) имеются у всех аминокислот, различия же между аминокислотами определяются природой той группы, или «боковой цепи», которая обозначена выше буквой R. Роль боковой цепи может играть и один атом водорода, как у аминокислоты глицина, и какая-нибудь объемистая группировка, как у гистидина и триптофана. Некоторые боковые цепи в химическом смысле инертны, тогда как другие обладают заметной реакционной способностью.
Синтезировать можно многие тысячи различных аминокислот, и множество различных аминокислот встречается в природе, но для синтеза белков используется только 20 видов аминокислот: аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновая кислота, валин, гистидин, глицин, глутамин, глутаминовая кислота, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, пролин, серин, тирозин, треонин, триптофан, фенилаланин и цистеин (в белках цистеин может присутствовать в виде димера — цистина). Правда, в некоторых белках присутствуют и другие аминокислоты, помимо регулярно встречающихся двадцати, но они образуются в результате модификации какой-нибудь из двадцати перечисленных уже после того, как она включилась в белок.
Оптическая активность. У всех аминокислот, за исключением глицина, к ?-атому углерода присоединены четыре разные группы. С точки зрения геометрии, четыре разные группы могут быть присоединены двумя способами, и соответственно есть две возможные конфигурации, или два изомера, относящиеся друг к другу, как предмет к своему зеркальному отражению, т.е. как левая рука к правой. Одну конфигурацию называют левой, или левовращающей (L), а другую — правой, или правовращающей (D), поскольку два таких изомера различаются направлением вращения плоскости поляризованного света. В белках встречаются только L-аминокислоты (исключение составляет глицин; он может быть представлен лишь одной формой, поскольку у него две из четырех групп одинаковы), и все они обладают оптической активностью (поскольку имеется только один изомер). D-аминокислоты в природе редки; они встречаются в некоторых антибиотиках и клеточной оболочке бактерий.
Последовательность аминокислот. Аминокислоты в полипептидной цепи располагаются не случайным образом, а в определенном фиксированном порядке, и именно этот порядок определяет функции и свойства белка. Варьируя порядок расположения 20 видов аминокислот, можно получить огромное число разных белков, точно так же, как из букв алфавита можно составить множество разных текстов.
В прошлом на определение аминокислотной последовательности какого-нибудь белка уходило нередко несколько лет. Прямое определение и теперь достаточно трудоемкое дело, хотя созданы приборы, позволяющие вести его автоматически. Обычно проще бывает определить нуклеотидную последовательность соответствующего гена и вывести из нее аминокислотную последовательность белка. К настоящему времени уже определены аминокислотные последовательности многих сотен белков. Функции расшифрованных белков, как правило, известны, и это помогает представить себе возможные функции сходных белков, образующихся, например, при злокачественных новообразованиях.
Сложные белки. Белки, состоящие из одних только аминокислот, называют простыми. Часто, однако, к полипептидной цепи бывают присоединены атом металла или какое-нибудь химическое соединение, не являющееся аминокислотой. Такие белки называются сложными. Примером может служить гемоглобин: он содержит железопорфирин, который определяет его красный цвет и позволяет ему играть роль переносчика кислорода.
В названиях большинства сложных белков содержится указание на природу присоединенных групп: в гликопротеинах присутствуют сахара, в липопротеинах — жиры. Если от присоединенной группы зависит каталитическая активность фермента, то ее называют простетической группой. Нередко какой-нибудь витамин играет роль простетической группы или входит в ее состав. Витамин А, например, присоединенный к одному из белков сетчатки, определяет ее чувствительность к свету.
Третичная структура. Важна не столько сама аминокислотная последовательность белка (первичная структура), сколько способ ее укладки в пространстве. По всей длине полипептидной цепи ионы водорода образуют регулярные водородные связи, которые придают ей форму спирали либо слоя (вторичная структура). Из комбинации таких спиралей и слоев возникает компактная форма следующего порядка — третичная структура белка. Вокруг связей, удерживающих мономерные звенья цепи, возможны повороты на небольшие углы. Поэтому с чисто геометрической точки зрения число возможных конфигураций для любой полипептидной цепи бесконечно велико. В действительности же каждый белок существует в норме только в одной конфигурации, определяемой его аминокислотной последовательностью. Структура эта не жесткая, она как бы «дышит» — колеблется вокруг некой средней конфигурации. Цепь складывается в такую конфигурацию, при которой свободная энергия (способность производить работу) минимальна, подобно тому как отпущенная пружина сжимается лишь до состояния, соответствующего минимуму свободной энергии. Нередко одна часть цепи бывает жестко сцеплена с другой дисульфидными (-S-S-) связями между двумя остатками цистеина. Отчасти именно поэтому цистеин среди аминокислот играет особо важную роль.
Сложность строения белков столь велика, что пока еще невозможно вычислить третичную структуру белка, если даже известна его аминокислотная последовательность. Но если удается получить кристаллы белка, то его третичную структуру можно определить по дифракции рентгеновских лучей.
У структурных, сократительных и некоторых других белков цепи вытянуты и несколько лежащих рядом слегка свернутых цепей образуют фибриллы; фибриллы, в свою очередь, складываются в более крупные образования — волокна. Однако большинство белков в растворе имеет глобулярную форму: цепи свернуты в глобуле, как пряжа в клубке. Свободная энергия при такой конфигурации минимальна, поскольку гидрофобные («отталкивающие воду») аминокислоты скрыты внутри глобулы, а гидрофильные («притягивающие воду») находятся на ее поверхности.
Многие белки — это комплексы из нескольких полипептидных цепей. Такое строение называется четвертичной структурой белка. Молекула гемоглобина, например, состоит из четырех субъединиц, каждая из которых представляет собой глобулярный белок.
Структурные белки благодаря своей линейной конфигурации образуют волокна, у которых предел прочности на разрыв очень высок, глобулярная же конфигурация позволяет белкам вступать в специфические взаимодействия с другими соединениями. На поверхности глобулы при правильной укладке цепей возникают определенной формы полости, в которых размещены реакционноспособные химические группы. Если данный белок — фермент, то другая, обычно меньшая, молекула какого-то вещества входит в такую полость подобно тому, как ключ входит в замок; при этом меняется конфигурация электронного облака молекулы под влиянием находящихся в полости химических групп, и это вынуждает ее определенным образом реагировать. Таким способом фермент катализирует реакцию. В молекулах антител тоже имеются полости, в которых различные чужеродные вещества связываются и тем самым обезвреживаются. Модель «ключа и замка», объясняющая взаимодействие белков с другими соединениями, позволяет понять специфичность ферментов и антител, т.е. их способность реагировать только с определенными соединениями.
Белки у разных видов организмов. Белки, выполняющие одну и ту же функцию у разных видов растений и животных и потому носящие одно и то же название, имеют и сходную конфигурацию. Они, однако, несколько различаются по своей аминокислотной последовательности. По мере того как виды дивергируют от общего предка, некоторые аминокислоты в определенных положениях замещаются в результате мутаций другими. Вредные мутации, являющиеся причиной наследственных болезней, выбраковываются естественным отбором, но полезные или по крайней мере нейтральные могут сохраняться. Чем ближе друг к другу два каких-нибудь биологических вида, тем меньше различий обнаруживается в их белках.
Некоторые белки меняются относительно быстро, другие весьма консервативны. К последним принадлежит, например, цитохром с — дыхательный фермент, имеющийся у большинства живых организмов. У человека и шимпанзе его аминокислотные последовательности идентичны, а в цитохроме с пшеницы иными оказались лишь 38% аминокислот. Даже сравнивая человека и бактерии, сходство цитохромов с (различия затрагивают здесь 65% аминокислот) все еще можно заметить, хотя общий предок бактерии и человека жил на Земле около двух миллиардов лет назад. В наше время сравнение аминокислотных последовательностей часто используют для построения филогенетического (генеалогического) древа, отражающего эволюционные связи между разными организмами.
Денатурация. Синтезированная молекула белка, складываясь, приобретает свойственную ей конфигурацию. Эта конфигурация, однако, может разрушиться при нагревании, при изменении рН, под действием органических растворителей и даже при простом взбалтывании раствора до появления на его поверхности пузырьков. Измененный таким образом белок называют денатурированным; он утрачивает свою биологическую активность и обычно становится нерастворимым. Хорошо знакомые всем примеры денатурированного белка — вареные яйца или взбитые сливки. Небольшие белки, содержащие всего лишь около сотни аминокислот, способны ренатурировать, т.е. вновь приобретать исходную конфигурацию. Но большинство белков превращается при этом просто в массу спутанных полипептидных цепей и прежнюю конфигурацию не восстанавливает.
Одна из главных трудностей при выделении активных белков связана с их крайней чувствительностью к денатурации. Полезное применение это свойство белков находит при консервировании пищевых продуктов: высокая температура необратимо денатурирует ферменты микроорганизмов, и микроорганизмы погибают.
Русский словарь Colier. Russian dictionary Colier. 2012
Фолдинг белка • Игорь Иванов • Научно-популярные задачи на «Элементах» • Физика, Биология
Энергия абсолютно прямой цепочки равна нулю. Для того чтобы понизить ее, некоторые звенья должны слипнуться. Но для этого цепочка должна организовать петлю, и наличие петли повышает энергию. Если петля слишком длинная, то большое количество звеньев, которые могли бы связаться друг с другом, остаются без связи. Эти звенья можно соединить, словно на застежке-молнии, укоротив тем самым петлю, но от этого увеличится ее энергия упругости. Поэтому надо найти такую оптимальную длину петли, при которой силы упругости, расширяющие петлю, и силы связи, ее «застегивающие», сбалансированы.
Энергия петли
Пусть имеется петля из m несклеенных звеньев (рис. 2). Характерный угол между соседними звеньями в ней — примерно 2π/m. (На самом деле, этот угол меняется от звена к звену, поскольку наиболее выгодная форма петли вовсе не круговая, но для приближенного исследования наша оценка вполне пойдет.) Таких соединений имеется m штук, поэтому петля обладает энергией 2π2A/m. Застегнем ее еще на одно звено. Тогда петля станет короче на два звена, а энергия всей цепочки изменится на величину
Если же, наоборот, разорвать одну связь, то энергия цепочки изменится на
Петля из m звеньев является оптимальной, когда оба эти изменения энергии положительны, то есть с энергетической точки зрения петлю невыгодно ни удлинять, ни укорачивать. Поскольку B много меньше A, ясно, что величина m получится значительно больше единицы. Поэтому для примерной оценки оптимального m эти два неравенства можно заменить одним равенством:
Таким образом, оптимальная длина петли примерно равна
Во всех последующих формулах под буквой m будет подразумеваться именно оптимальная длина петли. Наконец, полезно найти энергию упругости такой оптимизированной петли; она получается равной
Это выражение (энергия петли в m/2 раз больше величины B) очень удобно для дальнейших вычислений.
Когда появляется петля?
Теперь легко выяснить, при цепочке какой длины будет выгоднее не оставаться прямой, а свернуться в петлю с «двойным хвостиком» длины n. Для этого нужно, чтобы полная энергия такой конфигурации была отрицательна:
Таким образом, если длина цепочки N > m + 2(m/2) = 2m, то ей выгоднее образовать петлю.
Когда появляется вторая петля?
«Двойной хвостик» — это не максимально удобная конфигурация, поскольку в каждом звене «работает» только один из контактных участков, а хотелось бы, чтоб работали оба, хотя бы у некоторых звеньев. Это можно устроить, образовав вторую петлю (рис. 3).
Для того, чтобы сосчитать, когда переход к двум петлям энергетически выгоден, возьмем цепочку длины N и сосчитаем ее энергию для одной петли и для двух петель:
Условие для перехода к двумя петлям, E1 > E2, тогда даст N > 8m.
Очень длинная цепочка
Когда цепочка становится очень длинной, ее удобно сворачивать так, чтобы как можно большее количество звеньев было склеено обоими своими контактными участками. Таким образом мы получаем конфигурацию, напоминающую обрамленное петельками полотно. Если закрыть глаза на то, что соседние петли мешают друг другу, можно провести аналогичное вычисление и найти наиболее выгодное количество петель для заданного N (оно растет пропорционально квадратному корню из N). Если же учесть, что петли мешают друг другу, то вычисления резко усложнятся. Однако общая структура останется той же: наиболее выгодным будет плоское полотно некоторой формы, обрамленное по краям петельками. Желающие могут попробовать найти оптимальную форму полотна с помощью компьютерного моделирования, а также поразмышлять над аналогичной задачей в трехмерном пространстве.
Перелом конечностей | Американский колледж ветеринарных хирургов
Как правило, следуйте всем инструкциям, которые дает вам ваш ветеринарный хирург. Некоторые из этих инструкций могут включать следующие рекомендации:
Уход за бинтами
Если у вашего питомца наложена шина или гипсовая повязка для окончательного лечения перелома, или если после операции была наложена повязка для облегчения боли и отека, для безопасного и эффективного ношения повязки необходимо тщательное наблюдение и уход.Серьезные проблемы могут возникнуть из-за простых повязок; Пожалуйста, не стесняйтесь звонить своему ветеринару, если обнаружите какие-либо проблемы. Следите за повязкой на предмет соскальзывания или повреждения при жевании. и т. Д. Если она меняет положение, становится влажной или теряет целостность, могут возникнуть серьезные проблемы с заживлением или могут возникнуть новые проблемы с пролежнями. Пожалуйста, позвоните своему ветеринару, если произойдут какие-либо изменения положения повязки; может потребоваться замена повязки.
Если конец повязки открыт, проверяйте два центральных ногтя на ногах дважды в день.Они должны быть близко друг к другу. Если они расходятся, это указывает на опухоль на пальцах стопы , которая может привести к серьезным осложнениям. Повязка должна быть осмотрена ветеринаром в течение 4-6 часов. Пожалуйста, позвоните своему ветеринару, если заметите опухоль.
Повязка должна быть чистой и сухой. Накладывайте полиэтиленовый пакет на конец каждый раз, когда ваш питомец выходит на улицу. В помещении снимите пластиковое покрытие.
Если повязка намокнет или вы заметите какой-либо неприятный запах , исходящий от повязки, его необходимо будет оценить в течение 4-6 часов; могут развиться серьезные кожные проблемы.
Мы настоятельно рекомендуем вам никоим образом не изменять повязку . Добавление ленты или другой обертки может серьезно повлиять на безопасность повязки / шины. Если вас беспокоит безопасность или целостность повязки, вернитесь к ветеринару или ветеринару для повторной оценки и повторного применения при необходимости.
Пожалуйста, знайте, что повязки и шины могут вызвать очень серьезные осложнения . Они могут быть эффективным средством лечения для заживления переломов и снятия боли, но необходимо тщательное наблюдение и последующее наблюдение.Если у вас есть какие-либо вопросы или опасения, связанные с проблемами, описанными выше, или в целом относительно ношения повязок / шин, пожалуйста, не стесняйтесь позвонить своему ветеринару или вернуться для оценки. Ваш питомец не может сказать вам, что повязка болит или неудобна; нужно внимательно относиться к любым изменениям.
Ограничение деятельности
Ограничьте своего питомца в соответствии с указаниями ветеринарного врача; это часто включает ограничение его или ее в одной части дома на ковровом покрытии.Используйте детские калитки и т. Д., Чтобы предотвратить доступ к скользким полам или лестницам. Не позволяйте прыгать с мебели. Оставайтесь без присмотра в небольшом помещении, комнате или ящике. Не позволяйте играть, бегать или прыгать. Собакам следует использовать короткий поводок, когда они выходят на улицу, когда вы выходите в туалет. Лучший способ удержать кошку в замкнутом пространстве — завести большую собачью клетку, где можно разместить корм и литр. Небольшая комната также может служить закрытым помещением, но кошки любят прыгать, поэтому мебель следует убрать.
Ваш питомец будет чувствовать, что полностью использует ногу, прежде чем перелом достаточно заживает .Продолжайте вводить ограничение в течение этого времени, пока заживление кости не будет подтверждено рентгеном. Несоблюдение этого правила может вызвать серьезные проблемы с заживлением.
Помощь вашему питомцу
Вашему питомцу может потребоваться помощь, чтобы стоять и ходить в первые несколько дней или недель после травмы. Даже если ваш питомец может передвигаться самостоятельно, часто бывает разумно оказать легкую помощь, пока он или она не станет полностью устойчивым, особенно на скользкой поверхности или при подъеме или спуске по небольшому лестничному пролету.Собаки часто принимают помощь; кошки редко делают. Некоторые собаки сопротивляются помощи и отказываются двигаться. При необходимости скорректируйте свои усилия, чтобы помочь своему питомцу, не создавая дополнительных трудностей для вас обоих. Некоторых питомцев нужно будет сильно поддерживать, другим просто нужна легкая опора, чтобы не поскользнуться или не упасть на бок.
Для травм передней ноги можно сделать простую повязку из двух ремней . Одна лямка проходит под правой ногой и выходит за левую ногу; другой ремень проходит под левой ногой и выходит за правую ногу.Ремни должны пересекаться на нижней стороне груди, и вы держите все четыре конца в качестве ручки над верхней частью груди. Отрегулируйте длину ремня, чтобы вам было удобно стоять прямо, когда вы помогаете своему питомцу. Варианты этой техники строповки можно настроить по своему усмотрению.
При травмах задней части ноги аналогичный строп может быть изготовлен из двух узких ремней или одной широкой ленты . Два ремня можно закрепить петлей под каждой задней ногой и удерживать, как если бы вы натягивали брюки; отрегулируйте длину ремней, чтобы вам было удобно стоять во время оказания помощи.В качестве альтернативы, широкую ленту ткани можно использовать как перевязку под животом с одной стороны на другую прямо перед задними ногами.
В продаже имеется несколько продуктов слинга, специально разработанных, чтобы помочь вашей собаке выгуливать во время выздоровления. Вы можете найти некоторые из этих продуктов в Интернете, и их определенно проще использовать.
Физиотерапия
Когда кость сломана, происходит множество вещей, из-за которых нога плохо функционирует в период заживления перелома.Повреждены мышцы, нервы и кровеносные сосуды; результат — боль и плохая мышечная функция. Если нога слабая и / или болит стоять, животное не будет ею пользоваться. Когда нога не используется в течение нескольких дней или недель, суставы становятся жесткими, мышцы становятся меньше, а заживление костей также замедляется. В физиотерапии при заживлении переломов используются методы, направленные на повышение комфорта и облегчение работы ног без ущерба для заживления костей . Некоторые из более простых методов можно использовать дома; ветеринарные физиотерапевты под руководством вашего ветеринарного врача используют более продвинутые методы.Тщательная координация между ветеринарным врачом вашего питомца и физиотерапевтом может привести к отличным результатам и эффективному возвращению к нормальной функции ног.
Более простые методы, которые можно использовать дома, включают:
- Холодная терапия : В первую неделю после травмы прикладывание холодных компрессов к месту перелома уменьшит воспаление, отек и боль; это сделает вашего питомца более комфортным и позволит ему раньше использовать ногу.
- Терапия движением : В первый месяц после травмы сгибание и разгибание суставов травмированной ноги будет поддерживать здоровье суставов, пока ваш питомец не использует ногу полностью.Первоначально этот диапазон сгибания и разгибания будет довольно небольшим; цель состоит в том, чтобы переместить сустав, не вызывая боли. По мере заживления можно применять большее растяжение, чтобы достичь более нормального диапазона сгибания и разгибания суставов.
- Лечебный массаж : После того, как начальная стадия болезненного воспаления утихнет, вас могут попросить начать массаж кожи и мышц вокруг поврежденной кости. Эта терапия предотвратит образование плотной рубцовой ткани, которая позже помешает нормальному движению ноги, а также облегчит боль в промежуточный период заживления.
Заживление костей зависит от некоторых из факторов, перечисленных в таблице выше. Кости молодых собак и кошек заживают быстрее, чем кости старых собак и кошек. Кости с большим количеством мышц и тканей кровеносных сосудов, поврежденных в результате травмы, заживают медленнее, чем кости, окруженные здоровыми тканями. Кости, восстановленные с минимальной хирургической травмой (без хирургического разреза или с небольшим хирургическим разрезом) заживают быстрее, чем кости с большим количеством хирургических травм. Эти факты являются причиной того, что мы учитываем все эти факторы при выборе вариантов ремонта.
Ваш ветеринарный врач должен сказать вам, чего ожидать от выздоровления. Как правило, переломам требуется минимум 4 недели у молодых щенков и 8 недель у старых животных, чтобы в достаточной степени зажить и начать переходить к нормальной активности
Мы не можем позволить себе роскошь посоветовать нашим пациентам «расслабиться» и «держаться подальше», поэтому мы должны положиться на вас в установлении ограничений, даже когда ваш питомец умоляет поиграть и поиграть в . Это долгие 2–3 месяца, когда светит солнышко и белки просятся, чтобы за ними погнались; Просто знайте, что катастрофа может произойти, если ремонт перелома будет сделан слишком рано.Но переломы заживают, и кости могут вернуться к нормальной форме и прочности. При пристальном внимании и соответствующем последующем наблюдении и физиотерапии наши сломанные домашние животные могут вернуться к совершенно нормальной жизни.
Сойка сбивает белку с линии электропередачи — The Mercury News
Розовый, как робко краснеет,
дрожь сакуры
в объятиях весны.
— хайку Дороти Пирс, Лафайет
Дорогой Гэри! Нам с женой очень понравились истории о белках.Я думал, что скажу тебе нашу.
Мы живем в Найтсене на пяти акрах. Мой 93-летний папа живет примерно в 500 футах от нас. Он кормит нескольких рыжих белок, которые путешествуют по линиям электропередач от его дома к нашему.
Прошлой осенью, когда мы работали во дворе перед домом, мы заметили рыжую белку, которая держала его в хвосте вдоль линий… когда с неба на него ударила кустарниковая сойка, сбив его с линии электропередачи на землю, на 12 футов ниже.
Это было похоже на громкую пощечину, но он приземлился на ноги.Белка встала на задние лапы и громко болтала сойке, которая только вскрикнула и улетела.
Сойка играла?
Дейл и Мерили Галлоуэй,
Knightsen
Дорогие Дейл и Мэрили! Эта сойка-скраб звучит для меня довольно серьезно! Вы не совершаете прыжок по спирали, не врезаетесь в белку и не сбиваете ее с линии электропередачи высотой 12 футов без причины.
Белки часто отбирают яйца из птичьих гнезд и едят их из-за содержания кальция.Полагаю, у сойки было недовольство из-за пропавших яиц. Я рада, что ты не говоришь на белке или сойке. Бьюсь об заклад, это бы обожгло тебе уши.
Дорогой Гэри! Стая индеек насиживает насесты на высоких деревьях на холме над нашим задним двором, но они держались особняком подальше от нашего двора внизу — до недавнего времени.
Иногда они используют нашу крышу как взлетно-посадочную полосу для взлета на вершины деревьев.
Однако сегодня было впервые.
Самка спикировала и приземлилась во дворе с большим яйцом в клюве! Когда я открыл дверь патио, она улетела, оставив яйцо, которое мы подобрали и выбросили.Он был сломан, и его содержимое просачивалось наружу.
Едят ли дикие индейки собственные яйца?
Джуди,
Морага
Дорогая Джуди, они не едят свои собственные яйца … но, очевидно, они не против есть яйцо, которое принадлежит кому-то другому. Другие птицы, такие как сойки, вороны и вороны, совершают набеги на гнезда и поедают птичьи яйца.
Дорогой Гэри! В течение последних двух недель к нам во двор приходили две дикие курицы-индейки, обычно утром, а затем днем.
В это же время я обнаружил гнездо с четырьмя яйцами, спрятанными в задней части двора. Очень редко я вижу индейку, сидящую на яйцах.
Мои вопросы: сколько времени нужно, чтобы вылупилось яйцо и остались ли яйца жизнеспособными, если курица постоянно на них не сидит?
Нам нравятся посетители, хотя какашки раздражают.
Пирсон,
киберпространство
Уважаемый Пирсон! Яйца индейки вылупляются примерно 28 дней.
Когда мама-индейка покидает гнездо на перерыв, она осторожно прикрывает яйца своими перьями, чтобы согреться, пока ее нет. Они вылупятся.
Дорогой Гэри! У нас есть прибавление в нашем районе. Красноплечий ястреб построил огромное гнездо в высоком секвойи недалеко от нашего дома, он очень громко кричит и его можно увидеть на деревьях внутри и вокруг гнезда.
Я живу в своем доме в Лафайете 22 года и видел множество ястребов с красными хвостами и острозубых ястребов возле нашего двора, но этот ястреб с красными плечами — первый.
Они всегда такой вокал или шумят из-за яиц в гнезде? Насколько они распространены в округе Контра-Коста?
Чарльз Скуче,
Лафайет
Дорогой Чарльз: Обычно они довольно вокалистки. Наличие в гнезде яиц (или птенцов!) Сделает их очень шумными. Они довольно распространены по всему Восточному заливу.
Свяжитесь с Гэри Богом по адресу [email protected]; или напишите Gary, P.O. Box 8099, Walnut Creek, CA 94596.
Ведение тетради для вязания — Носки со сломанными ребрами
Примечания к носкам со сломанными ребрами
Я люблю, люблю, люблю эту тетрадь, в которой я записываю все свои текущие заметки о носках со сломанными ребрами (или любой другой незавершенной работе, которую я вяжу в данный момент).Блокнот был создан в январе, когда я решила присоединиться к онлайн-семинару New Beginnings Journal от Джулианы Коулз.
Блокнот «Идеи вязания белки» 2013 начал жизнь как дневник RSPB в спиральном переплете. Для его изготовления потребовалось много приклеивания клейкой лентой и закрашивания ленты. Мне следовало использовать больше украшений на страницах, но я хотел сохранить много места для письма. В этом блокноте замечательно то, что писать в нем одно удовольствие. Я быстро начал использовать его для своих незавершенных работ.Я даже обнаружил, что использую изображения, чтобы влиять на выбор цвета для новых проектов.
Конечно, когда я выбирал эту книгу для работы, возможно, на меня повлияла красивая фотография европейской красной белки на обложке именно этого дневника 2013 года.
В тетрадке для вязания
- Я начинаю с отметки даты, когда я начал проект, а в конце записываю дату, когда я закончил проект.
- Я записываю свои мысли об узоре или дизайне, когда работаю над ним.
- Какой образец строчки я использую.
- Размер иглы.
- Пряжа, которую я выбрал.
- Содержание волокна в пряжи.
- Я прошиваю любые образцы (полезно иметь усиленные страницы).
- Я записываю, о чем я думал, когда решил начать проект.
- Что я смотрю по телевизору.
- На самом деле, я просто записываю все, что, по моему мнению, может быть полезно запомнить, если я захочу еще раз вернуться к этому шаблону.
- Я пишу о том, что сработало, а что нет.
- Я пишу о любых заботах при вязании узора, например, думаю ли я, что пряжа прослужит до конца проекта.
- Что бы я изменил (если бы), если бы снова захотел вязать эти носки.
- Я также отмечаю, где были сделаны фотографии готовых носков и возникали ли какие-либо проблемы, когда мы фотографировали.
Удивительно, как часто фотография в записной книжке, кажется, влияет на меня, когда я иду на чердак, чтобы покопаться в своем тайнике для пряжи при выборе пряжи для проекта.Носки Broken Rib были связаны с использованием пряжи Zitron Trekking XXL, которая была у меня в запасе пряжи для носков. Это цвет 1003, и работать с ним было странно. На шаре он имел темно-розовый оттенок вместе с серо-коричневым и румяно-розовым, но снаружи он выглядел более темно-абрикосовым через серо-коричневый, румяный персик и оттенок каштана.
Фотографирование носков со сломанными ребрами
Этот переходный цвет также оказался сложной задачей для фотографирования носков, когда они были закончены. Мы с Д.Х. отправились в наше любимое место на берегу моря, чтобы сфотографировать носки, но я был недоволен фотографиями, когда мы вернулись домой.
Я стоял на камнях разного цвета и типа, я стоял на гальке, я стоял у волн. Д.Х. посмотрел на них и сказал: «Разве они не сделают?»
В следующие выходные мы отправились в лесную долину.
Я был более доволен этими носками, но они все еще не такие, какими я представлял себе носки на фотографиях. Фотографировать носки — непростая вещь. У меня есть четкое представление о том, как я хочу, чтобы фотографии выглядели, но я не могу сфотографировать их успешно на себе.Так что DH любезно берет фотографии со мной, постоянно спрашивая…
- Как у меня выглядят ступни?
- Красиво смотрится этот изгиб?
- Носки хорошо выглядят?
- Есть ли складки там, где их быть не должно?
- Цвет лучше смотрится в тени или на солнце?
- У вас есть подробности крупным планом?
Хотя подозреваю, что DH просто смущает то, что могут подумать прохожие!
Это также вызывает свои собственные проблемы, он предпочитает использовать более длинный объектив 70-300 мм, чтобы не было очевидно, что он фотографирует мои ноги, тогда как, я думаю, фотографии выглядят лучше, когда он использует объектив 50 мм, но с он не может просто увеличить масштаб, у него нет другого выбора, кроме как быть ближе к объекту фотографии — ногам в носках.Это также приводит к бормотанию с обеих сторон.
Возможно, вам будет интересно узнать, что для большинства фотографий на открытом воздухе мы использовали зеркалку Nikon D3000 и объектив Sigma 70-300mm F4-5.6 APO DG Macro HSM. Я использовал объектив AF-S Nikkor 50mm f / 1.8G с настройкой диафрагмы f / 1.8, чтобы делать внутренние фотографии тетради для вязания.
Я люблю носить носки со сломанным ребром. Они удобны, а узор из ломаной резинки очень легко связать на ноге. Я не хотела, чтобы ребро продолжалось на подъеме, потому что я считаю, что предпочитаю гладкую вязку, когда ношу носки вместе с туфлями.Но я не хотел, чтобы ребро внезапно оборвалось, поэтому решил перерезать его.
Итак, что вы любите использовать в качестве тетради для вязания, чтобы отслеживать изменения, которые вы вносите в узор, или составлять списки желаний узоров, которые хотите связать? Вам нравится создавать художественный журнал, в котором можно писать заметки о вязании? Возможно, вы предпочитаете использовать записную книжку в линию или храните все свои заметки на ноутбуке или iPad?
Отравление ртутью от лампочек?
Эрика Роуэлл , сегодняшний приглашенный блоггер, веб-редактор и продюсер в Environmental Defense, а также наш постоянный эксперт по компактным флуоресцентным лампам.
В прошлом году, переоборудовав свою квартиру на энергосберегающие компактные люминесцентные лампы (КЛЛ), я сломал две. Я открыл окно, собрал осколки, вытер пол влажным бумажным полотенцем, положил полотенце и сломанные КЛЛ в полиэтиленовый пакет и связал его. Мой супер избавился от сумки. Меня не беспокоит воздействие ртути — они сломались пару месяцев назад, и у меня с кошками все в порядке. Похожий инцидент в штате Мэн был другой историей.
Когда Брэнди Бриджес разбила спираль КЛЛ в спальне своей дочери, зная, что в нем содержатся следы ртути, обеспокоенная мать принялась за утилизацию.После смешения хороших и плохих советов, она получила счет за уборку в размере 2000 долларов и много страха (читайте всю историю).
Чему мы можем научиться у мисс Бриджес? Знайте основные факты.
Несмотря на то, что КЛЛ содержат некоторое количество ртути, они фактически снижают общее загрязнение ртутью. Как? КЛЛ требуют меньше энергии для выработки электростанциями, которые, как правило, выделяют ртуть. CFL устраняет три четверти загрязнения ртутью традиционной лампочки: 3,3 мг против 13.6 мг. Таким образом, использование КЛЛ сокращает количество ртути, которую мы попадаем в наш воздух и поверхностные воды. Это означает, что меньше токсинов попадает в нашу питьевую воду и рыбу.
При правильной утилизации следы ртути в лампах не представляют угрозы для окружающей среды. В среднем КЛЛ содержит от 4 до 5 мг ртути — немного по сравнению с другими предметами повседневного обихода, такими как термометры (500 мг), старые термостаты (3000 мг) и обычные офисные светильники (40 мг).
В случае поломки лампы примите следующие простые меры. Если КЛЛ сломается, сначала откройте ближайшие окна, чтобы рассеять пар, который может выйти. Затем подмести его вместо того, чтобы пылесосить, чтобы свести к минимуму испарение ртути (тогда она становится токсичной). Не используйте руки. Наконец, протрите место влажным одноразовым бумажным полотенцем, чтобы собрать все осколки стекла. Поместите все фрагменты в герметичный пластиковый пакет и позвоните по телефону 1-800-CLEAN-UP или посетите сайт earth911.org, чтобы узнать, где их выбросить.
Когда КЛЛ перегорает, спустя годы, сдавайте его на переработку. Варианты переработки КЛЛ становятся все более распространенными; позвоните в местный орган власти или посетите сайт earth911.org, чтобы узнать, есть ли поблизости пункт высадки. Когда мы переходим на энергосберегающее освещение, нам также необходимо побуждать наши сообщества предоставлять местные предприятия по переработке отходов. А пока подумайте о покупке в магазинах, которые уже перерабатывают, например в Ikea.
Для получения дополнительной информации о КЛЛ и надлежащей утилизации см. Следующие информационные бюллетени:
Эта запись была размещена в разделе «Здоровье». Добавьте в закладки постоянную ссылку.И комментарии, и обратные ссылки в настоящее время закрыты.
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Как не дать белке съесть все птичьи семена из кормушки
Добро пожаловать в 191-й понедельник метаморфоз!
Я потратил много времени на выполнение поручений и на то, чтобы кое-что сделать по дому.Давным-давно я поделился этим видом на свою застекленную веранду. Как видите, это полная история, и у меня есть кормушки для птиц, свисающие с пастушьих крючков на палубах по обе стороны от крыльца. Кормушка слева свисает с палубы, на которой стоит стол с зонтом и решеткой. Кормушка справа свисает с палубы, на которой стоит еще один стол с беседкой наверху.
Каждый раз, когда я наполняю кормушки, появляется мистер Хитрый Белочка и убирает их в мгновение ока.Птицы почти ничего не получают, потому что он и его почки останавливаются на кормушках. Я бы не возражал против того, чтобы мистер Белка получил немного семян, но он их все проглотил всего за пару дней.
Даже когда я попробовал «горячее семя» в оконной кормушке….
Это его даже не остановило. Судя по всему, ему нравится, что его еда немного острая. (Больше фотографий Макса и хитрой Белки можно найти здесь: So Much for Hot Seed)
Я пробовал разные вещи на протяжении многих лет, и кое-что работало ненадолго, но в итоге мистерБелка придумала способ обойти мое последнее препятствие. Они безумно умны! Когда я попытался надеть обтяжку на крючки для пастухов (трюк, о котором я где-то читал), он держался подальше от кормушек около 3 дней, затем он сообразил, что все еще может наехать на крючок поверх обтягивающих крючков и добраться до кормушки. Поскольку эта кормушка отключается, если он попадает на кольцо, где приземляются птицы, он свешивается сверху и очищает его.
Итак, вчера я был в моем любимом птичьем магазине и увидел эти удлиненные пастушьи крючки.Я купил один и, вернувшись домой, попытался снять один из пастушьих крючков, чтобы установить новый, более длинный крючок. Я быстро столкнулся с проблемой. Два нижних винта так сильно заржавели, что они просто рассыпались, когда я пытался их открутить.
Итак, я спросил хороших парней из Home Depot, что делать, и они порекомендовали эту штуку под названием спиральный винтовой экстрактор. Вы когда-нибудь видели такое? Я не имел. Вернувшись домой, я посмотрел онлайн-видео, показывающее, как им пользоваться, поскольку на упаковке было очень мало информации… в основном это были фотографии, которые вы видите на лицевой стороне.
«Предположительно» это работает: вы просверливаете отверстие в верхней части винта, которое не можете удалить.
Затем вы вставляете отвертку в проделанное вами отверстие. Затем вы берете гаечный ключ и выкручиваете экстрактор обратно из отверстия. Винт должен выйти вместе с этим.
Я использовал бит 1/8, пытаясь просверлить отверстие в верхней части проржавевшего винта, как рекомендовано на упаковке.Практически сразу кончик укуса отломился, ударив меня по руке. Ой. Хорошая причина всегда носить защитные очки. На картинке ниже вы не можете так хорошо это сказать, но верхняя часть бита отсутствует. Я бросил его в корзину, но потом вынул обратно, чтобы сделать снимок и поделиться им. Он все еще довольно острый на конце, поэтому мне интересно, можно ли его еще использовать.
Я действительно не понимаю, как можно просверлить отверстие в верхней части ржавого металлического шурупа. Возможно, для этого потребуется сверло гораздо более сильное, чем то, что у меня есть сейчас.У кого-нибудь был опыт с этим?
Я отказался от крюка пастухов на той стороне палубы (палуба с решеткой) и решил поработать с другой, которая свисает с палубы с беседкой наверху. К счастью, все четыре винта вышли прямо из пластины, на которой крепился крючок. Это было в более защищенном месте, и вершины винтов не сильно заржавели / не испортились.
Я предварительно просверлил четыре отверстия для монтажной базы для нового пастушьего крючка, и вот как новый крюк выглядит на месте.Я также добавил перегородку к верхней части питателя, что я пробовал в прошлом, но не сработало. Но теперь, когда кормушка так далеко, я надеюсь, что мистер Белка не сможет выпрыгнуть и приземлиться на нее. Если он вылезет из длинного крюка, надо надеяться, что перегородка сбивает его с толку… хар-хо. Извините, не удержался.
Если хитрая белка прыгнет на ринг (куда приземляются птицы), он отключится. Если он вылезет из длинного пастушьего крюка, надеюсь, ему не удастся пройти через перегородку.Время покажет, сработает ли это… Я буду держать вас в курсе.
Итак, вы когда-нибудь использовали экстрактор спирального шнека? Есть какие-нибудь советы, как просверлить отверстие в верхней части ржавого шурупа? Я надеюсь, что кто-то там может дать несколько советов в этом затруднительном положении, потому что я бы с удовольствием снял другой пастуший крючок и также установил более длинный на этой стороне.
Чтобы получить больше удовольствия от белки и увидеть, насколько умны эти маленькие мерзавцы, ознакомьтесь с этим постом о Леоне и Перл: Белка перехитрила кормушку для птиц, История Леона и Перл
С нетерпением жду ваших замечательных «До и после» в этот понедельник с Метаморфозами!
Метаморфозы Понедельник:
Если вы участвуете в Metamorphosis Monday, вам нужно будет связать «постоянную ссылку» с вашим MM-сообщением, а не с общим адресом блога.Чтобы получить постоянную ссылку, щелкните название своего сообщения, затем просто скопируйте и вставьте адрес, который отображается в адресной строке вверху вашего блога, в поле «url» для InLinkz.
Для того, чтобы установить связь, вам нужно будет добавить ссылку в свой MM-пост обратно на вечеринку.
Если вы хотите добавить кнопку MM в свое сообщение, просто скопируйте и вставьте кнопку Met Monday на свой компьютер и выгрузите ее, как и другие фотографии в сообщение. Или щелкните категорию «Другое» вверху блога и в Metamorphosis Monday.Здесь вы найдете HTML-код кнопки.
ПОЖАЛУЙСТА, НЕ набирайте заглавными буквами… он разносит ссылки вне поля зрения.
ПОЖАЛУЙСТА, ОБЯЗАТЕЛЬНО свяжите посты «До» и «После», которые относятся к дому, садоводству, крафту, рисованию, шитью, кулинарии и тому подобному. Не устанавливайте связь, если вы делаете это для продвижения веб-сайта или продукта.
ПОЖАЛУЙСТА, С уважением относитесь к читателям BNOTP, посетителям и тем, кто участвует в Met Monday, не размещая ссылки на посты, неуместные для вечеринки.
Давай попробуем сегодня что-нибудь веселое! Пожалуйста, посетите человека, который связывался до вас и после вас … так каждый получит несколько посещений.Надеюсь, вы еще посетите, конечно.
* Если сообщение спонсируется или продукт был предоставлен бесплатно, это будет указано в сообщении. Некоторые ссылки могут быть партнерскими ссылками, и как партнер Amazon я могу зарабатывать на соответствующих покупках. *
Белка, которой снилось безумие Крейг Стоун
Каково этоКаково это
Быть без дома
Как полное неизвестное
Как катящийся камень?
Эта книга ответит на этот вопрос — по крайней мере, частично.Я уже знаю героя и рассказчика Колосса Сослосса из другого автобиографического романа Крейга Стоуна «Стук жизни». В серии Белка, которой снилось безумие Колосс бросает работу, которую он терпеть не может, сбегает из своей квартиры и собирается осуществить мечты, которые он отстаивает. С двумя мешками и спальным мешком, затянутым в третий мешок, он устанавливает форт
Каково этоКаково это
Быть без дома
Как совершенно неизвестное
Как катящийся камень?
Эта книга ответит на этот вопрос — по крайней мере, частично.Я уже знаю героя и рассказчика Колосса Сослосса из другого автобиографического романа Крейга Стоуна «Стук жизни». В серии Белка, которой снилось безумие Колосс бросает работу, которую он терпеть не может, сбегает из своей квартиры и собирается осуществить мечты, которые он отстаивает. С двумя сумками и спальным мешком в третьем, он отправляется жить в парк …
« Gladstone Park — это тихий оазис в центре Северного Лондона. Во многом его очарование. происходит от усаженных деревьями проспектов, пересекающих зеленые просторы и восходящих к началу 20-го века.Определенно можно скоротать пару часов, блуждая по этим тропинкам, останавливаясь в пути, чтобы покормить уток, полюбоваться яркими цветами, […] « (с www.londontown.com)
… и становится бездомным — бездельником — по собственному желанию (в отличие от того, о ком поет Боб Дилан). Оказывается, приведенное выше описание парка подходит не всем:
Мой спальный мешок слишком велик для него. сумка, мне холодно, я устала, на моей кровати птичий помет, кожа чешется, жирные мухи периодически приземляются мне на лоб, а смотритель парка идет в мою сторону.
Помимо этих «мелочей» он постоянно боится других бомжей. Это могли быть убийцы, сумасшедшие или сумасшедшие убийцы. Особенно ночью, когда каждая тень становится силуэтом призрака, а каждая шелестящая веточка — ломающейся костью, Колоссу приходится отбросить последнюю каплю романтического представления о своей новой жизни.
Здесь я должен упомянуть, что Крейг Стоун сделал именно это. Его мечтой было когда-нибудь стать писателем.
«Я уволился с работы, вышел из квартиры и пошел в парк со спальником и ручкой. Я думал, что без звонка телефона и без кофе я бы никогда не выпил за других и бессмысленные таблицы Excel, а люди сидят в безопасности, но переживают неудачи — без всего этого, если бы я просто все бросил, может быть, у меня это получилось бы. Может, я напишу ту книгу, о которой я думал со школы. (из профиля Крейга Стоуна)
Итак, я думаю, вам нужно добавить ручку и блокнот к приведенному выше списку.
Я бы сказал, что история в этой книге не является ни персонажем, ни сюжетом, а зависит от местоположения и . Гладстон-парк, увиденный глазами рассказчика, его деревья и кусты, утиный пруд и заброшенный дом с привидениями — это секретная фигура истории. Излишне говорить, что я собираюсь посетить этот парк (днем!) В следующий раз, когда буду в Лондоне. Читатель сидит прямо перед глазами рассказчика. Иногда, оглядываясь назад, я вижу, как его мозг работает, мечтает, , кошмар, , а иногда смотрит на мир через линзы и становится свидетелем самых сюрреалистических сцен.В этой истории есть несколько безжалостно забавных моментов, вызванных практически неизмеримыми сокровищами сравнений автора. В нем также много глубоких философских мыслей, большинство из которых мне просто приходилось отмечать в моем Kindle, чтобы перечитывать их снова и снова. Но в нем также есть мрачные и тревожные описания ухудшения состояния наших пушистых и пернатых друзей. Будьте осторожны: эти части довольно напряженные!
Я не знаю, какой образ у вас возникает в голове, когда вы читаете название книги Белка, которая мечтала о безумии , но держу пари, деньги за пельмени, это неправильный.К решению этой «головоломки» ведут две интермедии, сами по себе захватывающие рассказы.
Написание Крейга Стоуна оригинально и уникально (насколько я могу судить по книгам, которые я читал до сих пор в своей жизни), и он заслуживает особого внимания. Сделайте себе одолжение и ознакомьтесь с его книгами. Все они великолепны. Увы, теперь у меня заканчиваются книги Крейга Стоуна. Надеюсь на новый скоро.
(все фотографии автора с его веб-сайта обработаны и обрезаны мной)
__________
Обновление 13.09.2016
[Фотография: Фотоархив CBS / Getty Images]
Это Роальд Даль отвечает на телефонный звонок.