Угарные выражения: Угарные выражения

Содержание

Угарные выражения

 

На нашем сайте собраны угарные выражения обо всем на свете. Читаем, улыбаемся, а может даже и смеемся!

 

 

 


К сожалению, в жизни часто приходится употреблять выражение «к сожалению».


Глядя на саперов, понимаешь: жизнь — это ведь счастливая возможность многократно ошибаться!


Ну а с какими еще известными гениталиями вы успели поработать?


Вам нужно работать и работать, потому что, уважаемые земляки, потому что, потому что. Ну, зачем вам в пятьдесят лет думать о пенсии?


Каждый способен на большее, чем предполагает, но на меньшее, чем на что рассчитывает.


Чтобы сохранить здоровье, хитрецы поучают сверху или издалека.


Обман обманщиков: визит хозяев лотереи в налоговую!


Искушение — это, то перед чем невозможно устоять, всё остальное просто — трудности.


Трагедия людей заключается в том, что они делят неделимый мир.


Мужчинам тяжелее всего сохранять холодную голову на пляже.


Повезло в браке — это когда теща смотрит на тебя взглядом адвоката, а не прокурора.


Повинуясь первобытному инстинкту, как настоящий охотник, на ужин я изловил, освежевал, приготовил и съел сельдерей.


Маленькое бесчеловечное пожалуйста.


Вовремя вброшенная бочка вина превращает народные волнения в гуляния.


Не тот самый лютый враг, кто топчется по живому, а тот, кто душу рвёт.


— Вас интересует моё семейное положение? — Вовсе не интересует. — Я не женат. — О, это очень интересно!


— Не волнуйся, рано или поздно мы этих свидетелей откопаем. — Именно это вам и придётся сделать — откопать их!


Заметил такую вещь — чем ближе утро, тем удобней подушка!!! А самая удобная поза для сна всегда случается после звонка будильника.


В жизни больше всего впечатлений, от собственных ошибок и заблуждений.


Зима — это ледяной осколок реальности расколотого на части мира…


Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53


Рекомендуемые статьи:

Прикольные выражения и Смешные фразы о Жизни

Смешные и прикольные фразы о Жизни

Все Прикольные фразы диджея

Жизнь просто себе идёт. Правда, иногда она идёт просто на х*й.
ИРЭНА КАРПА

Жить нужно так, чтобы депрессия была у других.

Лень – страшная вещь, особенно если она групповая.

Не всякая жизнь кончается смертью; иногда она кончается свадьбой.

Ну до чего же хорошо!
И жизнь прожил, и жив ешо!
Б. У. КАШКИН

Пройдут годы… И я был прав: годы прошли!

Счастья нет. Секса нет. Рок-н-ролл умер. Дурь дорогая. Как жить?

Ничто в жизни так не воодушевляет, как то, что в тебя стреляли и промахнулись.

Если овощи – дары земли, а фрукты – дары садов, то почему за них нужно платить?

Наркоз был общий да хирург – местный!

Мне истина дороже не настолько!
МАЙЯ ЧЕТВЁРТОВА

Открыл счёт в нашем банке – получи бесплатно белые тапочки.

Там, где нас нет, хорошо именно потому, что нас там нет.

Если ты есть, значит, твоему отцу хоть раз в жизни было хорошо.

Только прилёг, а уже заколачивают!

За двумя зайцами погонишься – не вытащишь и рыбку из пруда!

Если вам хочется сделать глупость, поторопитесь, а то опередят!

Люди, берегите деньги! Их осталось мало.

Главное – не перейти улицу на тот свет.

Есть можно все грибы, но некоторые – только один раз.
Народная мудрость

Береги Enter смолоду.

Патронов, как и денег, много не бывает.

На американском форуме задаёшь вопрос, тебе дают ответ. На израильском форуме задаёшь вопрос, тебе задают встречный вопрос. На русском форуме задаёшь вопрос, а тебе долго рассказывают, какой ты мудак.

Кто к нам с чем и зачем, тот от того и того.

…А правило – оно бесповоротно,
Всем смертным надлежит его блюсти:
До тридцати – поэтом быть почётно
И срам кромешный – после тридцати.
АЛЕКСАНДР МЕЖИРОВ

Когда что-то прекращается, всегда кому-то надо, чтобы это продолжалось.

К концу недели желание работать уменьшается очень сильно. Хотя в начале недели оно напрочь отсутствует.

Хороший день Monday не назовут.

– Кому на Руси жить хорошо?
– Пока не знаем, но следствие ведётся.

Быть как стебель и быть как сталь

В жизни, где мы так мало можем…
– Шоколадом лечить печаль,
И смеяться в лицо прохожим!
МАРИНА ЦВЕТАЕВА

Чтобы оказаться в нужное время в нужном месте, главное – встретить правильных людей.

Не расстраивайтесь, что у вас нет денег. Ведь есть вещи, которые нельзя купить ни за какие деньги, вот, например – динозавра.

Иногда счастье сваливается так неожиданно, что не успеваешь отскочить в сторону.

Hикогда не говори «Никогда не говори никогда». Не говори. Hикогда.

Всё идет хорошо. Только мимо…

Большинство хочет жить как меньшинство.

Чтобы потратить деньги с умом, нужны всего лишь две вещи. Сами догадайтесь, какие.

Если лошадь говорит тебе, что ты сумасшедший, то так оно и есть.

Есть два вида людей: я и остальные.

Если орёл – я выиграл, если решка – ты проиграл!

Не вижу смысла выходить из дома. Мы всё равно каждый раз возвращаемся обратно.

Пока семь раз мерил, другие отрезали.

С каждым годом зубные пасты становятся всё лучше, а зубы всё хуже.

Труднее всего поджечь ад.

Жизнь – как туалетная бумага. Кажется, что длинная, а тратишь на всякое дерьмо.

Теперь о вечном. Вечно я без денег. ..

После нас хоть потом.

ЕВГЕНИЙ КАЩЕЕВ

Годы берут своё, а люди – своё.
ГЕННАДИЙ МАЛКИН

Корова даёт лишь молоко. Мясо у неё берут.

А вас, деньги, я попрошу остаться!

Покажите мне человека, у которого нет никаких проблем, и я найду у него шрам от черепно-мозговой травмы.

Мои доходы увеличиваются с каждым днём. А с каждым вечером – уменьшаются!

Лучше переспать, чем недоесть!

Дай бог всем иметь то, что имеют те, кто имеет нас.

Фортуна никогда не показывала ему спину. Напротив, она всегда поворачивалась к нему и наотмашь била его по морде неоструганной серой доской с вбитыми в неё ржавыми гвоздями.

Парадокс: нервные клетки не восстанавливаются, а жировые не разрушаются…

Один в поле не убежит.

Жизнь даётся один раз. И прожить её нужно так, чтобы наверху обалдели и сказали: НУ-КА ПОВТОРИ!

Хорошо там, где нас нет. Плохо, что нас нет там, где хорошо.

Провайдер не всегда прав, но он всегда провайдер.

Когда дубов зелёный лист
среди росы,
когда в ушах мы слышим свист
кривой косы,
когда земля трещит в длину
и пополам,
тогда мы смотрим на луну,
и страшно нам.
ДАНИИЛ ХАРМС

Оттоптали ноги,
чёрт возьми,
на лесной дороге
муравьи.
Оттоптали ноги.
Звон в ушах.
Больше из берлоги
ни на шаг.
ФЕЛИКС ЧЕЧИК

У дятла есть сосна,

У леса есть чащоба,
У холода есть ночь,
У ветра круговерть,
А у меня есть нож,
Уверенность и злоба –
Из-за моей спины
Выглядывает смерть.
ЕВГЕНИЙ МЯКИШЕВ

Москва слезам не верит… Только нал!

Лучше быть голодным, чем холодным.

Всё в жизни к лучшему, но худшим из способов.

Интересная штука – мысль. Думаешь одно, а думают другое.

Лучший выход – это вход.

Я думаю, с тоскою глядя вдаль:
За мною – радость, впереди – печаль.

Кроме чужих неприятностей в жизни есть и другие радости…

Надкусив яблоко, всегда приятнее увидеть в нём целого червяка, а не половину.

Даже если у тебя нет долларов, весной всё равно всё позеленеет.
Промо канала ТНТ

Я люблю тебя, жизнь. Ну, а ты меня снова и снова…

Направляй свои мысли куда следует, иначе они направят тебя, куда не надо.

Весь ужас в том, что нас сейчас поймут…

Жизнь даётся один раз. Ещё раз я бы не выдержал.

Российский народ уже 90 лет качает права. Скачать удалось пока процентов 10…

Если бы русские любили работать, они бы не назвали включатель выключателем.

Призывы жить без дураков многие считают геноцидом.

Не яйца красят человека, а человек красит яйца.

Пока толстый сохнет, худой сдохнет.

Цены – они как дети. Растут…

С кем поведёшься – так тебе и надо.

В номинации «самое доступное жильё в Москве» победил Казанский вокзал.

Большой путь прошли Соединённые Штаты Америки – от хижины дяди Тома до Барака Обамы.

Неправду говорят, что Россия уже не та, – Россия ещё та!

Сколько в этой жизни не сделано! Сколько ещё предстоит не сделать. ..

Я, блин, умру, но проживу жизнь до конца!

Лучше синица в руках, чем утка под кроватью.

В жизни всегда есть место пофигу!

Не всё возможное безболезненно.

Положительные эмоции – это эмоции, которые возникают, если на всё положить.

По настоящему свободным может быть только падение.

Заряженному танку в дуло не смотрят.

Кто к нам с мечом придёт, тот в орало и получит.

Не всё то золото, что плохо лежит.

Если уж плыть по течению жизни, то вольным стилем.

Уважайте старость, это ваше будущее.

«Это ничего, что я к вам спиной?» – спросила нас Фортуна…

Если тебе плохо, думай о хорошем. О себе.

Погода испортилась, потому что те, кто делают погоду – уехали, а те, кто остались – погоды не делают.

Два неразрешенных вопроса человечества: «Откуда берётся пыль?» и «Куда деваются деньги?»

В России две беды – дураки и дуры.

Семь постулатов о России:
Поэт в России больше, чем поэт.

Певец в России громче, чем оркестр.
Балет в России лучше, чем футбол.
Судья в России меньше, чем бандит.
Отстрел в России чаще, чем инфаркт.
Кагор в России реже, чем портвейн.
Портвейн в России хуже, чем коньяк.
«Закон подлости и другие законы»

У меня есть ключи от всех дверей Москвы, а чем, товарищи, похвастаете вы?
DSH! DSH!

Любишь возить саночки, люби и кататься.

Жизнь человека исчисляется мгновениями, которые ему хочется остановить.

Мир жесток, а я ещё хуже.

Жизнь не вечна. Пройдите.

В дерьме брода нет.

В Библии сказано, что мы должны прощать своих врагов. О друзьях там ничего не говорится…

Человеческие отношения подчас настолько сложны, что мы заменяем их другими, более простыми.

Никогда не говори нет. Нет не говори никогда.

Иисус изменил твою жизнь. Сохранить? Да/Нет?

Был мудрым друг не по годам, а я не по стране беспечен…

Больше всего усложняют жизнь простейшие.

После поворота событий от плохого к худшему цикл повторяется.

Будешь много жить – скоро состаришься.

Сколько волка ни корми, он ещё хочет.

Поддайся соблазну. А то он может не повториться.

Кто поспел – того и съели.

В хорошем настроении я вышел из окна.

Вернуться я не смог, ведь жизнь всего одна.
ТАТЬЯНА НЕШУМОВА

Women give and forgive. Men get and forget. It’s our life…
Женщины дают и прощают. Мужчины берут и забывают. Такова жизнь…

Лучше стрела в руке, чем топор в спине.

Мы бы не знали, что такое хорошо, если бы нам не было так плохо.

Основные проблемы с характером у некоторых людей обусловлены тем, что тpансцендентальная поликонденсация неpоноспоpы в пеpплексном хаосе может инбабулиpовать комплексный моpфоз только тогда, когда конституент доминанты квазитенденциально унивеpсален, и возникает довольно внезапно.

Это всё правильно, но не верно!

Вот и старость… А где же мудрость?

Народ! Кузькина мать зовёт!

Мир делится на трудящихся и крутящихся.

Жить – тяжело. А тяжело жить ещё хуже!

Съешьте с утра живую жабу, и ничего худшего в этот день с вами уже не случится.

Работа облагораживает человека, а безделье делает его счастливым.

Чтобы жить умеючи, нужно жить играючи.

Если тебе суждено погибнуть в авиакатастрофе, то на твой поезд упадёт самолёт.

Река течет по двум причинам:
Одна – благодаря мужчинам,
Другая – им же вопреки.
И в этом таинство реки.

Веpтолёты – это души погибших танков.

Не всё то лучшее, что враг хорошего.

Жизнь невозможно повернуть назад, да и зачем она там?

Если бы всегда всё было хорошо, то не было бы ничего хорошего.

Красота спасёт мир от засилья интеллекта.

Соль жизни в том, что она не сахар.

Будешь тише — дольше будешь!

Жизнь такова, какова и больше никакова. Каково?

Все мы ошибаемся. Одни больше, другие всегда.

Добро всегда побеждает зло. Значит, кто победил, тот и добрый!

Воздерживайтесь от вина, женщин и песен. Преимущественно от песен.

Хочешь не хочешь, а хотеть надо.

Жизнь – это потеря не только времени, но и денег.
Из сериала «Озабоченные» на MTV

Если посмотреть на мир через призму парадоксальных явлений, то, с точки зрения банальной эрудиции, каждый здравомыслящий индивидуум не должен игнорировать те социальные критерии, на которых зиждется весь респектабельный мир.

Человек рождается, мокрым, голым и голодным. И это только начало…

Я за тех, кто против.
Я против тех, кто за.
РОМАН С.

Всегда с нами те, кому это выгодно.
ВЛ. КУЗЕМКО

Жизнь вильнёт бёдрами.
АЛЕКСЕЙ ВЕРНИЦКИЙ

Редко мы речисты.
Чаще мы мычащи.
ГЕОРГИЙ ЖЕРДЯЕВ

Мир театр.
Смерть антракт.
АЛЕКСЕЙ ВЕРНИЦКИЙ

Без паблисити нет просперити.

Крутись не крутись, а в картонку сядешь!

Вы чтo думали, в сказку пoпали? Нее.. вы в жизнь вляпались!

У всех у нас чего-то не хватает.

При работе со зверьми
Будь всегда напорист.
Сколько wolf’а ни корми,
Он всё смотрит в forest.

Лучше иметь синий диплом и красную морду, чем красный диплом и синюю морду.

Ведь кроме того, что мы знаем, мы не знаем ровно ничего.
ВЕНЕДИКТ ЕРОФЕЕВ

Жить надо так, чтобы хотелось ещё.

Жизнь удалась, если коньяк, который мы пьём, старше женщин, с которыми мы спим.

Научись скорбеть, а блаженствовать — это и дурак умеет.
ВЕНЕДИКТ ЕРОФЕЕВ

Чтобы забить мяч, надо научиться думать как мяч.
Из «Танцев без правил» на ТНТ

Заботься о теле! Душа всё равно бессмертна.

Всё, что ни делается, всё к чёрту.

Каждому человеку кажется, что он не каждый.

Не бери от жизни всё. Будь разборчив.

Не плачь потому, что это закончилось. Улыбнись, потому что это было.

Готовь сани летом, а катафалк смолоду.

Добро всегда победит зло. Поставит на колени и зверски убьёт!

Живу хорошо, но завидовать нечему.

Если человек хочет жить, медицина бессильна.

Любишь кататься, люби и катайся.

Тише едешь — меньше русский.

Много вредного — сладко.

Лучше журавль в небе, чем утка под кроватью.

Если ты моя фантазия, почему я тебя боюсь?
ЛИНОР ГОРАЛИК

В гостях хорошо, а дома плохо.

«А не пойти ли мне на работу?» — подумал я и не пошёл.

Hет повести печальнее на свете, чем повесть о заклинившем Reset’е.

Пенти — ум, а Интеp — нет.

Истинную цену человеческого общения понимаешь, глядя на счета от пpовайдеpа.

Интеpнетчики озадачены: есть ли жизнь в офф-лайне?

И волки сыты, и овцы целы, и пастуху вечная память.

Дыши, а то и этого лишат.
ВЛАДИМИР ВИШНЕВСКИЙ

Масштаб личности человека определяется масштабом проблем, которые ему пофигу.

Куpить вpедно, пить пpотивно, умиpать здоpовым жалко.

Зеpкало — сpедство коммуникации с умным человеком.

Hе всякая цель, котоpую пpеследуют, пpеступна.

Танки грязи не боятся. Но не пачкаются.

Hелегко обpести дpуга. Еще тpуднее потеpять вpага.

Hаpод безмолвствует всё гpомче.

Как сделать человеку хоpошо? Сделать плохо, а потом так же, как было.

Hаш вклад в общий котёл смогут оценить только чеpти в аду.

Hе бойтесь, конец света — не сегодня. В Австpалии уже наступило завтpа!

Я тоже человек! И тоже хочу звучать гоpдо!

Старайся умереть как можно более молодым как можно позже!

Не плыви по течению. Не плыви против течения. Плыви туда, куда тебе надо!

Работа не волк, а большая свинья.

Кто готов разбудить спящего — тот способен на любую подлость.

Если у тебя нет личного щофёра с машиной — у тебя есть общественный с автобусом.

Нельзя иметь всё сразу: и море, и по колено.

Долг платежом страшен.

Лучше гипс и кроватка, чем гранит и оградка.

Во имя Отца, Сына и Святого духа. ENTER.

Скромность красит человека. В серенький цвет.

Трудно смотреть правде в глаза, если она голая.

Не так страшен ад, как путь к нему.

Ангелы — это люди вчера, а люди — это черти сегодня.

Жизнь как телеграмма. Короткая и с ошибками.

Эй, маэстро, послушай, меняю судьбу — я решил!

Жить этим нельзя, но и прожить без этого невозможно.
ЮРИЙ БУЙДА

Если человека нельзя купить, его можно продать.

Хотя б на год, на день, на час, на миг – был всё же крик.
ЮЛИЙ КИМ

Совесть — это хорошая штука. Когда она есть у других.

Гроб всегда падает покойником вниз.

«Я» — последняя по счёту, но первая по значению. Это же азбука!

Если ты умнее всех, кто это поймёт?

Я пройду на балкон и оттуда
Огляжу всё, что видно окрест.
Я ни есть, ни работать не буду.
Кто работает, тот пусть и ест.
МИХАИЛ ПАВЛОВ, «Крокодил», 2008, № 4, стр. 6

Когда уходить с корабля крысе, если она капитан?

Мелочь, а приятно. А если приятно, то это уже не мелочь.

Хорошо, когда нет ничего плохого, и плохо, когда нет ничего хорошего.

Назад, в будущее, или Вперёд, в прошлое!

Дьявол продал душу Роману Абрамовичу.

Чем лучше я узнаю людей, тем круче играю за орков!

Противна молодость. Противна!
Признаем это объективно.
Она собой упоена,
Хотя не может ни хрена,
Она навязчива, болтлива,
Глупа, потлива, похотлива,
Смешна гарольдовым плащом
И вулканическим прыщом.
Её настырное соседство
(В отличье, может быть, от детства)
Внушает мысли о конце,
И мы меняемся в лице.
КТО-ТО

Я был рождён бродягой и певцом,
И воля мне милей всего на свете.
И лишь один мне промысел знаком:
Я на дорогах собираю ветер.
КТО-ТО

Мы рождены, чтоб сделать былью сказку
про упыря и девку-семиглазку.
Л. ТУЧИНСКИЙ

Если такую красоту не разделить с кем-то ещё, сердце растянется до 52-го размера и придётся его выбросить или того хуже — отдать в секондхенд.

Давным-давно придуманы границы,
мне не понять – зачем и для чего;
и почему нельзя объединиться
вокруг большого сердца моего?..
ЕЛЕНА КАЗАНЦЕВА

Много будешь знать – скоро состаришься. Стало быть, мало будешь знать – нескоро состаришься.
НИКИТА БОГОСЛОВСКИЙ

— Ещё Христос гнал торгующих из храма.
— Видали хама?
КТО-ТО

Чтобы слова не расходились с делом, нужно молчать и ничего не делать.

Я б изменил менталитет, но сука совесть: «Нет и нет!»
Л. ТУЧИНСКИЙ

Не плюй в колодец; вылетит — не поймаешь.

Что была бы наша жизнь без философских вопросов?

Мечи дамокловы нависли.
Грядёт с косой Ядрёна Мать.
И даже весело при мысли,
Что здесь я выбрал умирать.
ВЛАДИМИР ВИШНЕВСКИЙ

Этот мир так хорош за секунду до взрыва…

Древняя китайская мудрость: если тебе нечего сказать, скажи древнюю китайскую мудрость.

Мне скушно, бес…
АЛЕКСАНДР ПУШКИН

Иногда только промахнувшись, понимаешь, как ты попал.

Иногда единственное, что ты можешь сделать — это ошибка.

Вороне где-то Бог послал кусочек сыру…
Но Бога нет! – Не будь придира: ведь нет и сыру.
НИКОЛАЙ ЭРДМАН

Не бывает напрасным прекрасное.

Пейте томатный сок! Томатный сок — это здоровье. Здоровье — это спорт. Спорт — это деньги. Деньги — это женщины. Женщины — это СПИД. СПИД — это смерть. Нет, не пейте томатный сок!

Чтобы шевелить мозгами, нужно иметь в голове немного пустоты.

Мы причиняем друг другу Радость.

Нас невозможно сбить с пути.
Нам пофигу, куда идти.

Завтра будет завтра, а сегодня мы ещё здесь.

Здесь и небо всех чистее,
Здесь и солнце всех ярчее,
Даже грязь тут всех грязнее –
На милой родине моей!
НАТАША ДЕНИСЛАМОВА, 11 лет

Заржал мой Пегас.
Я сражён этим ржанием:
Над формой он ржёт
Или над содержанием?
ВИТАЛИЙ ТАТАРИНОВ

А удовольствия должны быть дорогими.
ВЛАДИМИР ВИШНЕВСКИЙ

Кушай с голоду, лечись с молоду.
САША СОКОЛОВ

Река была прозрачна у истока.
Напоминать об этом ей – жестоко.
БОРИС ЗАХОДЕР

Я не участвую в войне,
Она участвует во мне.
КТО-ТО

Улыбнись, и всё получится!

Мы все довольны своими умственными способностями и никто – своим материальным положением.

Осязая плод,
Никогда не устаю грустить,
Что утрачен цветок.
Японское

Наши крысы никогда не уйдут с нашего корабля.

Должен ли кусок масла считаться нахлебником?
АНДРЕЙ КНЫШЕВ

Быль о правах.
АЛЕКСАНДР АХМЕТЗЯНОВ

Кто хочет
Честно рисовать –
Тот должен
Чем-то рисковать!
БОРИС ЗАХОДЕР

Я никогда не ездил на слоне,
Имел в любви большие неудачи –
Страна не пожалеет обо мне,
Но обо мне товарищи заплачут…
КТО-ТО

Дух мой растревожить невозможно
денежным смутительным угаром.
Я интеллигентен безнадёжно
и употребляюсь даром.
КТО-ТО

Интернет – единственное, что связывает нас с реальностью.

У нас, в Расеи, ващще всё на еборот!

Курс прежний, ход задний!

Тонет муха в сладости
В банке на окне –
И нету в этом радости
Ни мухе и ни мне.

Где люди – там скандал.

Все мы и всё вокруг нас – ужасно!

Разве можно забыть и отринуть страну,
Где сам растаможил хотя бы одну?!
КТО-ТО

Нецелесообразна хористка без оргазма,
Но целесообразна харизма без маразма.
ВАЛЕРИЙ КРАСКО

Одна минутная слабость всегда состоит из шестидесяти секундных.

Это возвышает меня, но не стимулирует.
ВЕНЕДИКТ ЕРОФЕЕВ

Единственный выход из безвыходного положения – обратно через вход.
О. ДОНСКОЙ

Ослик был сегодня зол,
Он узнал, что он осёл.
КТО-ТО

Всю жизнь я испытывал попеременно
То чувство локтя, то чувство колена.
КТО-ТО

Так плохо, что уже хорошо.

Мой комплекс неполноценности хуже, чем ваш!

Ты будешь гореть, я буду гореть,
А он будет руки греть…
Ты не будешь гореть, я не буду гореть, —
И он не будет руки греть…
ВСЕВОЛОД НЕКРАСОВ

Лучше нету Того света.

Бог плюнул нам в лицо.

В какой-то момент на Земле людей стало больше, чем обезьян.

Попробуй усни, если в тебе спит гений!

Я ценю сильный характер, даже если он скверный.
ВЕНЕДИКТ ЕРОФЕЕВ

Мы не одиноки во вселенной: во вселенной полным полно одиноких.

Будь как все и к тебе потянутся такие же люди.

Хотелось бы верить, что будет хотеться дальше.

Не создавайте себе чужих проблем.

Мы медленно запрягаем, быстро ездим и сильно тормозим.

Меня, прежде чем посадить, надо выкопать.
ВЕНЕДИКТ ЕРОФЕЕВ

Рыба ищет, где глубже, а там уже полно народу.
СЕМЁН АЛЬТОВ

Хочу жить вечно. Пока получается.

Превратим всё во всё остальное, и всё остальное в ничто!

Hельзя дать всем всё, ибо всех много, а всего мало.

Чем меньше работаешь, тем меньше хочется.

Притворяйся вежливым — и привыкнешь.

Да здравствует всё то, благодаря чему мы не смотря ни на что!

Чем больше вас меньше, тем больше нам лучше.

Вечно молодой, вечно пьяный… И почему мне досталось второе?

Самый подходящий момент наступает в самое неподходящее время.

Мир катится к лучшему.

Прошу вернуть мне деньги за непрожитую жизнь.

Ну почему у греха такой божественный вкус?!

Кто не хочет, когда может — уже не сможет, когда захочет!

А жизнь нам дорога как память…

Будем как солнце!
КОНСТАНТИН БАЛЬМОНТ

Прошло то время, когда было время.

Рано или поздно будет поздно!

В борьбе со здравым смыслом победа будет за нами!

Такова жизнь: либо се ля вы, либо се ля вас.

Улыбайтесь — завтpа бyдет хyже.

Я повторяю свой вопрос: «Ура?..»
ВЛАДИМИР ВИШНЕВСКИЙ

Грех впадать в уныние, когда есть другие грехи.
ГЕННАДИЙ МАЛКИН

Всему скажи «да»!

Жизнь – болезнь неизлечимая, но и она со временем проходит.

Мы вместе. Но в каком?

Ты должен делать жизнь приключением, иначе – будешь кормом для этой жизни.
СЕРГЕЙ ЧЕТВЕРУХИН, «Улёт, или Open Air. Сезон 2»

Знания – силос.

Идти в ногу со временем легче всего строем.

Благодаря книгам я узнал то, чего мог бы достичь, если бы их не читал.

No sex. No war. No me.
ДЭН КОЛЕН, американский художник

Из двух зол я выбираю то, которое раньше не пробовал.

Сомневайся во всём… Уж в этом не сомневайся!

Счастье – это когда тебя не понимают всякие козлы.
О. КРУГЛОВ

В России две проблемы: я и дороги.

Если бы и в жизни перед каждым матом был шах!

И скучно, и грустно, и некого на фиг послать.

Под лежачий камень мы всегда успеем.

А то, что я принимал за путеводные звёзды, оказалось — потешные огни.
ВЕНЕДИКТ ЕРОФЕЕВ

Вот парадокс: один килограмм варенья плюс один килограмм дерьма – это два килограмма дерьма.

Для нас нет непреодолимых трудностей, есть только трудности, которые нам лень преодолевать.

Бросая окурок мимо урны, ты помогаешь формировать свой культурный слой.

Брюки важнее жены, потому что существует немало мест, куда можно пойти без жены.

Всё естественное, как правило, запрещено.

Всё может быть… И всё быть может… Но только никогда не может быть того, чего и быть не может.

Бедные фантазируют богаче.

Четыре этапа человеческой жизни: 1) ещё нет; 2) уже да; 3) ещё да; 4) уже нет.

Люди всё-таки умеют летать, просто не умеют приземляться.

Где начало того конца, которым оканчивается начало?

Hе мешайте человеку! Он совершает большую… ошибку.

Кто не успел — тот провожающий.

Как пасть вампира – картина мира.
МИХАИЛ ЩЕРБАКОВ

Если сложить тёмное прошлое со светлым будущим, получится серое настоящее.

Какой же русский не любит быстрой езды — бессмысленной и беспощадной!

Жизнь уходит так быстро, как будто ей с нами неинтересно…

Человек гораздо умнее, чем ему это надо для счастья.

Жизнь, конечно, не удалась, а в остальном все нормально.

Рыбка бьётся об асфальт – ничего себе гештальт.
АРКАДИЙ ШТЫПЕЛЬ (Гештальт — единство элементов, нечто целое, отличное своими качествами от простой суммы частей.)

Дамы и господа! За этими стенами вас никогда не коснется когнитивный диссонанс! Поэтому вам совершенно незачем знать, что это такое.
ВИКТОР ПЕЛЕВИН, «Generation «П»

Защити меня от того, что я хочу.

Встречают по одёжке, провожают навсегда.

Если вы движетесь быстро – время замедляется.
От АЛЬБЕРТА ЭЙНШТЕЙНА

Жизнь даётся один раз, а удаётся еще реже.

Cкажи мне, кто твой друг, и я скажу ему, кто ты.

Бросай курить, вставай на лыжи, – и вместо рака будет грыжа!

Хорошо, что мы не думаем, а то бы многое поняли…

Всякий народ имеет то правительство, которое его имеет.
АНДРЕЙ КНЫШЕВ

Иногда поверь хиппи.

Можно ли верить человеку, если он обещал вас обмануть, но своё слово не сдержал?
«Литературная газета», 1978

Слишком много Рональда МакДональда, слишком мало далай-ламы.
Надпись на заборе. Esquire, 2007, февраль, стр. 126

Об этом плохо говорить не хочется, просто молча плохо подумаем.

Два колеса – хорошо, четыре колеса – плохо.
Надпись на заборе. Esquire, 2007, февраль, стр. 126

Порой в сомненьи чешется висок:
Не из меня ли сыплется песок?
ВЛАДИМИР ВИШНЕВСКИЙ

Ах родная русская земля, я скажу тебе русское бля.

Веселись, юноша, пока ты весел.

Не летай высоко – не заметят.

Скорей бы старость, да в детство впасть.

Помолчим об этом.

Если зимой выйти на улицу, поднять голову и открыть рот, то снег будет попадать туда и таять. Летом этого явления добиться трудно.

Жизнь трудна, но, к счастью, коротка.

Жажда должна быть доведена до совершенства.
От НИЦШЕ

Сегодня пятница, 13-е, полнолуние, и вы с нами на волне 666.13 fm «Плохого радио»…
Команда КВН – сборная Санкт-Петербурга

Артём Безродный! Алексей Смертин! Александр Могильный! Есть ли будущее у российского футбола?
Команда КВН МАМИ, Москва

Вчера на концерте «Кривого зеркала» в сцену ударила молния. Ребята, вас уже Господь предупреждает!
Команда КВН «МаксимуМ», Томск

(Входя в вагон):
Люди добрые!
Люди страстные!
Люди жгучие
И прекрасные!
РОМА ВОРОНЕЖСКИЙ

Мы спорили о смысле красоты,
И он сказал с наивностью младенца:
— Я за искусство левое. А ты?
— За левое… Но не левее сердца.
ВАСИЛИЙ ФЁДОРОВ

Смерть прекрасна и так же легка,
Как вылет из куколки мотылька.
ОЛЕГ ГРИГОРЬЕВ

Ступай себе, мгновенье, ты бесплодно.
Д. КОНДРАШОВ

Я хочу одного: другого.
РОМА ВОРОНЕЖСКИЙ

Афоризмы и Цитаты о Жизни
Игры и Конкурсы для дискотек и вечеринок

Смешные фразы, прикольные фразы, фразы со смыслом, короткие фразы, говорящие фразы

ЛУЧШИЕ СМЕШНЫЕ ШУТКИ

топ недели Добро пожаловать в мастерскую по ремонту айфонов «Яблочный спас»!
Koмпьютeрщик — этo eдинcтвeнный чeлoвeк, кoтoрый мoжeт пoпрocить у нaчaльникa двecти бaкcoв нa пaмять и иx пoлучить.
Купил самоклеящиеся обои. Сижу. Жду.
Когда захлопнулась ловушка
Я стал метаться и кричать
Но в паспорте уже стояла
Печать
Если вы хотите отдохнуть в красивом старом европейском городе, где очень мало русских, то рекомендую вам Москву.
При выборе пляжной одежды самое главное — убедиться, что ее хозяин отплыл достаточно далеко.
Маньяк-филолог убивает только людей в польтах.
Наловил Иван Царевич лягушек, и давай на них жениться!
Любая школа автоматически получает статус гимназии, если трудовик и физрук закодируются.
B Рoccии мнoгo пьют, пoтoму чтo здecь oчeнь cурoвый климaт. Boт и ceгoдня — пoгoдa прeкрacнaя, нo климaт, cцукo, cурoвый…
Ненавижу перепады настроения, это просто потрясающе!

Tруд cдeлaл из oбeзьяны чeлoвeкa.
Oтпуcк вeрнул вce нa cвoи мecтa.
Пробка — это две русские беды в одном месте.
Heт, чтo зa люди, a? Зaшлa в гocти чaю пoпить — нa трeтий дeнь чувcтвую: кaк-тo нe oчeнь мнe тут и рaды…
На Василия, который двадцать лет живет в однокомнатной квартире с женой и тещей, комары уже не садятся.
Из школьного сочинения: «Раскольников убил старуху-процентщицу за то, что она не давала кэшбэк».
Дипломатам из Литвы и Латвии дали на сборы по 48 часов. Дипломату из Эстонии — 480.
Продавщица в хлебном отделе в моменты одиночества от нечего делать шевелит булками.

Может встретимся, посмотрим в телефоны, что скажешь?
Никому не позволяй испортить твой день. Это твой день — испорти его сам!
«Фу, надушился!» — поморщился Отелло, выходя из спальни Дездемоны.
Дни рoждeния пoлeзны для здoрoвья. Учeныe дoкaзaли, чтo тe, у кoгo былo бoльшe днeй рoждeния, жили, кaк прaвилo, дoльшe.
Для нейтрализации Петрова и Боширова, в Европе намерены спилить все шпили.
Россия настолько открытая страна, что наши тайные агенты — мировые знаменитости.
В рамках программы борьбы с бедностью населения, депутаты анонсировали закон, запрещающий гражданам свистеть в жилых помещениях.
Я понял, почему многие покупатели в магазинах носят гигиенические маски на подбородке – это чтобы челюсть при виде ценников не отвисала!
Удивительно, как еще никто не додумался до технологии трансляции рекламы в наши сны.
Продам пульт управления громкостью жены.
Правда он умеет только громче делать.
Конечно, это неправильно, что у других людей есть мнения.

ДАЛЬШЕ
ПРИКОЛЬНЫЕ КАРТИНКИ

> ЕЩЁ КАРТИНКИ

Если понравился сайт, поделись с друзьями;)

Смешные выражения

Не стоит жаловаться. Никогда и никому. Особенно близким. И вообще, лучше говорите,что у вас всё хорошо. А то, не дай Бог, они возьмутся ваши проблемы решать!

Если вы взглянули в зеркало и там никого не обнаружили — вы неотразимы. 12

«Чайные листья собраны в Индии, Цейлоне, Китае. Упаковано в Украине. Наслаждайтесь вкусом настоящего английского чая!» 13

Никогда не бойся делать то, что ты не умеешь. Ковчег был сооружен любителем. Профессионалы построили «Титаник». 17

Депрессия — это гнев без энтузиазма. 14

Никогда не делайте ничего правильно с первого раза, иначе никто потом не оценит, как это было сложно. 11

Противозачаточная внешность. 20 — смешные выражения

Стал вегетарианцем — перешел на травку… 13

… Что бы мы без Вас только не делали… 12

Ничто так не укрепляет веру в человека, как ПРЕДОПЛАТА 14

Женщины — такие трогательные существа, так бы трогал и трогал! 14

«Запорожец» — самое лучшее в мире привидение с моторчиком! 11

Будь проще — и люди на тебе оттянутся. 11

Судя по аптечке, у нас 2 цели в жизни — успокоиться и не обделаться! 12

Любовь — это торжество воображения над интеллектом. 13

Ударим крепким сном по мукам совести! 18

Когда в детстве придумываешь шалости, думая головой, получаешь по заднице. С возрастом все меняется: когда думаешь задницей, дают по голове.. 14

Грех предаваться унынию, когда есть другие грехи! 17

Поскольку у нас в стране уровень жизни постоянно повышается, то все меньше людей до него дотягивается. 11

Чтобы девушка не говорила про свободные отношения, она имеет ввиду любовь и брак. 11

мужчина, предлагающий вам неповторимый секс — не фантазер, не бабник. Он реалист и знает, что второй раз он не сможет, или ему не дадут. 14

Каждый человек по-своему прав. А по-моему нет. 13

Жизнь — это венерическая болезнь: передается половым путем и заканчивается летальным исходом. 13

Незнание закона не избавляет от ответственности. Зато знание — запросто. 14

Странно, вкус у водки один, а приключения после нее всегда разные. 18

Положительные эмоции — это эмоции, которые возникают, если на все положить. 14

Смешные выражения, мудрые мысли, известные афоризмы (перлы мысли



На главную



Кото — Арт



Кото — Модель



Кото — Анекдот



Кото — Обои



Обои — Фэнтези — Девушки



Кото — Книги

Avaritia copia non minuitur.    Богатство не уменьшает жадности. Саллюстий.

Смешные выражения, прикольные афоризмы, мудрые мысли, пошлые остроты, подслушанные и записанные кошкой Масяней

Смешные выражения — мудрые афоризмы — смешные афоризмы — популярные афоризмы — философские афоризмы — детские афоризмы — нецензурные афоризмы — известные афоризмы — народные афоризмы — меткие афоризмы — крылатые афоризмы — пошлые афоризмы — жизненные афоризмы — популярные афоризмы — новые афоризмы — прикольные афоризмы — прикольные высказывания — мудрые мысли — пошлые остроты — нецензурные выражения — смешные мысли — точные высказывания — античные афоризмы — афоризмы известных людей — народный юмор — умные выражения — мудрые мысли — неоднозначные высказывания — умные выражения — смешные мысли — философские слова — крылатые выражения — неоднозначные остроты — пошлые мысли — прикольные высказывания.

  • Опыт — это замечательная штука, которая позволяет нам узнавать ошибку, когда мы опять совершили ее.
  • Жизнь — игра. Задумана хреново, но графика обалденная.
  • Как сделать человеку хорошо? Сделать плохо, а потом так же, как было.
  • Чем больше у человека знаний, тем полезней он даёт советы, а чем меньше — тем чаще.
  • Проще заработать хорошую репутацию, чем потерять плохую.
  • Будь добрее и люди к тебе потянутся своими грязными и липкими руками.
  • Скунсу не надо быть красивым, его и так все уважают.
  • Красота спасёт мир, а пофигизм — нервы!
  • Любовь — слепа, но брак — прекрасный окулист.
  • С умным человеком приятно поговорить, но трудно работать.
  • Ученье — свет, а не ученье — приятный полумрак.
  • Парень «хоть куда» — это разве нормально?!
  • Издеваться над человеком, от которого ушла жена, можно только из зависти…
  • Если приятно посмотреть и есть за что, то почему бы и не пощупать.
  • Хорошее отношение к покупателю заканчивается вместе с его деньгами.
  • Студент, не выбрасывай мусор в окно: его потом находят дети и надувают.
  • Идеальная лень – это когда лень написать заявление на отпуск…
  • Считать деньги в чужом кармане нехорошо, но интересно.
  • Поймав себя на мысли, становится неудобно и за себя, и за нее.
  • Что бы петь караоке, слух не нужен. Нужны — хорошее зрение, отсутствие совести и розетка.
  • У страха глаза велики, и слабый мочевой пузырь.
  • Не говорите, что мне нужно делать, и я не буду говорить, куда вам нужно идти.
  • Хирурги считают, что внутренний мир человека лучше всего раскрывается на операционном столе.
  • Чем состоятельнее твои друзья, тем дороже дороже они тебе обходятся.
  • Если вообще не двигаться, то оковы почти неощутимы!
  • В этой жизни так много интересного и так мало интересующихся.
  • Если вы проснулись утром и вам не надо вставать, значит вы спали стоя.
  • Хотела Вас послать, но вижу, Вы оттуда.
  • Три главные причины быть учителем: июнь, июль и август.
  • В случае опасности улитка прячется в раковину. Там у нее есть бутылка водки и пистолет.
  • Не по Хуану сомбреро.
  • Единственный врач, который никогда не нарушает правило «Не навреди!» — это паталогоанатом.
  • Власть чаще переходит из рук в руки, чем от головы к голове.
  • Как и у балалайки, в душе простого русского мужика натянуты только три струны: патриотизм, алкоголизм и пофигизм.
  • Я готов делать ошибки, если кто-нибудь готов на них учиться.
  • Он выпил и рассудил трезво.
  • Все имеют право на тупость. Просто некоторые очень злоупотребляют.
  • Хорошо быть линкором. Башню снесло — четыре осталось.
  • Столько дел, что и работой занятся некогда…
  • Бог дал нам родственников. Слава Богу, друзей мы выбираем сами.
  • Некоторые приносят радость куда бы они ни пришли, некоторые — откуда бы они ни ушли.
  • Человек все может. Вот это меня и настораживает.
  • Не знаешь сигналов регулировщика — постарайся его хотя бы не переехать.
  • Сессия — это девушка, которая приходит два раза в год и имеет вас как и куда хочет, независимо от вашего желания…
  • Настоящий секс — это такой секс, после которого даже соседи выходят покурить.
  • У меня такое неприятное чувство, что вы правы.
  • Если ваша девушка во время секса с вами издает странные звуки — прислушайтесь! Может она храпит?
  • Что бы мы без вас только не делали.
  • Человек рожден для счастья, даже если зачат по глупости.
  • Новый год — наступил! Беззаботные лица прохожих лежат то там, то тут….
  • Грустно быть козлом отпущения среди ослов.
  • Разница между большим городом и маленьким в том, что в большом можно больше увидеть, а в маленьком — больше услышать.
  • Если ты умнее всех, кто это поймет?
  • Что у трезвого на уме — то пьяный уже сделал.
  • Чем больше ошибка, тем с большим рвением ее отстаивают.
  • Если лошадь говорит вам, что вы сошли с ума, значит так оно и есть.
  • В каждой женщине должна быть своя безуминка.
  • Если лечиться по справочнику, то рискуешь умереть от опечатки.
  • Мадам, у вас такие духи… Они для атаки или для самозащиты?
  • Я живу напротив кладбища. Будешь выпендриваться — будешь жить напротив меня!
  • Чем лучше видна грудь — тем хуже запоминается лицо.
  • Довести до греха не обещаю, но… провожу…
  • Никогда не преувеличивайте глупость врагов и верность друзей.
  • При прочих равных молодость предпочтительнее.
  • Энергия лени самая неисчерпаемая.
  • Эротика — это искусство, порнография — это жизнь.
  • Обладание чувством юмора позволяет легче пережить отсутствие всего остального.
  • Стабильность – это признак отсутствие идей…
  • Любовная игра, в отличие от всех других игр, никогда не отменяется из-за темноты.
  • Чтобы похудеть решила не есть хлеб, майонез, картошку и дельфинов. Пока безболезненно получилось исключить из рациона только дельфинов.
  • Основное правило техники безопасности: «Не работай — не пострадаешь».
  • В глазах — обида, в руках – утюг.
  • Перхоть — это пепел кипящего разума.

Афоризмы     1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42

   Вы знаете, милочка, что такое говно? Так оно по сравнению с моей жизнью — повидло.

Фаина Раневская

Смешные цитаты — Цитаты, афоризмы, высказывания, фразы, статусы в контакте

— Любимая, да я ради тебя что угодно: сквозь бурю и ураган! Горы сверну! В общем, жди — приеду завтра. Если дождя не будет.

Поделитесь с друзьями:

Почему я нравлюсь парням младше себя? Потому что я добрая, а дети это чувствуют.

Поделитесь с друзьями:

Факт о человеческой лени №212682340236: Вы слишком ленивы, чтобы прочитать это число.

Поделитесь с друзьями:

Семейное положение: нет даже кота.

Поделитесь с друзьями:

Главное, быть счастливым, и не важно, какое заключение напишет психиатр.

Поделитесь с друзьями:

Если женщина идет с опущенной головой — у неё есть любовник. Если женщина идет с гордо поднятой головой — у неё есть любовник. Если женщина держит голову прямо — у неё есть любовник. И вообще, если у женщины есть голова, то у неё есть любовник!
Фаина Раневская

Поделитесь с друзьями:

Если посмотреть мультфильм «Золушка» задом наперед, то этот мультфильм о том как женщина познает свое место в жизни.

Поделитесь с друзьями:

Не успел найти себе место под солнцем — глядишь, уже вечер…

Поделитесь с друзьями:

Когда у тебя есть старший брат, это ужасно, потому что ты всегда знаешь, как ты будешь одет через полгода.

Дмитрий Романов

Поделитесь с друзьями:

Эй, гражданина! Ты туда не ходи, ты сюда ходи. А то снег в башка попадёт. Совсем мёртвый будешь!

Джентльмены удачи

Поделитесь с друзьями:

О, как морозно в январе, Когда удобства во дворе!…

Владимир Вишневский

Поделитесь с друзьями:

— Наши дети будут умными и красивыми!
— А главное — вымышленными!

Теория большого взрыва

Поделитесь с друзьями:

Общительная, симпатичная девушка без комплексов продаст вагон цемента.

Поделитесь с друзьями:

Терпение – великая сила. Когда лопнет…

Мамчич

Поделитесь с друзьями:

Кто рано встает, тому можно еще поспать. Рано же встал.

Поделитесь с друзьями:

Английский — простой, но очень трудный язык. Он состоит из одних иностранных слов, которые к тому же неправильно произносятся.

Поделитесь с друзьями:

— Я разместила фото, где я немного помоложе…
— Наскальный рисунок?

Красотки в Кливленде

Поделитесь с друзьями:

— Опасно? Перестань, мы же мужчины, а знаешь, что мужчины кричат в лицо опасности?
— Что?
— Мамочка!

Доктор Кто

Поделитесь с друзьями:

— Много ли нужно человеку для полного счастья? — Мало!? Но только, чтобы у других было еще меньше.

Михаил Жванецкий

Поделитесь с друзьями:

Трудно понять китайцев и женщин.

Аркадий Аверченко

Поделитесь с друзьями:

Самые горячие женщины водятся в саунах.

Поделитесь с друзьями:

Судя по содержимому моего холодильника в квартире живет только кошка… и еще алкаш какой-то

Поделитесь с друзьями:

— Примечание автора: это вымышленная история. Любое сходство с реальными лицами, ныне здравствующими или покойными, является случайным… Особенно с тобой, Джени Бэкмен… Сука.

500 дней лета

Поделитесь с друзьями:

Стало модным приписывать себе психиатрические заболевания. Депрессия, шизофрения, паранойя — этого всего у вас нет, вы просто деб…лы.

«Лицо со шрамом»

Поделитесь с друзьями:

Умные люди тоже наступают на грабли, но только для того, чтобы поднять их с земли не нагибаясь.

Поделитесь с друзьями:

— Такова жизнь. Те, кого мы любим, покидают нас… если не привязать их к батарее, но это почему-то запрещено.

Касл

Поделитесь с друзьями:

Жена — это та, единственная и неповторимая вредная привычка, которая может бросить тебя сама!

Поделитесь с друзьями:

— Все я больше не могу идти! Идите дальше сами… а меня несите!

Симпсоны

Поделитесь с друзьями:

— Рома, почему пульт не работает?
— Пап, я конечно не электрик, но пульт не работает, потому что телевизора нет.

Счастливы вместе

Поделитесь с друзьями:

— Мне нужна твоя одежда, ботинки и мотоцикл.
— Ты забыл сказать волшебное слово.

Терминатор 2: Судный день

Поделитесь с друзьями:

В жизни всегда есть место подвигу, но некоторые все же предпочитают оставаться холостыми…

Поделитесь с друзьями:

Извините, вот вам ваш нос, я нашел его в своих делах.

Джордж Карлин

Поделитесь с друзьями:

Одна боль всегда уменьшает другую. Наступите вы на хвост кошке, у которой болят зубы, и ей станет легче.

Антон Чехов

Поделитесь с друзьями:

— А что это играет?
— Это Антонио Вивальди — времена года.
— Аа, это из Тома и Джерри?
1+1/Неприкасаемые

Поделитесь с друзьями:

Женщины непобедимы… Сегодня слышал, как маленькая девочка лет 6-7 кричит на мальчика обиженным голосом, почти плача: Отдай, это не твоя конфета, я твою уже съела! 🙂

Поделитесь с друзьями:

— Раньше вы гуляли сами по себе…
— А теперь мы будем гулять по бабушке.

Мультфильм 38 попугаев

Поделитесь с друзьями:

— Я склонен думать… — начал было я.
— Похвальное намерение, — язвительно оборвал меня Шерлок Холмс.

Артур Конан Дойл, «Долина Ужаса»

Поделитесь с друзьями:

Он силён, как бык. И почти так же умён.

Поделитесь с друзьями:

Когда я спросила: «Почему вы носите на спине ковёр?» — он ответил: «Мне холодно». Я вообще заметила, что сумасшедшие очень логичны и даже интересны.

Поделитесь с друзьями:

— Ну как свадьба?
— Жених упал в обморок, собака покусала барабанщика.

Секретные материалы

Поделитесь с друзьями:

— Может не стоит так беспокоиться из-за меня, Вас могут лишить прав?
— Не беспокойтесь, месье, у меня нет прав!

Такси

Поделитесь с друзьями:

— Скоро сорокалетие нашего брака! Как бы нам его отметить?
— Минутой молчания.

Отель «Мэриголд»: Лучший из экзотических

Поделитесь с друзьями:

Молодая симпатичная дама интересуется у Марка Твена:

-Правда ли, что все люди произошли от обезьян?
-Да.
-Все-все, и даже я?
-Да, но вы от очень хорошенькой..

Поделитесь с друзьями:

Отпуск: свободное время, которое дается служащим, чтобы дать им понять, что на службе могут обойтись без них и во все остальное время. 

Луи Фортен

Поделитесь с друзьями:

Американские власти отказались строить «Звезду смерти», несмотря на пожелания граждан. Вот свол*чи, вообще о народе не думают!

Поделитесь с друзьями:

Какие три слова чаще всего встречаются в надписях по всему миру? — “I love you“. — Я вас умоляю, эти три слова “Made in China!“

Поделитесь с друзьями:

— Что вы выберете: пиво или спасение души?
— А какое пиво?

Симпсоны

Поделитесь с друзьями:

— Судьба барабанщика — смотреть на три задницы, стоящие перед тобой.

Ринго Старр

Поделитесь с друзьями:

Самое обидное — это когда ты продумал в голове диалог, а твой собеседник говорит не по тексту.

Поделитесь с друзьями:

— Куда ты меня привез?
— Колхоз «Светлый путь».
— Как «Светлый»? Не видно же ничего!

Возвращение блудного попугая

Поделитесь с друзьями:

— Дома есть кто?
— Мама на работе, а отец ушел за лотерейными билетами. Лет шесть назад. Выиграл видимо.

Железный человек 3

Поделитесь с друзьями:

Пусть деньги сбившись в птичью стаю, летят ко мне как ураган.
Пусть окружают, нападают.
И лезут с наглостью в карман.

Поделитесь с друзьями:

— Не учи меня жить, лучше помоги материально

Москва слезам не верит

Поделитесь с друзьями:

— И тебя вылечат. И тебя тоже вылечат… И меня вылечат.

Иван Васильевич меняет профессию

Поделитесь с друзьями:

— Как, по-вашему, умер король?
— Подавился пирогом с голубями.
— Значит, вы обвиняете пекарей?
— Да хоть голубей, только меня оставьте в покое.

Игра престолов

Поделитесь с друзьями:

— Позвольте вас спросить как художник художника: Вы рисовать умеете?

Двенадцать стульев

Поделитесь с друзьями:

— Вы должны покаяться во всех совершённых грехах.
— Тогда мы застрянем здесь навечно, святой отец.

Реальные парни

Поделитесь с друзьями:

Пришла смс от оператора:»общайся с друзьями в 3 раза больше!» У меня либо печень не выдержит, либо из дому выгонят.*

Поделитесь с друзьями:

— Что бывает у женщины раз в месяц и заканчивается через 4-5 дней?
— Зарплата мужа.

Поделитесь с друзьями:

Кроме, официальных трех цветов светофора, в России есть ещё два ″щабудетзеленый″ и ″токашожебыл″

Поделитесь с друзьями:

Каждый из нас произошёл от той обезьяны, которую заслуживает

Поделитесь с друзьями:

С каждым днем вылезать из-под одеяла по утрам становится все труднее. Одеяло, если любишь – отпусти!

Поделитесь с друзьями:

Не верь, не бойся, не проси. Приди, возьми и унеси.

Поделитесь с друзьями:

Корреспондент спрашивает директора сумасшедшего дома, какой тест является критерием для выписки. Директор:
— Мы наливаем полную ванну воды, кладем рядом чайную ложечку и большую кружку и предлагаем освободить ванну от воды.
Корреспондент улыбается и говорит:
— Ну, любой нормальный человек возьмет кружку.
— Нет,— говорит директор,— нормальный человек вытянет пробку.

Поделитесь с друзьями:

Не разбивайте никому сердце, у всех оно только одно. Ломайте кости — их 206.

Поделитесь с друзьями:

Когда душа просит праздника… …кошелек просит пощады!

Поделитесь с друзьями:

— Мой кот в прошлой жизни точно был
Судебным Приставом…
— ОпИсывает имущество???
— Да не только… Сегодня в прихожей еще и арест наложИл…)))

Поделитесь с друзьями:

когда я тебя увидела – сердце в моей груди… кстати о груди. я купила себе новый лифчик

Поделитесь с друзьями:

Он ухаживал за ней целую неделю, а потом ему отключили интернет.

Поделитесь с друзьями:

Что если мир – иллюзия и ничего нет? Тогда я определённо переплатил за ковёр. В. Аллен

Поделитесь с друзьями:

Женщина программист, как морская свинка. Ничего общего ни с морем, ни со свинкой.

Поделитесь с друзьями:

Загадочные все-таки девушки существа — то банку с помидорами открыть не могут, то после трех рюмок пиво глазом открывают.

Поделитесь с друзьями:

Детей интересует вопрос: откуда всё берётся? Взрослых — куда всё девается?

Поделитесь с друзьями:

Меня просто убивает реклама «Эти дни станут лучше — вместе с Always». эти дни не станут лучше даже с Pampers…

Поделитесь с друзьями:

Женщины придумали проституцию, чтобы им платили за секс.
Мужчины придумали брак, чтобы им не платить за секс.
Поэты придумали любовь, чтобы все это не выглядело так отвратительно.

Поделитесь с друзьями:

Женщина за рулём — как звезда в небе: ты её видишь, а она тебя — нет.

Поделитесь с друзьями:

Он курил Парламент, но в парламент не попал. Ел масло Президент, но президентом не стал. И только пиво «Kozel» реально действовало…

Поделитесь с друзьями:

Пуля очень многое меняет в голове, даже если попадает в задницу.

Аль Капоне

Поделитесь с друзьями:

Компьютер — мой МУЖ.Он со мной в горе и в радости, в болезни и в здравии, и только смерть разлучит нас

Поделитесь с друзьями:

Чeловек привык себя спрашивать: кто я? Там ученый, американец, шофер, еврей, иммигрант…
А надо бы все время себя спрашивать:
— Не говно ли я?

Иосиф Бродский

Поделитесь с друзьями:

Скорость звука — довольно странная штука. Родители что-то говорят тебе в двадцать лет, а доходит только к сорока.

Поделитесь с друзьями:

Они — представители самой древней профессии… Они спят за деньги… Они — сторожа

Поделитесь с друзьями:

Небывалая толщина этого отчета защищала его от опасности быть прочитанным. (Уинстон Черчилль)

Поделитесь с друзьями:

Чтобы нравиться девочкам, надо быть умным, красивым, богатым или котом.

Поделитесь с друзьями:

Есть два способа командовать женщиной, но никто их не знает. Кин Хаббард

Поделитесь с друзьями:

Муж кричит на жену: ″Идио…ка! Ты идио…ка!»
Жена спокойно так…″Правильно! Вышла бы замуж за генерала, была бы генеральша!

Поделитесь с друзьями:

Удиви свой универ — пойди работать по специальности.

Поделитесь с друзьями:

-Я так люблю гулять по ночам…
— Ты романтик?
— Я маньяк

Поделитесь с друзьями:

Я горжусь двумя людьми: Гагариным и Ньютоном. Один попытался смыться с этой планеты, второй доказал, что у первого ничего не выйдет!

Поделитесь с друзьями:

Жена — мужу :»Почему носки по всей квартире раскиданы?»
Муж: «Это новая рекламная акция — Собери десять пар и получи деньги на тушь!»

Поделитесь с друзьями:

Когда я и моя жена расходимся во мнениях, мы обычно поступаем так, как хочет она. Жена называет это компромиссом.

Марк Твен

Поделитесь с друзьями:

Чёрная кошка перешла дорогу женщине с пустым ведром… Теперь у обоих проблемы

Поделитесь с друзьями:

Девушка всегда знает, что хочет, потому что вчера видела это в магазине

Поделитесь с друзьями:

Полицейские вознамерились установить мою личность; я не возражал, мне и самому это было интересно. Фредерик Бегбедер «Французский роман»

Поделитесь с друзьями:

Не парься из-за лишнего веса! Посмотри на пингвинов, как разнесло этих бывших ласточек!

Поделитесь с друзьями:

Правильная вывеска в баре: «Нет, у нас нет Wi-Fi. РАЗГОВАРИВАЙТЕ друг с другом!»

Поделитесь с друзьями:

Мужчина, руку вы не предлагаете, сердца у вас нет, дайте хоть на шею сяду…

Поделитесь с друзьями:

В моем тучном теле сидит очень даже стройная женщина, но ей никак не удается выбраться наружу. А учитывая мой аппетит, для нее, похоже, это пожизненное заключение. Фаина Раневская

Поделитесь с друзьями:

Пьяная женщинa – нeпpeдcкaзуeмый ypагaн. Вoт oнa пьeт, a вoт oнa ужe тaнцуeт, плaчет из-зa бeздoмнoй кошки, вopyет цвeты c клyмбы.

Поделитесь с друзьями:

— Нас стошнит, если мы столько будем пить.
— Пускай… Пусть нам будет хорошо и тошно.
Джон Дос Пассос «Манхэттен»

Поделитесь с друзьями:

Нет ничего легче, чем бросить курить, — я уже тридцать раз бросал. Марк Твен

Поделитесь с друзьями:

Гомер прочитал 100 книг и написал одну… Грибоедов прочитал 200 и написал одну… Дарья Донцова прочитала этикетку от шампуня и вдохновилась

Поделитесь с друзьями:

Ищу мужа — миллионера, ну просто они мне, как люди нравятся.

Поделитесь с друзьями:

Бывает проснёшься как птица, Крылатой пружиной на взводе. И хочется жить и трудиться… Но к завтраку это проходит.

Поделитесь с друзьями:

Теория — это когда все известно, но ничего не работает. Практика — это когда все работает, но никто не знает почему. Мы же объединяем теорию и практику: ничего не работает… и никто не знает почему!
Альберт Эйнштейн

Поделитесь с друзьями:

Продавец в овощной лавке нагрубил покупателю и получил в дыню, в тыкву и в репу

Поделитесь с друзьями:

Все мы дети природы, но природу не обмануть, она точно знает на ком ей отдохнуть.

Поделитесь с друзьями:

— Дорогая! А что, суп вчерашний? — Я тебе больше скажу, он еще и завтрашний!

Поделитесь с друзьями:

Если трезво оценить ситуацию, то хочется выпить.

Поделитесь с друзьями:

В автобусах, трамваях и троллейбусах мужчины всегда сидят с закрытыми глазами потому, что им больно видеть, как женщины стоят

Поделитесь с друзьями:

— Эх, кабы, знать, что Принц тоже любит меня, можно было бы отправить ему в подарок вот этот чудесный цветок! — потрошила Принцесса свой гербарий. — А раз определенности нет — отправлю осиновый кол и дохлого кузнечика. Пусть анализирует!

Юлия Надеждинская

Поделитесь с друзьями:

— Что пьем?
— Русскоее мохито…
— Ром и мята?
— Нет. Водка и укроп.

Поделитесь с друзьями:

Новая сигнализация «Григорий Лепc»: При попытке угона автомобиля кричит — «Но ведь она не твоя!!»

Поделитесь с друзьями:

От тех, кого трудно найти, легко потерять и невозможно забыть, обычно чрезвычайно трудно избавиться…

Поделитесь с друзьями:

— Ты где была? — На встрече одноклассников…! — Три дня??? — Мы вспоминали! — Что вспоминали??? — Где я живу..

Поделитесь с друзьями:

Если вы ищите неприятностей и долго их не находите – не отчаивайтесь. Кин Хаббард

Поделитесь с друзьями:

Чем хуже выглядит вернувшийся из отпуска, тем лучше он отдохнул.

Поделитесь с друзьями:

Как только находишь свою половинку, вокруг начинают бродить другие половинки и заставляют тебя сомневаться.

Поделитесь с друзьями:

Никогда не спорь с мужчиной.
Начинай или плакать или раздеваться.

Поделитесь с друзьями:

Вернувшиеся с юга птицы напали на прохожего и отобрали у него пуховик.

Поделитесь с друзьями:

Истинный джентльмен должен уступить место женщине и никому не уступать место рядом с нею.

Поделитесь с друзьями:

Поступай с людьми так, как хочешь, чтобы поступали с тобой. Подари мужу цветы.

Поделитесь с друзьями:

Не все мечты сбываются. Вот я, например, в детстве мечтал стать поваром,но не сложилось.

Билл Гейтс

Поделитесь с друзьями:

Я люблю свою кровать и могу оставаться в ней часами, даже днем, натянув покрывало до самого подбородка. Здесь так спокойно, никаких происшествий, никаких людей, ничего.

Поделитесь с друзьями:

Хуже просмотра фильма с человеком, который его уже видел — просмотр с человеком, который читал книгу по этому фильму.

Поделитесь с друзьями:

– Девушка, вы же давно ждете принца на белом коне?
– Да.
– Ну вот, я пришел.
– Круто, а где принц?

Поделитесь с друзьями:

Объяснительная опоздавшего на работу: «Я пришёл на работу в 10:00, не в 8:00, потому что до 10:00 всё равно никто ничего не делает, а только чай пьют. А я столько чая выпить не могу».

Поделитесь с друзьями:

Если ваш мужчина:
1. Не грубит.
2. Не пьет.
3. Не бесит.
4. Не сидит за компом.
5. Не ходит с друзьями в баню.

Потыкайте в него палкой… Походу он сдох.

Поделитесь с друзьями:

Ученые выяснили, чего хочет женщина. Но она уже передумала!

Поделитесь с друзьями:

Супружество – это отношения между двумя людьми, один из которых всегда прав, а другой – это муж.

Поделитесь с друзьями:

Могла ли Биче, словно Дант, творить,
Или Лаура жар любви восславить?
Я научила женщин говорить…
Но, Боже, как их замолчать заставить!

Поделитесь с друзьями:

Грешники после смерти попадают в общественный транспорт. В 8 утра. Навечно.

Поделитесь с друзьями:

Все мы по природе своей пятницофилы и понедельникофобы.

Поделитесь с друзьями:

После магической фразы «ПОРА СПАТЬ» на детей нападает сушняк, голод и они хотят писать.

Поделитесь с друзьями:

Бывает, смотришь на себя со стороны, и понимаешь: «Дай Бог любимому терпения, терпения и еще раз терпения»!

Поделитесь с друзьями:

Своих мужей, миленькие мои, всегда ревнуют только уродины, а нам красавицам не до того, мы ревнуем чужих. Фаина Раневская

Поделитесь с друзьями:

«Я всё равно буду носить твою фамилию», — крикнула она ему вслед и вышла замуж за его брата

Поделитесь с друзьями:

Место женщины на кухне! Где она сидит задрав ноги, в удобном кресле, с бокалом вина и наблюдает, как мужчина готовит ужин…

Поделитесь с друзьями:

Иду, смотрю 2 голубя сидят, один другого по головe тюк-тюк… второй взъeрошился, но молчит, тeрпит… муж, нaвeрноe 😀

Поделитесь с друзьями:

Бабушка про Skype: ″Хорошая вещь! Вроде как гостей принимаешь, а кормить их не надо!″

Поделитесь с друзьями:

Вчера, казалось, набралась ума-разума… Сегодня проснулась — а нет, просто набралась…

Поделитесь с друзьями:

Идеальное утро: проснулся, потянулся, улыбнулся, перевернулся и… заснул !

Поделитесь с друзьями:

Если у вас умные глаза и загадочная улыбка, значит, вы фотографируетесь.

Поделитесь с друзьями:

— Алло, здравствуте, это из дет.сада звонят. Ваша очередь подошла!
— Спасибо, сына вчера в армию забрали 😀

Поделитесь с друзьями:

Они счастливо и долго жили, пока не встретили друг друга! Михаил Задорнов

Поделитесь с друзьями:

Ночь. Пьяная жена на пороге. Муж открывает дверь; – Ну что, опять шлялась, пила, курила?! – Дорогой! Зависть очень плохое чувство.

Поделитесь с друзьями:

Пунктуальность – это искусство угадывать, на сколько опоздает партнёр.

Поделитесь с друзьями:

В психушке крик из палаты: Я посланник бога!!, и крик из другой: Я никого не посылал!

Поделитесь с друзьями:



Случайная цитатаСледующая » Подождите…

Прикольные и смешные афоризмы и фразы

Эта рубрика посвящена смешным и прикольным афоризмам, фразам, высказываниям, поговоркам, пословицам, цитатам, шуточным выражениям. Представлены лучшие афоризмы, прошедшие предварительный отбор. Отрицательно оцененные фразы — удаляются.

Суйте свой нос в умные книги, а не в чужие жизни.

Вы никогда не заработаете денег, если думаете, что их зарабатывают…

Никогда не оставайся узником своего прошлого, это был просто урок, а не пожизненный приговор…

Главное разочарование в детстве — шоколадный заяц, красивый, но пустой внутри. Главное разочарование жизни — люди, как шоколадные зайцы.

Не беда если нет друзей. БЕДА, если они есть, но как с@ки фальшивые и продажные.

Имеющий терпение имеет всех.

Когда у людей низкая самооценка, любое высказывание, не адресованное никому конкретно, воспринимается на свой счёт. Мои соболезнования.

Жить нужно так, чтобы люди не понимали откуда у тебя деньги.

Нет смысла откладывать на завтра то, что вы вообще не хотите делать никогда в жизни!

Время лечит… Главное – не сдохнуть во время лечения.

Никому никогда ничего не объясняйте — каждый всё равно поймёт так, как ему выгодно.

Если в твоей жизни что-то не клеится, брось клей и переходи на гвозди! Забей на всё и живи счастливо!

Доверие как бумага, раз помнёшь — идеальным оно не будет уже никогда, как не ровняй.

Держись от бедных родственников подальше. За твою помощь они сначала благодарны, потом её ждут, потом недовольны, что мало. А потом они тебя ненавидят.

Один из самых счастливых моментов в жизни — это день, когда ты найдёшь в себе мужество отпустить то, что ты не можешь изменить.

Когда вместо «Последний» говорят «Крайний» я думаю вот о чём: Все кругом сплошь альпинисты и сапёры, и только высшая степень суеверности спасёт рисковых офисных парней.

Мир погубит не атом, и не рак, а жадный дурак.

Лучше один раз взяться за ум, чем потом всю жизнь хвататься за голову.

Легенду про то, что человек не может жить без работы придумали те, кто никогда не работал, для тех, кто никогда не отдыхал.

Если Бог дал человеку два глаза, два уха и лишь один язык, то это наверняка с намёком, чтобы он вдвое больше смотрел и слушал, чем говорил.

 

Влияние окиси углерода на экспрессию генов в цереброкортикальных астроцитах: Проверка эталонных генов для количественной ПЦР в реальном времени

Основные моменты

СО влияет на экспрессию обычно используемых эталонных генов в астроцитах.

Gapdh и Ppia рекомендуются в качестве контрольных генов для исследований экспрессии генов с CO.

Actg1 , Hprt1 , Tbp , 15, Pgk15 Sdha и Rn18s не являются адекватными генами внутреннего контроля.

Bdnf и Bcl 2 Подтвержденные уровни мРНК Gapdh и Ppia в качестве соответствующих эталонных генов.

Реферат

Количественная полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в реальном времени (qRT-PCR) — широко используемый метод для характеристики изменений экспрессии генов в сложных клеточных и тканевых процессах, таких как цитопротекция или воспаление. Точная оценка изменений в экспрессии генов зависит от выбора адекватного внутреннего эталонного гена (ов).Окись углерода (CO) влияет на несколько метаболических путей, и синтез белка de novo имеет решающее значение для клеточных реакций на этот газотрансмиттер. Здесь был проанализирован выбор обычно используемых эталонных генов для определения наиболее подходящих генов внутреннего контроля для оценки влияния CO на экспрессию генов в культивируемых цереброкортикальных астроцитах. Клетки подвергались действию CO путем обработки CORM-A1 (молекула, высвобождающая CO A1), и четыре различных алгоритма (geNorm, NormFinder, Delta Ct и BestKeeper) применялись для оценки стабильности восьми предполагаемых эталонных генов.Наши результаты показывают, что Gapdh (глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа) вместе с Ppia (пептидилпропилизомераза A) является наиболее подходящей парой генов для нормализации результатов qRT-PCR в используемых экспериментальных условиях. Pgk1 (фосфоглицераткиназа 1), Hprt1 (гипоксантингуанинфосфорибозилтрансфераза I), Sdha (комплекс сукцинатдегидрогеназы, субъединица A), Tbp (белок, связывающий бокс ТАТА), 16 Actg1 900ma и Rn18s (18S рРНК) гены показали менее стабильные профили экспрессии в культивируемых кортикальных астроцитах, подвергнутых воздействию CORM-A1 в течение до 60 мин.Для проверки мы проанализировали влияние CO на экспрессию Bdnf и bcl 2 . Были получены разные результаты в зависимости от используемых эталонных генов. Значительное увеличение экспрессии обоих генов было обнаружено, когда результаты были нормализованы с Gapdh и Ppia , в отличие от результатов, полученных при использовании других генов в качестве эталона. Эти результаты подчеркивают необходимость правильного и точного выбора эталонных генов, используемых для количественной оценки результатов qRT-PCR в исследованиях влияния CO на экспрессию генов.

Ключевые слова

Окись углерода

Астроциты

Референсные гены

Количественная ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени

Сокращения

Bcl 2

B-клеточный лейкоз 2

nbd, производный от B-клеточного лейкоза 00, полученного из B-лимфомы 2

f нейротрофический фактор

CORM-A1

Молекула, высвобождающая монооксид углерода A1

Gapdh

глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа

Hprt1

гипоксантин-гуанин-фосфорибозилтрансфераза I

MAPK

митохондриальная фосфорибозилтрансфераза I

MAPK

митоген

MAPK9 Ppia

пептидилпропилизомераза A

PPARɣ

гамма-рецептор, активируемый пролифератором пероксисом

qRT-PCR

Количественная полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в реальном времени

Sdha

Сукцинатдегидрогеназный комплекс subunit GuCanyly15, Subunit A

ТА TA-бокс-связывающий белок

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Полный текст

Copyright © 2015 Elsevier Inc.Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

Окись углерода подавляет воспаление, опосредованное тенасцином-C, посредством экспрессии IL-10 в мышиной септической модели

Тенасцин-C (TN-C), гликопротеин внеклеточного матрикса (ECM), специфически индуцируется при повреждении тканей и инфекции, а также при септических состояниях. Известно, что газообразный оксид углерода (CO) оказывает различное противовоспалительное действие при различных воспалительных заболеваниях. Однако механизмы, лежащие в основе действия CO на TN-C-опосредованное воспаление, неизвестны.В настоящем исследовании мы обнаружили, что лечение LPS значительно усиливает экспрессию TN-C в макрофагах. Газ CO или обработка соединением-донором CO, CORM-2, резко снижает LPS-индуцированную экспрессию TN-C и провоспалительных цитокинов, в то же время значительно повышая экспрессию IL-10. Обработка миРНК TN-C значительно подавляла эффекты LPS на продукцию провоспалительных цитокинов. МиРНК TN-C не влияла на CORM-2-зависимое увеличение экспрессии IL-10. В клетках, трансфицированных миРНК IL-10, CORM-2 не влиял на LPS-индуцированную экспрессию TN-C и его нижележащих цитокинов.Эти данные предполагают, что IL-10 опосредует ингибирующее действие CO на TN-C и последующее производство провоспалительных цитокинов. Кроме того, введение CORM-2 резко снижает LPS-индуцированную продукцию TN-C и провоспалительных цитокинов, в то время как экспрессия IL-10 значительно повышается. В заключение, CO регулирует экспрессию IL-10 и, таким образом, ингибирует TN-C-опосредованное воспаление in vitro и in vivo .

1. Введение

Молекулярные паттерны, связанные с повреждениями (DAMP) — это эндогенные молекулы, которые могут поддерживать воспалительные реакции во время клеточного стресса или повреждения.Гликопротеин внеклеточного матрикса TN-C специфически индуцируется при повреждении ткани [1, 2] и инфекции [3, 4] и активируется у пациентов с сепсисом [5]. TLR4-опосредованная экспрессия TN-C индуцирует продукцию цитокинов как в человеческих, так и в мышиных макрофагах, а также в синовиальных фибробластах ревматоидного артрита [6]. Активированный TLR4 индуцирует экспрессию TN-C в синовиальных фибробластах и ​​миелоидных клетках [7]. Индукция TN-C имеет решающее значение для провоспалительного ответа in vivo [8]. Важно отметить, что глюкокортикоиды могут подавлять экспрессию TN-C в стромальных клетках и фибробластах костного мозга [9].Кроме того, мыши и макрофаги, полученные из костного мозга (BMDM), дефицитные по TN-C, демонстрируют более низкую продукцию провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α , во время LPS-индуцированного сепсиса. Таким образом, TN-C был признан регулятором раннего иммунного ответа [8].

IL-10 является жизненно важным противовоспалительным цитокином, который необходим для подавления воспалительных сигналов и защиты хозяина от чрезмерного воспаления [10]. Мыши, лишенные IL-10, инфицированные бактериальными патогенами, демонстрируют высокую смертность, связанную с чрезмерными воспалительными реакциями [10].Низкие уровни экспрессии IL-10 были связаны с различными воспалительными заболеваниями, такими как язвенный колит, болезнь Крона и астма у людей [11, 12]. Противовоспалительный эффект IL-10 опосредуется путем JAK1-STAT3, который приводит к ингибированию провоспалительных белков, таких как TNF- α и IL-6 [10, 13]. Более высокая экспрессия IL-10 была обнаружена в BMDM от TN-C-дефицитных мышей, в то время как была более низкая экспрессия провоспалительных цитокинов [8], что указывает на противовоспалительную роль IL-10 в модели TN-C-опосредованного воспалительного заболевания.

Окись углерода (СО) образуется как конечный продукт окислительной деградации гема под действием ферментативного действия гемоксигеназы, которая превращает гем в биливердин, свободное железо и СО [14]. Противовоспалительные эффекты CO были очевидны на мышиных моделях сепсиса, послеоперационной кишечной непроходимости и ксенотрансплантации органов [15, 16]. Кроме того, было обнаружено, что CO является важным регулятором в подавлении воспалительных цитокинов и медиаторов, включая индуцибельную синтазу оксида азота (iNOS), TNF-, α и IL-6 [17, 18], а также индукцию противовоспалительный цитокин ИЛ-10 [19].Продукция эндогенного CO была важна для IL-10-зависимого ингибирования экспрессии TNF-α [20]. На сегодняшний день нет сообщений о влиянии CO-опосредованной продукции IL-10 на регуляцию TN-C-опосредованного воспаления. Поэтому в текущем исследовании мы изучили влияние CO-зависимой генерации IL-10 на TN-C-опосредованное воспаление в макрофагах и на модели септических мышей.

2. Методы и материалы
2.1. Реагенты и антитела
Антитело

Tenascin-C было приобретено в Cell Signaling Technology (MA, США). β -актин, антимышиные и козьи антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена, были получены от Santa Cruz Biotechnology (Санта-Крус, Калифорния, США). Наборы коктейлей для липополисахаридов (LPS) и ингибиторов протеаз были приобретены у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США). Протопорфирин IX (ZnPPIX) цинка был получен от Frontier Scientific Inc. Рекомбинантные белки IL-10 мыши были приобретены в R&D systems. Среда Игла, модифицированная Дульбекко (DMEM), фетальная бычья сыворотка (FBS), пенициллин-стрептомицин и пируват натрия были приобретены в Invitrogen (Гранд-Айленд, Нью-Йорк, США).Все остальные химические вещества были получены от Sigma-Aldrich.

2.2. Культура клеток

Клетки RAW 264.7 и перитонеальные макрофаги культивировали в среде DMEM (Invitrogen), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) и 1% стрептомицина пенициллина при 37 ° C в 5% CO 2 до 75-80% слияния. Для приготовления перитонеальных макрофагов мышам внутрибрюшинно вводили 3% тиогликолят в течение 3 дней и клетки собирали для культивирования. Клетки (5 × 10 5 / мл) высевали в 6-луночные планшеты и инкубировали в течение ночи для последующих экспериментов.

2.3. Модель на животных

Семинедельные самцы мышей C57BL / 6 дикого типа предварительно обрабатывали CORM-2 (30 мг / кг, внутрибрюшинно) [21] или RuCl 3 (30 мг / кг, внутрибрюшинно). Затем мышам вводили ЛПС (10 мг / кг, внутрибрюшинно). Через 2 часа сыворотку крови и ткани печени собирали и хранили при -80 ° C для анализа белков и РНК. Все эксперименты с мышами были одобрены Комитетом по уходу за животными Университета Ульсана, Ульсан, Корея.

2.4. Трансфекция

RAW 264.7 клеток (5 × 10 5 / мл) культивировали в 6-луночных планшетах в течение 3 ч и трансфицировали миРНК IL-10 (100 нМ) или миРНК TN-C (100 нМ) от Santa Cruz Biotechnology с использованием липофектамина 2000 согласно согласно инструкции производителя. После трансфекции клетки инкубировали с или без CORM-2 (20 мк M), а затем стимулировали с или без LPS (100 нг / мл).

2,5. Вестерн-блоттинг

Экстракты клеток лизировали с использованием буфера для лизиса, содержащего буфер RIPA, ингибитор протеазы и ингибиторы фосфатазы.После лизиса концентрацию белка измеряли с помощью анализа BCA (Pierce Biotechnology Inc., Рокфорд, Иллинойс, США). Образцы, содержащие равные количества белка, подвергали электрофорезу, и белки переносили на мембраны из поливинилидендифторида (PVDF). Мембраны блокировали 5% обезжиренным молоком в течение 20 мин, а затем инкубировали при 4 ° C в течение ночи с первичными антителами, а затем вторичными антителами против TN-C и β -актином, конъюгированным с пероксидазой хрена. Для визуализации иммунореактивных полос использовали систему вестерн-блоттинга с усиленной хемилюминесценцией (ECL) (GE Healthcare Life Sciences, Бакингемшир, Великобритания).

2.6. Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (RT-PCR)

Выделение общей РНК проводили из макрофагов RAW 264.7 с использованием реагента TRIzol (Invitrogen) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, тотальную РНК (2 мкг, г) использовали для получения кДНК с использованием обратной транскриптазы M-MLV (Promega Corporation, Мэдисон, Висконсин, США) и праймера олиго (dT) 15 (Promega). Полученную кДНК подвергали ПЦР на мышиный GAPDH (5′-AGGCCGGTGCTGAGTATGTC-3 ‘, 5′-TGCCTGCTTCACCTTCT-3′, 530 п.н.), HO-1 (5’-TCCCAGACACCGCTCCTCCAG-3 ‘, 5′-GGATCTGTG , 313 п. , 421 п.н.), ИЛ-6 (5’-GTGGAAATGAGAAAAGAGTTGT-3 ‘, 5′-CCTCTTGGTTGAAGATATGAAT-3′, 283 п.н.) и ИЛ-10 (5’-GACAATAACTGCACCCACTT-3 ‘, 5′-TCAAATGCTCCT-3’-TCAAATGCTCCT- 250 п.н.), а GAPDH использовали в качестве внутреннего контроля загрузки.

2.7. ОТ-ПЦР в реальном времени

Общую РНК экстрагировали из перитонеальных макрофагов / тканей печени RAW 264.7 с использованием реагента TRIzol (Invitrogen) в соответствии с инструкциями производителя. Кроме того, кДНК получали с использованием обратной транскриптазы M-MLV (Promega) и праймера олиго (dT) 15 (Promega). Сформулированную кДНК подвергали ОТ-ПЦР в реальном времени с использованием SYBR Green qPCR Master Mix (2x) (продукты USB, Affymetrix) в системе ABI 7500 Fast Real-Time PCR System (Applied Biosystems) для GAPDH мыши (5′-GGGAAGCCCATCACCATCT-3 ‘, 5′-CGGCCTCACCCCATTTG-3′), TN-C (5’-ACCATGCTGAGATAGATGTTCCAAA-3 ‘, 5′-CTTGACAGCAGAAACACCAATCC-3′), TNF-A (5′-AGACTGCCTCACACTCAGATCACTGACTTC-3 ′), ИЛ-6 (5′-CGATGATGCACTTGCAGAAA-3 ′, 5′-TGGAAATTGGGGTAGGAAGG-3 ′), ИЛ-10 (5′-ACTGCTATGCTGCCTGCTCTTACT-3 ′, 5′-GAATTTCAAATGCTCCT-3 ′ 5’-TCAGTCCCAAACCTCGCGGT-3 ‘, 5′-GCTGTGCAGGTGTTGAGCC-3’).GAPDH использовали в качестве внутреннего контроля загрузки для нормализации всех продуктов ПЦР.

2,8. Иммуноферментный анализ (ELISA)

Макрофаги на 6-луночных планшетах инкубировали в течение ночи, а затем предварительно обрабатывали CORM-2 в течение 1 часа с последующей стимуляцией LPS в течение 24 часов. Кроме того, мышам вводили CORM-2 в течение 2 часов, а затем с помощью инъекции LPS индуцировали сепсис. Через 2 часа супернатанты, собранные из различных образцов, или сыворотки крови, взятые у разных мышей, анализировали на TNF-, α и IL-6, используя набор для ELISA для мышей (Biolegend).

2.9. Статистический анализ

Статистические различия между группами оценивали с помощью однофакторного дисперсионного анализа (непараметрический) или критерия Стьюдента при сравнении нескольких групп. Результаты выражены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Различия считались значительными, когда, и.

3. Результаты
3.1. ЛПС увеличивает экспрессию TN-C в зависимости от времени и дозы

Макрофаги обладают провоспалительными или противовоспалительными функциями в зависимости от типа стимулов [22].Стимуляция макрофагов грамотрицательным бактериальным ЛПС может усиливать экспрессию TN-C [7]. TLR4 участвует в индукции TN-C и последующем синтезе цитокинов как в человеческих, так и в мышиных макрофагах [23] и человеческих хондроцитах [24]. В настоящем исследовании мы изучили воспалительные реакции в мышиных макрофагах RAW 264.7, обработанных LPS (100 нг / мл). Экспрессия мРНК TN-C и белка увеличивалась через 4 и 8 ч после обработки LPS (рисунки 1 (а) и 1 (b)) соответственно. Поэтому в последующих экспериментах мы измерили экспрессию мРНК и белка TN-C через 8 часов.Кроме того, LPS дозозависимо увеличивал экспрессию мРНК TN-C и белка через 8 часов (рисунки 1 (c) и 1 (d)). Эти результаты предполагают, что LPS индуцирует экспрессию TN-C в зависимости от времени и дозы в макрофагах RAW 264.7.

3.2. CO ингибирует индуцированную LPS экспрессию TN-C и продукцию провоспалительных цитокинов

Противовоспалительные, антиапоптотические и цитопротекторные свойства CO хорошо известны [25]. Кроме того, сообщалось, что генерация эндогенного CO была необходима для IL-10-зависимого ингибирования экспрессии TNF- α [20].CO может образовываться фармакологически из молекул, высвобождающих CO (CORM), которые состоят из тяжелого металла, такого как рутений, окруженного карбонильными группами [26, 27]. В эндотелиальных клетках головного мозга индуцированная LPS активация воспалительных сигналов, таких как NF- κ B (p65), экспрессия COX-2 и продукция PGE2, ингибировалась предварительной обработкой CORM-2 [28]. В настоящем исследовании мы исследовали влияние CO на TN-C-опосредованное воспаление. Клетки RAW 264.7 предварительно обрабатывали CORM-2, а затем стимулировали LPS.Мы обнаружили, что CORM-2 значительно и дозозависимо подавлял экспрессию LPS-стимулированной экспрессии TN-C (рис. 2 (а)). Кроме того, предварительная обработка CORM-2 значительно снизила уровни мРНК и белка провоспалительных цитокинов, таких как TNF-, α и IL-6 (Фигуры 2 (b), 2 (c) и 2 (d)), соответственно. Для подтверждения эффектов CO на воспаление, опосредованное TN-C, клетки предварительно обрабатывали с использованием или без использования CORM-2 или RuCl 3 (отрицательный контроль для CORM-2), а затем стимулировали с помощью или без LPS.Интересно, что CORM-2 значительно подавлял LPS-индуцированный TN-C, а также экспрессию провоспалительных цитокинов, тогда как RuCl 3 не оказывал никакого эффекта (рисунки 2 (e), 2 (f), 2 (g) и 2 (h)). )). Чтобы подтвердить эффекты CO, мы предварительно обработали клетки газом CO, а затем инкубировали их с LPS. Соответственно, газ CO резко снижает LPS-стимулированную экспрессию TN-C (Рисунок 2 (i)), а также TNF- α (Рисунок 2 (j)) и IL-6 (Рисунок 2 (k)).

Для дальнейшего подтверждения эффектов CO на LPS-индуцированную экспрессию TN-C и провоспалительные цитокины, перитонеальные макрофаги мыши предварительно обрабатывали CORM-2 в различных концентрациях и инкубировали с LPS.Мы обнаружили, что CORM-2 резко снижает LPS-индуцированный TN-C (рис. 3 (а)) и его нижестоящие цитокины (рис. 3 (b)). Напротив, RuCl 3 не снижал экспрессию TN-C и провоспалительных цитокинов (Фигуры 3 (c) и 3 (d)). Эти результаты предполагают, что CO может подавлять LPS-опосредованные воспалительные сигналы in vitro .

3.3. CO / HO-1 подавляет TN-C-опосредованное воспаление посредством индукции IL-10

Низкие дозы CO подавляют воспалительные реакции в мышиной модели сепсиса за счет ингибирования продукции воспалительных цитокинов [18, 29], а также повышенного LPS-индуцированного экспрессия противовоспалительного цитокина IL-10 в различных типах клеток [19, 29].Кроме того, мыши с дефицитом TN-C демонстрировали более низкие уровни TNF- α и продукцию цитокинов нижестоящего уровня у мышей с сепсисом, обработанных LPS, и макрофагов, происходящих из костного мозга (BMDM) [8]. В нашем исследовании мы исследовали влияние CO на TN-C-индуцированную экспрессию провоспалительных цитокинов и экспрессию противовоспалительного IL-10 в RAW 264.7 и перитонеальных макрофагах. CORM-2 значительно и дозозависимо индуцировал экспрессию IL-10 в LPS-стимулированных макрофагах (Фигуры 4 (a) и 4 (b)).Кроме того, обработка газом CO значительно повышала уровни IL-10 (фиг. 4 (c)) в LPS-стимулированных макрофагах RAW 264.7. Однако обработка RuCl 3 не оказала никакого эффекта на экспрессию IL-10 в этих клетках (Фигуры 4 (d) и 4 (e)). Эти наблюдения показывают, что противовоспалительные эффекты CO опосредуются IL-10 в LPS-стимулированных макрофагах. Инкубация клеток RAW 264.7 с миРНК TN-C значительно подавляла эффекты LPS на TN-C и продукцию провоспалительных цитокинов (рисунки 4 (f), 4 (g) и 4 (h)), тогда как это не влияло на Экспрессия IL-10 (рис. 4 (i)), предполагая, что IL-10 регулируется независимо от TN-C и его нижележащих цитокинов.Для подтверждения функции CO-индуцированного IL-10 на TN-C-опосредованное воспаление макрофаги трансфицировали siRNA IL-10 и обрабатывали CORM-2 перед стимуляцией LPS. Эффективность трансфекции миРНК IL-10 показана на рисунке 4 (j). Мы обнаружили, что миРНК IL-10 обращает ингибирующий эффект CORM-2 на экспрессию TN-C и продукцию воспалительных цитокинов в LPS-стимулированных макрофагах по сравнению с контрольной миРНК (рисунки 4 (k), 4 (l) и 4 (m)). ). Предварительная обработка рекомбинантного IL-10 со стимуляцией LPS или без нее показала такую ​​же эффективность CORM-2 в отношении значительного снижения экспрессии TN-C (фигура 4 (n)).Кроме того, HO-1 увеличивает продукцию IL-10 [30]. Согласно Иноуэ и коллегам [30], сверхэкспрессия HO-1 обеспечивает цитопротекцию через посредство продукции IL-10. Таким образом, мы исследовали экспрессию противовоспалительного гена НО-1 в этих условиях. Интересно, что мы обнаружили, что CORM-2 значительно увеличивал уровень экспрессии HO-1 (Рисунок 4 (o)), тогда как RuCl 3 не оказывал никакого влияния на экспрессию HO-1 (Рисунок 4 (o)) и, наоборот, уменьшал уровни экспрессии TN-C.Однако ингибирование активности HO с использованием ZnPPIX не отменяет эффекты CORM-2 на экспрессию TN-C (фигура 4 (p)), указывая на то, что опосредованное CORM-2 подавление TN-C не зависит от активности HO в LPS- стимулировали макрофаги RAW 264.7. Основываясь на этих результатах, мы делаем вывод, что CO-индуцированный IL-10 ингибирует TN-C-опосредованное воспаление.

3.4. CO ингибирует TN-C-опосредованное воспаление
In vivo у мышей с сепсисом Модель

Сепсис, системная воспалительная реакция, возникает в результате чрезмерной продукции провоспалительных цитокинов при стимуляции LPS [31].Кроме того, провоспалительные цитокины, такие как TNF- α , IL-1 β и IL-6, были обнаружены в более высоких концентрациях у пациентов с сепсисом [32, 33]. Введение ЛПС мышам показало, что экспрессия TN-C необходима для провоспалительной передачи сигналов [8]. Кроме того, применение экзогенного СО ингибирует индуцированную ЛПС продукцию TNF- α , одновременно увеличивая продукцию IL-10 in vitro и in vivo [29]. Однако нет сообщений об эффектах CO-опосредованного продуцирования IL-10 в отношении регуляции TN-C и воспаления на модели септических мышей.В нашем исследовании, чтобы изучить эффекты in vivo CO с использованием CORM-2 на LPS-индуцированную эндотоксемию и TN-C-опосредованную экспрессию воспалительных цитокинов, мы предварительно обрабатывали мышей CORM-2 (30 мг / кг, внутрибрюшинно) или RuCl 3 (30 мг / кг, внутрибрюшинно) в течение 2 часов и ЛПС (10 мг / кг, внутрибрюшинно) в течение 2 часов. Интересно, что CORM-2 значительно снижал экспрессию мРНК TN-C (рисунок 5 (a)), TNF- α и IL-6 (рисунок 5 (b)) и секрецию белка (рисунок 5 (c)) и одновременно увеличивал Экспрессия IL-10 (рис. 5 (d)) в ткани печени мышей с эндотоксемией, вызванной LPS.Кроме того, уровни IL-10 (фиг. 5 (e)) были увеличены, и, наоборот, уровни TN-C (фиг. 5 (f)) снизились в сыворотке мышей, обработанных CORM-2. Таким образом, результаты экспериментов in vivo предполагают, что CO ингибирует TN-C и его нижележащие воспалительные цитокины, в результате чего экспрессия IL-10 повышается в модели септических мышей. Схема представлена, чтобы проиллюстрировать каждый из этих результатов (Рисунок 6).


4. Обсуждение

TN-C уникален своим отличным паттерном экспрессии.При повреждении ткани TN-C экспрессируется временно, тогда как его экспрессия снижается после восстановления ткани [1]. Более того, стойкая экспрессия TN-C происходит во время хронического воспаления [34]. Кроме того, TN-C отсутствует в большинстве здоровых тканей взрослого человека [2], тогда как высокие уровни обнаруживаются во время инфекции и у пациентов с сепсисом. Однако TN-C экспрессируется в участках воспаления независимо от локализации или типа причинного инсульта, что указывает на его способность участвовать в общем воспалительном ответе.

TN-C может увеличивать синтез цитокинов в человеческих хондроцитах [24] и миелоидных клетках [7] TLR4-зависимым образом, а также активировать мышиные миелоидные клетки [35, 36]. Кроме того, экспрессия TN-C временно индуцируется LPS в клетках врожденного иммунитета в зависимости от NF- κ B [7, 37], и ее дисрегуляция наблюдается как при аутоиммунных, так и при воспалительных заболеваниях, таких как сепсис [38]. В настоящем исследовании мы обнаружили, что ЛПС значительно увеличивает продукцию TN-C и провоспалительных цитокинов в макрофагах, а также в модели на мышах.Следовательно, понимание того, какие соединения могут ингибировать TLR-опосредованную экспрессию TN-C и продукцию цитокинов, может улучшить стратегии для управления чрезмерным воспалением.

Недавно исследователи сообщили, что газ CO может оказывать благотворное влияние на различные модели клеток и животных. СО играет важную роль в предотвращении апоптоза в некоторых типах клеток, таких как эндотелиальные клетки [39], фибробласты [40] и β -клетки поджелудочной железы [41], и подавляет пролиферацию гладкомышечных клеток [42], предотвращая, таким образом, атеросклеротическое поражение. поражения.В моделях на животных CO снижал отторжение трансплантата [43] и воспаление легких [44].

Соединения CORM являются надежным источником CO, который может имитировать газ CO во многих биологических функциях [26, 45]. Следовательно, CORM представляют собой важные инструменты для понимания биологического значения CO для физиологии и болезней. CORM-2 был первым соединением, используемым для контролируемой доставки CO в биологические системы [27]. В текущем исследовании, чтобы изучить эффекты CO, мы предварительно обработали макрофаги и мышей CORM-2 в модели воспаления, стимулированного LPS.Интересно, что CORM-2 значительно снижает LPS-индуцированную продукцию TN-C и провоспалительных цитокинов in vitro и in vivo . Точно так же предварительная обработка газом CO значительно снизила LPS-стимулированную продукцию TN-C и цитокинов в макрофагах, поддерживая прямые эффекты CO на TN-C-опосредованное воспаление. Кроме того, RuCl 3, , отрицательный контроль для CORM-2, не влиял на LPS-опосредованную экспрессию TN-C, TNF-, α и IL-6 в макрофагах или у мышей с сепсисом.Эти результаты подтверждают, что CO ингибирует LPS-опосредованную продукцию TN-C и провоспалительных цитокинов.

Противовоспалительный цитокин IL-10 играет решающую роль в подавлении сигналов провоспалительных генов, индуцированных Toll-подобным рецептором (TLR). Интересно, что CO, как было обнаружено, увеличивает уровни противовоспалительного, IL-10 [19], в то время как уровни провоспалительных цитокинов были снижены в нескольких системах in vitro и [18, 29]. Кроме того, было обнаружено, что CORM-2 регулирует воспалительные реакции за счет снижения экспрессии IL-1 β и увеличения экспрессии IL-10 [46].В модели сепсиса CO-опосредованная активация сигнального пути MKK3 / p38 MAPK участвует в индукции IL-10 [29]. В нашем исследовании мы определили, что эффекты CO значительно увеличивают экспрессию IL-10 в условиях, стимулированных LPS, в то время как RuCl 3 не оказывает никакого эффекта in vitro или in vivo . Кроме того, миРНК IL-10 значительно изменяла эффекты CORM-2 на TN-C и продукцию провоспалительных цитокинов, тогда как миРНК TN-C значительно снижала уровни экспрессии провоспалительных генов, не оказывая влияния на CO-опосредованную экспрессию IL-10.Эти данные свидетельствуют о том, что CO-опосредованная экспрессия IL-10 участвует в ингибировании TN-C-опосредованного воспаления.

Таким образом, мы определили, что CO-индуцированный IL-10 участвует в ингибировании зависимой от передачи сигналов TLR4 экспрессии TN-C и, таким образом, ингибирует воспалительный ответ in vitro и in vivo . Это исследование описывает новый CO-зависимый сигнальный путь IL-10, ответственный за ингибирование TN-C-зависимого воспаления, и потенциально обеспечивает обоснование новых терапевтических стратегий для лечения воспалительных заболеваний.

Сокращения
CO: Оксид углерода
CORM-2: CO-высвобождающая молекула-2
TNF: Фактор некроза опухоли
IL: Интерлейкин
TN-C: Tenascin-C
DAMPs: Молекулярные паттерны, связанные с повреждениями : Толл-подобный рецептор.
Конфликт интересов

Конфликт интересов отсутствует.

Вклад авторов

Джамал Уддин и Чун-ши Ли внесли равный вклад в эту работу (соавторы).

Выражение признательности

Эта работа была поддержана Программой центров приоритетных исследований через Национальный исследовательский фонд Кореи (NRF), финансируемым Министерством образования (2014R1A6A1030318), и Программой развития биологических и медицинских технологий Национального исследовательского фонда (NRF) финансируется Министерством науки, ИКТ и планирования будущего (2012M3A9C3048687) и NRF-2014R1A1A2007525.

Окись углерода защищает почки через центральные циркадные часы и CD39

% PDF-1.4 % 113 0 объект > эндобдж 114 0 объект > поток doi: 10.1073 / pnas.1716747115application / pdf

  • Окись углерода защищает почки с помощью центральных циркадных часов и CD39
  • 10.1073 / pnas.1716747115 http://dx.doi.org/10.1073/pnas.17167471152018-02-15false10.1073/pnas.1716747115
  • www.pnas.org
  • www.pnas.org
  • 10.1073 / pnas.17167471152018-02-15false
  • www.pnas.org
  • 2021-06-15T20: 24: 37-07: 002021-06-15T20: 24: 37-07: 002018-02-15T00: 47: 57 + 05: 30Arbortext Advanced Print Publisher 9.1.510 / W UnicodeAcrobat Distiller 10.0.0 (Windows) uuid: 707009cd-1dd2-11b2-0a00-9b0927edca00uuid: 707009d3-1dd2-11b2-0a00-380000000000 конечный поток эндобдж 104 0 объект > эндобдж 39 0 объект > эндобдж 171 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / Properties> / Shading> / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 193 0 R / Type / Page >> эндобдж 79 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 80 0 R / Type / Page >> эндобдж 160 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 91 0 R / Type / Page >> эндобдж 172 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 180 0 R / Type / Page >> эндобдж 54 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 55 0 R / Type / Page >> эндобдж 141 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 139 0 R / Type / Page >> эндобдж 173 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 123 0 R / Type / Page >> эндобдж 33 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 34 0 R / Type / Page >> эндобдж 135 0 объект > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 101 0 R / Type / Page >> эндобдж 222 0 объект > поток HWKs8W (UY Hf; 8x & k65Lm, qLJuf} ‹@ ny» A_ «VkA

    ^ ‘; 9 ysͫWo5oO ^ M? ÁLO Cf> 4cZJbK8UPqF ߔ_ m (棱 T «HhkA2N] k>%> yDK @ ﰃ] u \ iU3-j.ҡTåYUҁ Rɪ:! B1’01 # V) {uBk;, gҁC, P 菽 {9Dq} ݢ Pa: H; ޙ1 N $ 4TƉ; XtX’5

    Воздействие изофлурана и низкого уровня окиси углерода увеличивает экспрессию miRNA, способствующую выживанию, у новорожденных. сердце мыши

  • Abu-Halima M, Poryo M, Ludwig N, Mark J, Marsollek I, Giebels C, Petersen J, Schäfers HJ, Grundmann U, Pickardt T, Keller A, Meese E, Abdul-Khaliq H (2017) Дифференциальная экспрессия микроРНК после искусственного кровообращения у детей с врожденными пороками сердца. J Transl Med 15: 117. https: // doi.org / 10.1186 / s12967-017-1213-9

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Akamatsu Y, Haga M, Tyagi S, Yamashita K, Graça-Souza AV, Ollinger R, Czismadia E, May GA, Ifedigbo E, Otterbein LE, Bach FH, Soares MP (2004), производное гемоксигеназы-1 окись углерода защищает сердца от ишемического реперфузионного повреждения, связанного с трансплантатом. FASEB J 18: 771–772. https://doi.org/10.1096/fj.03-0921fje

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Bayoumi AS, Park K, Wang Y, Teoh JP, Aonuma T, Tang Y, Su H, Weintraub NL, Kim IM (2018) Реагирующая на карведилол микроРНК miR-125b-5p защищает сердце от острого миокарда. инфаркт путем подавления проапоптотических bak1 и klf13 в кардиомиоцитах.J Mol Cell Cardiol 114: 72–82. https://doi.org/10.1016/j.yjmcc.2017.11.003

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Biggar KK, Luu BE, Wu CW, Pifferi F, Perret M, Storey KB (2018) Идентификация новых и консервативных микроРНК и их экспрессия у лемура серой мыши, Microcebus murinus , примат, способный к ежедневному оцепенению . Ген 677: 332–339. https://doi.org/10.1016/j.gene.2018.08.014

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Biggar KK, Wu CW, Storey KB (2014) Высокопроизводительная амплификация зрелых микроРНК в не охарактеризованных моделях животных с использованием полиаденилированной РНК и полимеразной цепной реакции обратной транскрипции «стебель-петля».Анальная биохимия 462: 32–34. https://doi.org/10.1016/j.ab.2014.05.032

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Chen PJ, Shang AQ, Yang JP, Wang WW (2019) Ингибирование микроРНК-874, нацеленное на STAT3, защищает сердце от ишемического реперфузионного повреждения путем ослабления апоптоза кардиомиоцитов на модели мыши. J. Cell Physiol 234: 6182–6193. https://doi.org/10.1002/jcp.27398

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Cheng Y, Mitchell-Flack MJ, Wang A, Levy RJ (2015) Окись углерода модулирует активность цитохромоксидазы и окислительный стресс в развивающемся мозге мыши во время воздействия изофлурана.Free Radic Biol Med 86: 191–199. https://doi.org/10.1016/j.freeradbiomed.2015.05.029

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Кларк Дж. Э., Нотон П., Шури С., Грин К. Дж., Джонсон Т. Р., Манн Б. Е., Форести Р., Моттерлини Р. (2003) Кардиозащитное действие водорастворимой молекулы, высвобождающей монооксид углерода. Цирк. Res 93: 1–7. https://doi.org/10.1161/01.res.0000084381.86567.08

    Статья Google Scholar

  • эль Аззузи Х, Лептидис С., Дирккс Э, Хукс Дж., Ван Бри Б., Брэнд К, Макклеллан Э.А., Поэлс Э, Слумер Дж. К., ван ден Хугенхоф ММГ, Арманд А.С., Инь Х, Лэнгли С., Бураджадж М., Olieslagers S, Krishnan J, Vooijs M, Kurihara H, Stubbs A, Pinto YM, Krek W., Mayr M, Martins PAC, Schrauwen P, de Windt LJ (2013) индуцируемый гипоксией кластер микроРНК miR-199a∼214 нацелен на PPARδ миокарда. и ухудшает окисление митохондриальных жирных кислот.Cell Metab 18: 341–354. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2013.08.009

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Fan Z-XX, Yang J (2015) Роль микроРНК в регуляции реперфузионного повреждения ишемии миокарда. Саудовская медицина, J 36: 787–793. https://doi.org/10.15537/smj.2015.7.11089

    Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Friesen RH, Henry DB (1986) Сердечно-сосудистые изменения у недоношенных новорожденных, получающих изофлуран, галотан, фентанил и кетамин.Анестезиология 64: 238–242

    CAS Статья Google Scholar

  • Фуников С.Ю., Зацепина О.Г. (2017) Регуляция активности микроРНК при стрессе. Мол биол 51: 496–505. https://doi.org/10.1134/S0026893317030050

    CAS Статья Google Scholar

  • Гао Ф, Катаока М, Лю Н, Лян Т, Хуан З.П., Гу Ф, Дин Дж, Лю Дж, Чжан Ф, Ма Цюй, Ван И, Чжан М, Ху Х, Киселович Дж, Ху Х, Пу WT, Wang J ‘, Chen J, Wang DZ (2019) Терапевтическая роль miR-19a / 19b в регенерации сердца и защите от инфаркта миокарда.Нац Коммуна 10: 1802. https://doi.org/10.1038/s41467-019-09530-1

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Gao Y, Qian J, Chen Z, Fu MQ, Xu JF, Xia Y, Ding XF, Yang XD, Cao YY, Zou YZ, Ren J, Sun AJ, Ge JB (2016) Подавление Bim с помощью микроРНК -19a может защищать кардиомиоциты от гибели клеток, вызванной гипоксией, посредством активации аутофагии. Toxicol Lett 257: 72–83. https://doi.org/10.1016/j.toxlet.2016.05.019

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Guo Y, Stein AB, Wu WJ, Tan W, Zhu X, Li QH, Dawn B, Motterlini R, Bolli R (2004) Введение молекулы, высвобождающей CO, во время реперфузии уменьшает размер инфаркта in vivo . Am J Physiol Circ Physiol 286: h2649 – h2653. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00971.2003

    CAS Статья Google Scholar

  • Hashiguchi H, Morooka H, ​​Miyoshi H, Matsumoto M, Koji T, Sumikawa K (2005) Изофлуран защищает функцию почек от ишемии и реперфузии посредством ингибирования протеинкиназ, JNK и ERK.Anesth Analg 101: 1584–1589. https://doi.org/10.1213/01.ANE.0000184044.51749.B8

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Huss MK, Chum HH, Chang AG, Jampachairsi K, Pacharinsak C (2016) Физиологические эффекты изофлурана, севофлурана и гипотермии, используемые для анестезии у новорожденных крыс (Rattus norvegicus). J Am Assoc Lab Anim Sci 55: 83–88

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Ke Z-P, Xu P, Shi Y, Gao A-M (2016) MicroRNA-93 ингибирует апоптоз кардиомиоцитов, индуцированный ишемией-реперфузией, нацеливаясь на PTEN.Oncotarget 7: 28796–28805. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8941

    Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Кевин Л.Г., Новалия Э., Стоу Д.Ф. (2005) Активные формы кислорода являются медиаторами сердечного повреждения и защиты: актуальность для анестезиологической практики. Anesth Analg 101: 1275–1287. https://doi.org/10.1213/01.ANE.0000180999.81013.D0

    Статья PubMed Google Scholar

  • Кондо-Накамура М., Синтани-Исида К., Уэмура К., Кичи Ю. (2010) Кратковременное воздействие угарного газа создает предпосылки для кардиомиогенных клеток против апоптоза при ишемии-реперфузии.Biochem Biophys Res. Commun. 393: 449–454. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2010.02.017

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Lang XE, Wang X, Zhang KR, Lv JY, Jin JH, Li QS (2013) Предварительное кондиционирование изофлураном обеспечивает кардиозащиту за счет активации ALDh3. PLoS One 8: e52469. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0052469

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Levy RJ, Herbstman JB, Bosnjak ZJ, Loepke AW, McGowan FX (2016) Биомаркеры, генетика и эпигенетические исследования для изучения нейрокогнитивных эффектов анестезии у детей.J Neurosurg Anesthesiol 28: 384–388. https://doi.org/10.1097/ANA.0000000000000351

    Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Li M, Wang N, Zhang J, He HP, Gong HQ, Zhang R, Song TF, Zhang LN, Guo ZX, Cao DS, Zhang TC (2016a) MicroRNA-29a-3p ослабляет индуцированный ET-1 гипертрофические ответы кардиомиоцитов H9c2. Gene 585: 44–50. https://doi.org/10.1016/j.gene.2016.03.015

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Li SY, Li Q, Shen JJ et al (2006) Ослабление вызванного ацетальдегидом повреждения клеток за счет сверхэкспрессии трансгена альдегиддегидрогеназы-2 (ALDh3) в сердечных миоцитах человека: роль передачи сигналов киназы MAP.J Mol Cell Cardiol 40: 283–294. https://doi.org/10.1016/j.yjmcc.2005.11.006

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Li Z, Liu L, Hou N, Song Y, An X, Zhang Y, Yang X, Wang J (2016b) У трансгенных мышей MiR-199 с губкой развивается физиологическая гипертрофия сердца. Cardiovasc Res 110: 258–267. https://doi.org/10.1093/cvr/cvw052

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Li Z, Song Y, Liu L, Hou N, An X, Zhan D, Li Y, Zhou L, Li P, Yu L, Xia J, Zhang Y, Wang J, Yang X (2017) miR- 199a нарушает аутофагию и вызывает гипертрофию сердца за счет активации mTOR.Разница в клеточной смерти 24: 1205–1213. https://doi.org/10.1038/cdd.2015.95

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Liu J-J, Zhang X, Wu X-H (2018a) miR-93 способствует росту и инвазии рака простаты за счет активации его генов-мишеней TGFBR2, ITGB8 и LATS2. Мол Тер — Онколитики 11: 14–19. https://doi.org/10.1016/j.omto.2018.08.001

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Liu K, Hao Q, Wei J, Li GH, Wu Y, Zhao YF (2018b) MicroRNA-19a / b-3p защищают сердце от патологической гипертрофии сердца, вызванной гипертензией, посредством PDE5A.J Hypertens 36: 1847–1857. https://doi.org/10.1097/HJH.0000000000001769

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Olson JM, Yan Y, Bai X, Ge ZD, Liang M, Kriegel AJ, Twaroski DM, Bosnjak ZJ (2015) Повышающая регуляция MicroRNA-21 опосредует индуцированную изофлураном защиту кардиомиоцитов. Анестезиология 122: 795–805. https://doi.org/10.1097/ALN.0000000000000567

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Pellissier F, Glogowskib CM, Heinemannb SF et al (2006) Лабораторная сборка недорогой и надежной зеленой буферной системы SYBR для количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени.Анальная биохимия 350: 310–312. https://doi.org/10.1016/j.ab.2005.12.002

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Penney DG, Howley JW (1991) Есть ли связь между воздействием угарного газа и гипертонией? Environ Health Perspect 95: 191–198. https://doi.org/10.1289/ehp.9195191

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Pravdic D, Hirata N, Barber L, Sedlic F, Bosnjak ZJ, Bienengraeber M (2012) Комплекс i и АТФ-синтаза опосредуют деполяризацию мембраны и подкисление матрикса изофлураном в митохондриях.Eur J Pharmacol 690: 149–157. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2012.07.003

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Qiao S, Olson JM, Paterson M, Yan Y, Zaja I, Liu Y, Riess ML, Kersten JR, Liang M, Warltier DC, Bosnjak ZJ, Ge ZD (2015) MicroRNA-21 опосредует кардиозащиту, индуцированную изофлураном против ишемии-реперфузионного повреждения через Akt / синтаза оксида азота / путь перехода пористой проницаемости митохондрий.Анестезиология 123: 786–798. https://doi.org/10.1097/ALN.0000000000000807

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Rech M, Kuhn AR, Lumens J, Carai P, van Leeuwen R, Verhesen W, Verjans R, Lecomte J, Liu Y, Luiken JJFP, Mohren R, Cillero-Pastor B, Heymans S, Knoops K, van Bilsen M, Schroen B (2019) Лечение AntagomiR-103 и -107 влияет на сердечную функцию и метаболизм. Mol Ther — Nucleic Acids 14: 424–437.https://doi.org/10.1016/j.omtn.2018.12.010

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Roncarati R, Viviani Anselmi C, Losi MA, Papa L, Cavarretta E, da Costa Martins P, Contaldi C, Saccani Jotti G, Franzone A, Galastri L, Latronico MVG, Imbriaco M, Esposito G, de Windt L , Betocchi S, Condorelli G (2014) Циркулирующая miR-29a, среди других активируемых микроРНК, является единственным биомаркером как гипертрофии, так и фиброза у пациентов с гипертрофической кардиомиопатией.Дж. Ам Колл Кардиол 63: 920–927. https://doi.org/10.1016/j.jacc.2013.09.041

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Samal E, Evangelista M, Galang G, Srivastava D, Zhao Y, Vedantham V (2019) Преждевременная экспрессия микроРНК-1 вызывает гипоплазию проводящей системы желудочков сердца. Front Physiol 10. https://doi.org/10.3389/fphys.2019.00235

  • Sayed D, He M, Hong C, Gao S, Rane S, Yang Z, Abdellatif M (2010) MicroRNA-21 находится ниже по течению. эффектор AKT, который опосредует его антиапоптотические эффекты посредством подавления лиганда Fas.J Biol Chem 285: 20281–20290. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.109207

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Ślusarz A, Pulakat L (2015) Две стороны miR-29. J Cardiovasc Med 16: 480–490. https://doi.org/10.2459/JCM.0000000000000246

    CAS Статья Google Scholar

  • Stein A, Guo Y, Tan W, Wu WJ, Zhu X, Li Q, Luo C, Dawn B, Johnson TR, Motterlini R, Bolli R (2005) Введение молекулы, высвобождающей CO, вызывает позднее прекондиционирование против инфаркт миокарда.J Mol Cell Cardiol 38: 127–134. https://doi.org/10.1016/j.yjmcc.2004.10.006

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Sun J, Jia Z, Li B et al (2017) MiR-19 регулирует пролиферацию и инвазию глиомы с помощью RUNX3 посредством передачи сигналов β-catenin / Tcf-4. Oncotarget 8: 110785–110796. https://doi.org/10.18632/oncotarget.22720

    Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Takeuchi J, Sakamoto A, Takizawa T (2014) Анестезия севофлураном постоянно подавляет специфические для мышц микроРНК в плазме крыс.Int J Mol Med 34: 291–298. https://doi.org/10.3892/ijmm.2014.1739

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Taylor SC, Nadeau K, Abbasi M, Lachance C, Nguyen M, Fenrich J (2019) Окончательный эксперимент qPCR: получение качественных публикаций, воспроизводимых данных в первый раз. Trends Biotechnol 37: 761–774. https://doi.org/10.1016/j.tibtech.2018.12.002

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Tutgun Onrat S, Onrat E, Ercan Onay E et al (2018) Генетическое определение дифференциации между ишемической дилатационной кардиомиопатией и идиопатической дилатационной кардиомиопатией.Genet Test Mol Biomarkers 22: 644–651. https://doi.org/10.1089/gtmb.2018.0188

    CAS Статья Google Scholar

  • Wang JX, Zhang XJ, Li Q, Wang K, Wang Y, Jiao JQ, Feng C, Teng S, Zhou LY, Gong Y, Zhou ZX, Liu J, Wang JL, Li PF (2015) MicroRNA- 103/107 регулируют запрограммированный некроз и ишемию / реперфузионное повреждение миокарда посредством нацеливания на FADD. Circ Res 117: 352–363. https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.305781

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Wang X, Ha T, Zou J, Ren D, Liu L, Zhang X, Kalbfleisch J, Gao X, Williams D, Li C (2014) MicroRNA-125b защищает от ишемии / реперфузии миокарда посредством нацеливания на p53- опосредованная апоптотическая передача сигналов и TRAF6.Cardiovasc Res 102: 385–395. https://doi.org/10.1093/cvr/cvu044

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Wu W, Zhou X, Liu P, Fei W, Li L, Yun H (2014) Изофлуран снижает апоптоз, вызванный гипоксией / реоксигенацией, и переход митохондриальной проницаемости в первичных культивируемых кардиоцитах крыс. BMC Анестезиол 14:14. https://doi.org/10.1186/1471-2253-14-17

    CAS Статья Google Scholar

  • Яо Й, Ян Н., Хань Д., Ни С, Ву С., Го Х (2018) Влияние анестезии пропофолом и этимидатом на экспрессию кардиоваскулярной миРНК: разные профили? BMC Анестезиол 18: 149.https://doi.org/10.1186/s12871-018-0610-9

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Чжан Дж., Стори КБ (2016) RBioplot: простой в использовании конвейер R для автоматического статистического анализа и визуализации данных в молекулярной биологии и биохимии. PeerJ 4: e2436. https://doi.org/10.7717/peerj.2436

    Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Zhao Y, Ransom JF, Li A, Vedantham V, von Drehle M, Muth AN, Tsuchihashi T, McManus MT, Schwartz RJ, Srivastava D (2007) Нарушение регуляции кардиогенеза, сердечной проводимости и клеточного цикла у мышей, лишенных miRNA-1-2.Ячейка 129: 303–317. https://doi.org/10.1016/j.cell.2007.03.030

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Zhu H, Fan GC (2012) Роль микроРНК в реперфузированном миокарде в постинфарктном ремоделировании. Cardiovasc Res 94: 284–292. https://doi.org/10.1093/cvr/cvr291

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Zou M, Wang F, Gao R, Wu J, Ou Y, Chen X, Wang T, Zhou X, Zhu W, Li P, Qi LW, Jiang T, Wang W, Li C, Chen J, He Q, Chen Y (2016) Ингибирование аутофагии hsa-miR-19a-3p / 19b-3p путем нацеливания на TGF-βR II во время индуцированного TGF-β1 фиброгенеза в сердечных фибробластах человека.Sci Rep 6: 24747. https://doi.org/10.1038/srep24747

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Zuckerbraun BS, Chin BY, Bilban M, d’Avila JC, Rao J, Billiar TR, Otterbein LE (2007) Сигналы окиси углерода посредством ингибирования цитохром-с-оксидазы и генерации митохондриальных активных форм кислорода. FASEB J 21: 1099–1106. https://doi.org/10.1096/fj.06-6644com

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Механизм биосинтеза окиси углерода, необходимый для проявления активности металлофермента (пресс-релиз) — SPring-8 Web Site

    Дата выпуска
    07 ноя, 2019

    Четверг 7 ноября 2019
    Институт молекулярных наук

    Исследовательская группа, включающая исследователей из Национального института естественных наук (ExCELLS / IMS) и Университета Осаки, раскрыла подробный механизм биосинтеза монооксида углерода, необходимого для созревания единицы, ответственной за активность гидрогеназы.

    Результаты были опубликованы в журнале Communications Biology (Nature Research).

    Журнал Статья
    Название : Структурная характеристика HypX, ответственного за биосинтез CO при созревании NiFe-гидрогеназы
    Авторы: Норифуми Мураки, Кентаро Исии, Сусуму Учияма, Сатору Г. Ито, Хисаши Окумура, Сигетоши Аоно
    Журнал № Биология коммуникации (18 октября 2019 г., онлайн)
    DOI : 10.1038 / s42003-019-0631-z

    Фон
    Гидрогеназа, которая представляет собой металлофермент, ответственный за окисление газообразного водорода и восстановление протонов, играет ключевую роль в метаболизме водорода у бактерий. Основываясь на различиях в содержании металлов в активном центре, их классифицируют на три группы; FeFe-, NiFe- и Fe-гидрогеназы, содержащие различные комплексы металлов в качестве активных центров этих ферментов (рис. 1). Хотя структуры активных центров в этих трех ферментах различаются, для активности гидрогеназы важно, чтобы оксид углерода (CO) координировался с ионом железа в активном центре.Известно, что CO был синтезирован ферментативной реакцией, но детали биосинтеза CO были неизвестны.

    Рис. 1. Структура активных центров в [NiFe] -гидрогеназе, [FeFe] -гидрогеназе и [Fe] -гидрогеназе

    Результат
    В этом исследовании исследовательская группа определила кристаллическую структуру фермента (HypX), ответственного за биосинтез CO, в котором используется NiFe-гидрогеназа, и обнаружила, что HypX производит CO в результате беспрецедентной реакции (рис. 2).HypX состоит из двух доменов; N-концевой и C-концевой домен. Непрерывная полость, соединяющая N- и C-концевые домены, присутствует внутри HypX (рис. 2). В кристаллической структуре кофермент A (CoA) связан в C-концевой области полости.

    Рисунок 2. Кристаллическая структура HypX N- и C-концевые домены показаны синим и зеленым соответственно. Полость сбоку HypX показана серой сеткой.

    Две разные реакции происходят в N- и C-концевом домене соответственно.В N-концевом домене происходит реакция переноса формильной группы от формилтетрагидрофолата, который связан в N-концевой области полости в качестве субстрата для CoA (стадия реакции 1 на фиг. 3). В это время КоА в полости принимает линейную протяженную конформацию, а SH-группа КоА расположена на стороне формильной группы в формилтетрагидрофолате, связанном с N-концевым доменом. Затем формил-КоА образуется в качестве промежуточного продукта реакции в реакции переноса формильной группы от формилтетрагидрофолата к КоА.Затем формил-КоА претерпевает большие конформационные изменения в полости, так что формильная группа в концевой части формил-КоА располагается в активном центре в С-концевом домене HypX (стадия реакции 2 на фиг. 3). В C-концевом домене CO и CoA образуются декарбонилированием формил-CoA (стадия реакции 3 на фиг. 3).

    Рисунок 3. Схема реакции биосинтеза CO с помощью HypX N- и C-концевые домены показаны синим и зеленым соответственно. Формильная группа (CHO) показана красным.

    В этом исследовании мы выявили беспрецедентную реакцию синтеза CO. КоА хорошо известен как кофермент, который играет важную роль в метаболизме жирных кислот и энергетическом метаболизме клеток в цикле лимонной кислоты. Однако никогда не сообщалось, что КоА (формил-КоА) участвует в реакциях биосинтеза СО. Это исследование прояснило новую физиологическую функцию хорошо известного кофермента КоА.

    Перспективы на будущее
    В биосинтетическом механизме металлофермента еще много неясных моментов.Остается выяснить, как именно был собран сложный металлсодержащий активный центр металлофермента. В этой работе мы определили первую кристаллическую структуру фермента, который катализирует реакцию биосинтеза монооксида углерода, необходимую для построения активного центра [NiFe] гидрогеназы. В будущем мы продолжим исследования для выяснения детального механизма всего пути созревания гидрогеназы на основе этого результата.

    Финансирование
    Грант на научные исследования (B) 17H03093 Совместные исследования Центра поисковых исследований жизни и живых систем (ExCELLS).



    Контакты
    Сигетоши Аоно
    Центр поисковых исследований жизни и живых систем (ExCELLS) /
    Институт молекулярных наук, Естественные институты естественных наук
    ТЕЛ: + 81-564-59-5575 / ФАКС: + 81-564-59-5576
    Эл. Почта: aonoims.ac.jp

    Отравление угарным газом | Ход

    Ежегодно отравление угарным газом (CO) является причиной около 4000 обращений в отделения экстренной помощи и около 30 смертей.Воздействие CO может привести к аноксическому поражению мозга, и в этом разделе объясняется, что такое отравление CO, его симптомы, лечение и способы его предотвращения. Список дополнительных полезных ресурсов представлен на странице «Полезные ссылки».

    Купите сигнализатор угарного газа в магазине Safelincs Headway. Headway получает 2 фунта стерлингов за каждую проданную сигнализацию.

    Все используемые технические термины выделены жирным шрифтом и объяснены на странице глоссария общих терминов, связанных с травмами головного мозга.

    В разделе:

    Что такое окись углерода (СО)?

    CO — это газ без цвета и запаха, поэтому его присутствие трудно обнаружить.Он образуется при сжигании бытового топлива, такого как газ, уголь, древесина и древесный уголь, а также в бензиновых двигателях. Когда топливо горит в закрытом помещении, кислород в помещении постепенно расходуется и заменяется углекислым газом. Если в воздухе накапливается углекислый газ, топливо не сгорает полностью и вместо этого начинает выделять окись углерода.

    Как возникает отравление угарным газом (CO)?

    CO настолько опасен, потому что он очень плотно связывается с гемоглобином в красных кровяных тельцах и, таким образом, снижает количество кислорода, который может переноситься в кровоток.Гемоглобин — это молекула в крови, с которой связывается кислород, чтобы переноситься по всему телу. Связывание CO с гемоглобином на самом деле более чем в 200 раз сильнее, чем с кислородом, поэтому CO эффективно занимает все пространство гемоглобина. Кроме того, CO препятствует доставке кислорода из гемоглобина в ткани организма.

    Эти эффекты серьезно снижают способность крови переносить кислород и ограничивают доступ кислорода к телу, при этом мозг и сердце особенно уязвимы.Это может привести к аноксической травме головного мозга. Беременные женщины и плод особенно чувствительны к токсическому воздействию CO.

    Каковы симптомы отравления угарным газом?

    При остром отравлении оксидом углерода (CO) (быстрое начало, с кратковременным воздействием) симптомы будут зависеть от степени воздействия:

    мягкий

    Головная боль, тошнота и рвота — признаки умеренного воздействия CO, часто вместе с общим недомоганием. Эти неспецифические симптомы могут быть ошибочно признаны более распространенными заболеваниями, такими как грипп, гастроэнтерит или пищевое отравление.Это может привести к тому, что отравление CO не будет замечено изначально, если нет четкого анамнеза воздействия.

    Умеренный

    По мере того, как степень отравления угарным газом становится более выраженной, может возникать общее чувство слабости с головокружением, неустойчивостью и проблемами с концентрацией и мышлением. Более очевидные изменения в поведении, спутанность сознания и сонливость, могут быть одышка и боли в груди.

    Тяжелая

    При тяжелом воздействии CO может довольно быстро наступить серьезное ухудшение с судорогами, комой и смертью.МРТ может показать изменения в базальных ганглиях и белом веществе .

    Каковы долгосрочные последствия отравления угарным газом?

    Как и другие виды аноксических травм головного мозга, острое отравление угарным газом может привести к довольно серьезным долговременным неврологическим проблемам с нарушениями памяти, языка, познания, настроения и поведения. Повреждение базальных ганглиев, которое является характерным признаком отравления угарным газом, может привести к двигательному расстройству, напоминающему болезнь Паркинсона.

    Необычной особенностью острого отравления угарным газом является замедленное ухудшение неврологического состояния, которое может наблюдаться в некоторых случаях и происходить от нескольких дней до пяти-шести недель после первоначального воздействия. Причина этого не совсем ясна, но, похоже, замешаны изменения в белом веществе. Было высказано предположение, что они могут быть результатом демиелинизации , при которой происходит потеря жировой изолирующей миелиновой оболочки нервных аксонов, что снижает их способность проводить электрические нервные импульсы.

    Хроническое воздействие окиси углерода (CO)

    Хроническое (постоянное и долгосрочное) воздействие более низких уровней CO, как это может происходить с неисправными бытовыми котлами, может остаться незамеченным. Симптомы включают более легкие версии тех, которые наблюдаются при остром отравлении CO, с головной болью, тошнотой, головокружением, головокружением, усталостью и сонливостью, проблемами с концентрацией внимания и проблемами памяти, а также изменениями настроения.

    Люди могут осознавать, что что-то не так, но быть не в состоянии точно определить, в чем проблема, или могут приписывать проблемы переутомлению, стрессу или депрессии.Если симптомы исчезают во время отсутствия на работе, появляются снова по возвращении домой или если у других людей в том же помещении появляются аналогичные симптомы, может стать более очевидным, что существует экологическая причина.

    Хотя кажется, что большинство людей выздоравливают после хронического воздействия низкого уровня CO при удалении источника, это может привести к аноксической травме мозга. Было зарегистрировано несколько задокументированных случаев тонких аномалий магнитно-резонансной томографии (МРТ) и долгосрочных нейропсихологических эффектов.

    Как лечится отравление угарным газом (CO)?

    Лечение острого воздействия CO включает немедленное удаление из источника отравления и введение 100% кислорода вместе с общей поддерживающей медицинской помощью.

    Гипербарическая оксигенотерапия иногда рекомендуется при тяжелых случаях отравления угарным газом и включает подачу чистого кислорода при повышенном давлении в барокамере. Было высказано предположение, что это может улучшить отдаленный неврологический результат, хотя это остается спорным. Гипербарическая оксигенотерапия — это специализированная методика, доступная лишь в нескольких центрах. Он также может быть связан с собственными осложнениями и обычно не используется.

    Как предотвратить отравление угарным газом?

    Сигнализаторы угарного газа

    Сигнализация угарного газа — отличный способ обнаружить высокий уровень окиси углерода и принять немедленные меры.

    Headway объединилась с розничным продавцом продуктов пожарной безопасности Safelincs для продажи сигнализаторов угарного газа. Покупатели могут выбрать одну из четырех моделей по разным ценам, гарантируя, что есть что-то доступное для любого бюджета.

    Купите сигнализатор угарного газа в магазине Safelincs Headway.

    Headway получает 2 фунта стерлингов за каждую проданную сигнализацию.

    Что можно и чего нельзя

    • Не использовать приборы, работающие на газе или другом ископаемом топливе, в плохом состоянии
    • Запрещается сжигать древесный уголь в закрытых помещениях
    • Не использовать двигатели с бензиновым двигателем в помещении или в закрытых помещениях
    • запрещается устанавливать, переоборудовать или обслуживать топливные устройства без надлежащего опыта
    • Не использовать газовые приборы , если они создают желтое пламя и осаждают сажу на стенах
    • Не использовать неоткрытые приборы в небольших закрытых помещениях
    • Не использовать газовые плиты для обогрева помещений
    • Не спать в спальне с парафиновым обогревателем или негорючим газовым камином
    • Do нанимает квалифицированного, уважаемого и зарегистрированного инженера для работы со всеми топливными приборами
    • Do нанимает квалифицированного инженера, зарегистрированного в Регистре газовой безопасности (ранее CORGI), для работы с газовыми приборами
    • У должна быть регулярная проверка топливных приборов квалифицированным инженером
    • Подходит ли к датчику угарного газа, соответствующему британским или европейским стандартам
    • Выполните , убедитесь, что дымоходы и дымоходы чистые и не забиты
    • Do убедитесь, что все комнаты хорошо вентилируются, когда используется прибор
    • Установите ли вытяжной вентилятор на вашу кухню

    Гипоксическая и аноксическая травма головного мозга

    Если подача кислорода прерывается, функционирование мозга немедленно нарушается, и вскоре может последовать необратимый ущерб.

    Узнать больше

    Телефон доверия

    Горячая линия Headway — это бесплатная конфиденциальная служба, доступная всем, у кого есть вопрос о черепно-мозговой травме — от выживших и опекунов до студентов и профессионалов.

    Узнать больше

    CO и CO2 — в чем разница?

    CO и CO2 — В чем разница?

    CO — оксид углерода и CO2 — диоксид углерода часто путают. Хотя названия кажутся похожими, это совершенно разные газы с совершенно разным составом.Хотя оба газа являются бесцветными, без запаха и вкуса, и в их названии есть слово «углерод», они не совпадают. Самая большая разница в том, что CO2 — это обычный природный газ, который ежедневно обнаруживается в результате разложения растений и животных, а также в результате геотермической активности. CO не является обычным явлением. Это побочный продукт сжигания ископаемого топлива, такого как нефть, уголь и газ

    СМИ часто добавляют путаницы, потому что их неспособность различать два газа усугубляет проблему. Существует множество историй о травмах или смертельных случаях в результате отравления углекислым газом, когда газовый генератор запускается внутри дома во время стихийных бедствий, таких как ураганы.В последние десятилетия повышенное внимание к выбросам парниковых газов привело к повышению осведомленности о CO2, особенно от автомобилей. Эта путаница часто может быть слишком сильной, заставляя некоторых вообще избавляться от газов и проблем, которые они вызывают.

    Полезно понять сходства и различия между CO и CO2:

    Об окиси углерода

    • CO почти полностью является искусственным газом, который обычно не встречается в атмосфере Земли.
    • CO образуется на опасном уровне в результате сжигания без кислорода в неправильно вентилируемых устройствах для сжигания топлива, таких как генераторы, нефтегазовые печи, газовые водонагреватели, газовые печи, газовые или керосиновые обогреватели, камины и печи
    • Самые высокие выбросы CO на опасных уровнях производятся двигателями внутреннего сгорания
    • CO может быть горючим газом в более высоких концентрациях (иногда его называют средой C1D1 или C2D2), и устройства для измерения оксида углерода в этих концентрациях обычно проектируются как взрывобезопасные.

    • CO — самый распространенный вид смертельного отравления в мире

    Рекомендуемые уровни CO

    • 0,1 ppm — текущий средний уровень CO на планете
    • OSHA ограничивает уровни долгосрочного воздействия на рабочем месте до 50 ppm (частей на миллион)
    • Симптомы легкого отравления CO включают головные боли, головокружение и сильную рвоту при концентрациях менее 100 частей на миллион
    • Концентрация до 700 ppm может быть опасной для жизни

    О двуокиси углерода

    • CO2 — обычный газ в атмосфере, необходимый для жизнедеятельности растений
    • CO2 — это естественный побочный продукт дыхания человека и животных, ферментации, химических реакций и разложения растений и животных.
    • Содержание газа обычно составляет примерно 400 ppm (частей на миллион).
    • CO2 негорюч, не взрывоопасен
    • отравление СО2 встречается редко; однако аквалангисты должны остерегаться этого (поворотов)
    • Утечки из баллонов с CO2 под давлением в закрытых помещениях могут быть опасны для пассажиров — как из-за высокого уровня CO2, так и из-за низкого уровня кислорода (вытеснение O2 / удушье)

    Рекомендуемые уровни CO2

    • 410ppm — текущий средний уровень CO2 на планете
    • ASHRAE рекомендует предельное значение 1000 ppm для офисных зданий и учебных классов для обеспечения общего состояния здоровья и производительности
    • OSHA ограничивает уровни воздействия на рабочем месте до 5000 ppm, взвешенных по времени (более 8 часов)
    • Сонливость может возникать при 10 000 частей на миллион (1%) — часто встречается в закрытых автомобилях или аудиториях
    • Симптомы легкого отравления CO2 включают головные боли и головокружение при концентрациях менее 30 000 ppm (3%)
    • При 40 000 ppm (4%) CO2 может быть опасным для жизни

    В чем сходство и различие между CO и CO2?

    • Углерод и кислород вместе образуют оба газа
    • Оба продукта без цвета, вкуса и запаха
    • Оба находятся в воздухе во всем мире (хотя и в разной концентрации)
    • Оба высвобождаются при возгорании или пожаре
    • Оба потенциально смертельны
    • Молекулярная масса CO составляет 28.01, где молекулярный вес CO2 равен 44,1. Это означает, что газ CO2 намного плотнее, чем CO.
    • CO2 будет собираться около уровня пола, а CO — ближе к потолку.
    • OSHA перечисляет уровни опасности для CO, начиная с 35 ppm, и для CO2, начиная со среднего взвешенного по времени 5000 ppm. Это совершенно разные уровни.

    Понимание PPM — частей на миллион

    Концентрации газа измеряются в частях на миллион (ppm или ppmv).

    Диапазон концентраций от 0 до 1 000 000. Вот почему мы называем это частями на МИЛЛИОН. Каждые 10 000 частей на миллион соответствует концентрации 1%. Например, вместо «1% газа по объему» ученые скажут «10 000 ppmv» (10 000/1 000 000 = 1%) или сократят его до «10 000 ppm».

    Например, легче написать, что уровень CO2 в комнате повысился с 400 ppm до 859 ppm, чем написать, что уровень CO2 увеличился с 0,04% до 0,0859%. Однако оба верны. При измерении с большим объемом может быть проще написать 5% против 50 000 ppm.

    Подробнее о миллионных долях читайте здесь.

    Как монооксид и диоксид получили свои названия

    Вы можете поблагодарить древних греков за то, что они дали нам их названия в виде цифр:

    • моно = 1
    • ди = 2
    • три = 3
    • тетра = 4
    • пента = 5
    • гекса = 6
    • гепта = 7
    • окта = 8
    • эннеа = 9
    • дека = 10

    Так мы получаем английские слова, такие как tri angle (3 стороны), US Penta gon (5-стороннее здание) или deca thlon (10 соревнований).Таким образом, первая половина оксида ди означает 1 атом кислорода, а первая половина оксида ди означает 2 атома кислорода.

    Для второй половины каждого слова у нас оксид . Оксид — это название простого соединения кислорода с другим элементом или группой. Например, добавив кислород к элементу водород, вы получите водород ди , оксид (h30) или воду. Другие оксиды, о которых вы, возможно, слышали, — это закись азота (NO2 — веселящий газ) или оксид цинка (ZnO — активный ингредиент солнцезащитного крема).

    В заключение, независимо от того, в какой отрасли вы работаете, утечки и чрезмерное воздействие обоих газов могут происходить вокруг вас каждый день. Недавно получившие широкую огласку смертельные случаи с участием как CO2, так и CO переориентировали внимание на необходимость точного и эффективного обнаружения и контроля наличия газов.

    Понимание газов и способность предотвратить возможные травмы и опасность — лучший первый превентивный шаг, который вы можете предпринять.

    Для получения дополнительной информации о решениях CO или CO2, пожалуйста, свяжитесь с нашим техническим отделом продаж.Мы будем более чем счастливы помочь вам и рассказать о различиях между газами, о том, что делает их опасными, и какие устройства могут лучше помочь в устранении возможных травм.

    Источник: Википедия

    .

    Post A Comment

    Ваш адрес email не будет опубликован.