Посланница судьбы 2 часть: Книги из серии «Авантюристка» — читать онлайн, скачать в FB2, EPUB, TXT

Содержание

Читать Посланница судьбы онлайн (полностью и бесплатно)

Абдулаева Сахиба

Посланница судьбы

Севинч больше нет…

Похоже, я потеряла ее. Куда я не ходила, в какие только двери не стучалась в поисках Севинч. Целую неделю прожила в тревоге и беспокойстве.

Неужели ее и в самом деле больше нет?..

С уходом Севинч меня покинули радость, удача, везение. Я чувствую себя такой беспомощной, такой жалкой, словно упустила птицу счастья. А мне нужно поделиться своими печалями — иначе тяжело. Где же ты, Севинч? Где?..

У нее были голубые глаза, каштановые волосы.

Нежная кожа розовела, как цветы персика, а проступающие на щеках веснушки ей очень шли. Никогда не забуду своей первой встречи с этой высокой, стройной девушкой…

В тот день я заработалась, и, когда в спешке собиралась пойти пообедать, кто-то робко постучал в дверь комнаты.

— Входите, открыто! — крикнула я, собирая на столе бумаги.

— Здравствуйте! Я пришла познакомиться с вами, — сказала с порога миловидная девушка, мягко улыбаясь.

 — Меня зовут Севинч.

Вот как? Севинч?[1] Редкое, однако, по нынешним временам имя…

— Вам оно очень подходит, — сказала я девушке, любуясь ямочками на ее щеках.

— Вы так думаете? — спросила Севинч и рассмеялась.

— А меня зовут…

— Знаю, знаю, Замира Юлдашевна. Мне очень нравятся ваши стихи, перебила она меня немнош восторженно.

— Ах, оставьте, я пишу просто из интереса. А моя основная работа, как видите, здесь, в вычислительном центре. А вы что, тоже пишете стихи?

Севинч не спешила с ответом. Она на миг задумалась и перевела разговор на другое:

— Вы собирались на обед? Давайте поговорим по дороге…

На улице стояла чудесная погода. От свежего весеннего воздуха у меня даже перехватило дыхание.

Голубое небо, нежная зелень первых листьев радовали глаз, празднично и весело было на душе. Только эта удивительная красота почему-то не трогала Севинч.

Девушка шла и, потупившись, говорила мне задумчиво:

— Знаете, с некоторых пор я совершенно не могу читать ваши стихи…

Я удивленно посмотрела на нее. Прочитав в моих глазах недоумение, Севинч отвела взгляд и продолжала:

— Ваши душевные переживания очень мне близки. И слишком меня будоражат… Мне кажется, вашей рукой водят духи…

Она взглянула на меня, будто провинившийся ребенок, совершивший нечто непозволительное, и опять замолчала.

Почему-то у меня по телу пробежала дрожь. Духи?

Какие духи? А кто сама эта девушка? Почему она разыскала меня?.. Чтобы не выдать своего волнения, я сказали, напустив на себя равнодушие:

— А я до сих пор полагала, что пишу сама и не знала, что меня кто-то заставляет это делать…

Севинч замедлила ход и торжественно заговорила:

— Сегодня ночью подольше смотрите на звезды. Когда самое яркое светило будет в зените, вам покажется, что маленькая и неяркая звездочка рядом с ним подмигнет вам. Некоторое время не отрывайте от нее взгляда. И вы почувствуете, как в вашей душе родятся, удивительные грезы. Вам захочется немедленно сесть за стол и писать, писать. Однако вы не сможете сделать и шагу.

Звезда же, переливаясь, по-прежнему будет манить к себе. И только, когда вы впитаете достаточный заряд духовной энергии, вы сможете выйти из этого — состояния. Но вам сразу же захочется спать. Перед вашими глазами возникнут видения: тихо заплещется море, колыхая на себе яркий корабль; или же пассажирский поезд равномерным перестуком колес будет погружать вас в сладостный сон. Вот тогда-то вы и должны собрать всю волю и, повторяя движения кошки, стряхивающей с себя воду, заставить тело бодрствовать и изгнать вселившихся в вас духов… И вы сегодня же, вот увидите, напишете замечательную поэму, — закончила Севинч.

— Какие странные вещи вы говорите! Вы — ясновидящая? — спросила я, не скрывая изумления.

— Я муза вдохновения, — засмеялась она. — Простите, что взялась вас поучать…

Необычная девушка пришлась мне по душе. Она не рассказывала о себе много, но кое-что я о ней все-таки узнала. Севинч училась на последнем курсе университета. Выросла она в кишлаке, но город уже успел наложить отпечаток на ее манеру держаться, причесываться, одеваться. У нее была модная прическа, платье — импортное, из великолепной блестящей ткани.

После обеда мы вышли на улицу, и Севинч, прощаясь, как бы между прочим предрекла мне:

— За неделю вы напишете поэму. В ней речь пойдет о долине духов. Это произойдет потому, что вы… вы вступите в контакт с духами…

— Севинч, что вы такое говорите?! — поразилась я. — Я никогда не верила ни в каких духов.

— Они будут водить вашей рукой, — веско сказала Севинч. — Вы собственными глазами увидите духов, которые проводят тягостные дни в этой долине. Возможно, вы встретите среди них своих знакомых. Возможно — нет. В любом случае — не пугайтесь: духи ничего плохого вам не сделают… Не верите?.. — укоризненно произнесла она, прочитав в моих глазах сомнение. Тогда я вам кое-что продемонстрирую. Идемте…

Мы присели на небольшую скамейку под ветвистым деревом. Вокруг не было ни души. Севинч пронзительно посмотрела на меня, и я почувствовала слабость во всем теле.

— Закройте глаза! — приказала она.

Я выполнила ее приказание, и мне показалось, что я нахожусь в скоплении красных облаков. Глаза мне слепила какая-то яркая точка, по телу прошла горячая волна, и я перестала его чувствовать вовсе.

— Что вы видите, где находитесь?..

Я не сомневалась, что говорила Севинч. Только я все время поднималась в бескрайнее небо, а голос Севинч раздавался с Земли. Думая о том, что бы ей ответить, я стала внимательно осматриваться по сторонам.

Снежные ущелья. Все вокруг белым-бело. Только я совсем не мерзла. Наоборот, приятная прохлада овевала меня… Мой взгляд случайно упал на людей, одетых в белые одежды. Женщина, чьи золотые волосы переливались в лучах солнца, сделала мне знак рукой.

У нее были огромные голубые глаза, густые и длинные ресницы. На одной щеке, словно звездочка, сверкала родинка. А может, это была вовсе не родинка, а… еще один глаз. Белоснежное платье женщины, казалось, было засыпано снегом. Крылья трепетали за ее спиной.

Женщина плавно приблизилась к большому водопаду.

Полюбовавшись им, она пошла вдоль берега реки.

Вода в реке была настолько прозрачной, что сквозь нее свободно просвечивали водоросли, облепившие большие валуны на дне речушки. Невдалеке лежал валун, немного похожий на трон. Женщина опустилась на него и, видимо, предалась мечтам: иногда она счастливо улыбалась. Неожиданно, будто услышав чей-то зов, она стала с тревогой осматриваться по сторонам…

— Откройте глаза! Откройте же глаза!..

Когда я, вздрогнув, пришла в себя, передо мной стояла улыбающаяся Севинч.

— Ну, как?..

— О, у вас, оказывается, экстрасенсорные способности, Севинч. У меня были такие диковинные видения…

— Вы побывали на планете, где жил ваш первичный дух. Впрочем, вы давно успели забыть свою связь с ней. Как не можете теперь и вспомнить, что присутствовали при зарождении жизни на Земле… Ничего удивительного. Подобно большинству людей двадцатого века вы погрязли в каких-то мелочных заботах, и даже не подозреваете о том, что ваш долг — размышлять о Вселенной, о той пользе, которую вы можете принести человечеству, о судьбах вашей цивилизации…

— Севинч, кто же вы? Неужели нельзя сказать об этом открыто?. . И что вы имеете в виду?..

— Придет срок — и вы сами все поймете. На сегодня же достаточно. До свидания…

Иногда Севинч оставалась у нас ночевать. Такие вечера были праздником для моих детей, они не могли их дождаться. Дети просили рассказать что-нибудь удивительное из жизни других планет. Севинч рассказывала эти волшебные истории вдохновенно, закрыв глаза.

Мой сотрудник Азимжон очень заинтересовался девушкой. Они подолгу беседовали, а потом трижды Севинч даже ходила к нему на свидание. Но когда однажды Азимжон завел речь о свадьбе, Севинч перевела разговор на другую тему…

На днях в комнату вошел печальный Азимжон и, горестно вздохнув, тихо сказал:

— Севинч сошла с ума. И уехала в родной кишлак.

— Не может быть! — всполошилась я. — Как же так? Вы ее видели перед отъездом?

— Видел, пытался говорить — она меня совершенно не узнает. Замира-апа, немного помолчав, задумчиво обратился ко мне Азимжон, — я случайно познакомился с подругой Севинч. Она знает, как доехать до кишлака Севинч. Может, поедем вместе?..

Предложение застало меня врасплох. Честно говоря, времени на поездку у меня не было: требовалось мое участие в мушоире[2] на телевидении. А в издательстве меня ждала корректура моей последней книги. Но совесть не позволила мне отклонить предложение Азимжона.

«Разве не достигла ты признания благодаря Севинч? — напоминала совесть. — Ведь не повстречай ты ее, и столь значительных перемен в твоей судьбе никогда бы не произошло… Ты поэтесса. Твое имя у всех на устах. За какой-то год ты стала известна всей республике. А благодаря кому?..»

Фрэнк Герберт — отзывы на произведения

Всегда боюсь приниматься за чтение классики фантастики/фэнтези, потому что боюсь разочароваться, как например с Хрониками Амбера, где я просто ожидал большего.

Дюна написана таким языком и подана таким образом, что иногда бывает немного трудно понять некоторые посылы и детали, особенно это касается силы предвидения и всяких учений/религий, древних предсказаний. Автор явно пытался объясняя, запутать все еще больше.

Даже если отбросить возможность плавать по пескам, непонятно, как у червей могут быть «чешуйки», цепляясь за которые, их может оттянуть обычный человек, заставляя Червя перевернуться, чтобы песок не попал на чувствительный участок. Песок так или иначе должен был попасть внутрь, такое огромное создание даже не почувствовало бы человека и отслоившийся маленький участок брони.

Зато понравились хорошо прописанные персонажи, их можно отличить друг от друга, что, несомненно, радует. Харконнены типичные стандартные злодеи истории, Владимир это показывает всем своим видом, особо даже не скрываясь. Для 1965 года подобное, думаю, не было чем-то слишком примитивным. Да и Владимир так рьяно презирал фрименов, этих дикарей, что не видел их силу и игнорировал все звоночки, что они не так просты, а осознал слишком поздно. Жаль только, что не Раббана, не Фейд-Рауту почти не раскрыли, про первого так вообще просто сказали, что он тиран и выжимал из планеты все соки, народ его ненавидел, но это так и не было показано прямо, просто автор поставил нас перед фактом. Он плохой — ненавидьте его!

Когда Пауль с матерью оказываются в пустыне, в пещере они натыкаются на фрименов, и те сразу собираются забрать их воду, хотя вроде они как раз и ищут мальчика с женщиной, но некоторые почему-то уверены, что это не те. Ну да, ведь посреди пустыни бродит полно женщин с подростками без специальных костюмов. В итоге они доказывают, что они те самые, но один особо умный отчего-то все равно не верит, и в итоге погибает в схватке за свою глупость.

Позже Пауль впадает в кому, якобы отравленный, и странно, что никто не понял произошедшее, ибо трудно не заметить, что один из червей утоплен. Одна только Чани догадывается, что сделал Муаддиб.

Кинес перед смертью видит в глюках своего отца, который рассказывает про экологию, объясняет про образующийся под ним пузырь, про связь червей и меланжи, задается разными вопросами и отвечает на них. Это выглядит несколько нелепо, для кого это все говорится? Чисто для читателей, чтобы мы кое-что поняли. Видимо, Герберт не придумал, как иначе рассказать об особенностях Дюны, лаконично вплетая информацию в сюжет. Это подтверждают и Приложения, которые похожи на выжимки из учебника, а не беллетристику. Особенно не понравилось в Приложениях история отца Кинеса. Возможно, я невнимательно читал, но мне казалось, что фримены сотни лет пытаются превратить Дюну в цветущий сад, а оказывается, что начал это отец Кинеса, т.е. с начала прошло лет 60-70, уже не так впечатляет.

Топтеры отправились в глубокую пустыню и похитили Алию, хотя не раз говорилось, что так далеко залетать невероятно опасно, при этом отправилось всего 4 топтера, вернулся 1, остальные подбиты фрименами (точнее, стариками, женщинами и детьми, охранять их мужики, видимо, не захотели), других проблем не было: ни червей, ни песчаных бурь. Так почему опасно-то?

Итого: 8-/10 — красивая и продуманная история, видно, что автор потратил громадное количество времени, чтобы собрать информацию и гармонично вплести ее в свою историю, частично отсылающую на реальный мир с его войной за ресурсы. Но автор так сильно углубился в вопросы экономики, экологии и человеческой природы, что упустил несколько деталей на самом виду, о которых написано выше.

Это фантастика с элементами фэнтези, нечто вроде Звездных Войн, которые явно черпали идеи из этих книг, только Лукас верно посчитал, что большое количество разговоров и мыслей, преимущественная неспешность повествования и минимум экшна на экране воплотить будет не то чтобы сложно, просто подобное не зайдет любителям поп-корна. Это подтверждает провал фильма 1984 года (хоть он и стал культовым) и не шибко популярный сериал.

Для фантастики атмосфера Дюны также очень необычна. Нет ни чистеньких комнат из белого псевдо-пластика, ни роботов с супер-компьютерами, есть песок, жара, обычная одежда, дома из камня, а люди сражаются в рукопашном бою, устраивают штурмы и тому подобное. Нет журнального лоска и прилизанности, скорее, это пергамент, в лучшем случае сморщенная от солнца старая кожа. Все эти пророки, верования, джихады и тому подобное делают мир Дюна максимально приближенным к нашей реальности, так называемое ржавое будущее, или, скорее запыленное, все другое — утопия. Дюна не антиутопия, но всю книгу складывается чувство, что вот-вот, и она наступит, а вскоре родится и Безумный Макс.

И все же назвать Дюну шедевром у меня язык не поворачивается, почитать точно стоит хотя бы для общего ознакомления и погружения в атмосферу жаркой пустыни и интриг. Несомненною, Фрэнк Герберт проделал огромную работу, создавая сей мир, что в наше время можно увидеть не так часто.

7300 слов — karga_golan — LiveJournal

Посмотрев спектакль «Одна с половиной история» в театре «Маленький», я попросила режиссера спектакля Мишу Теплицкого прислать мне текст пьесы. В тексте – 7300 слов. 7300 слов боли, отчаяния, исповеди, грусти, непонимания, неприятия и желания рассказать, чтобы забыть. И рассказать, чтобы помнить, чтобы донести, чтобы узнали. Узнали то, о чем и так, казалось бы, знали. Но для многих это было слабое, поверхностное знание – «не до знания – недо знание – недознание – не до этого».

Что-то слышали, что-то говорили приятели приятелей, дети упоминали о школьных передрягах, уровень агрессии зашкаливал – но где-то там, не в нашем дворе,  этого не хотелось замечать,  не все хотели это знать. Мы были заняты выживанием, работой, карьерой, деньгами, жильем. Да, конечно, и детьми. Но сначала надо было их накормить и одеть, а потом уже успокоить и поговорить – если у самих были на это силы и время. А сейчас – в достигнутом благополучии – кому хочется вспоминать, что было, стоит ли перематывать пленку? Зачем бередить былое – ведь нам же классики велели не оглядываться, с детства со страниц книг внушали, что назад пути нет, смотрите только вперед. Что делать с прошлым – принять, ненавидеть, забыть? Но есть и другие классики – они призывают искать истоки сегодняшнего в прошлом. Истоки того, почему уже взрослые наши дети уезжают из Израиля, почему они организовали движение «Полуторное поколение» – движение тех, кто закончил школу уже в Израиле, почему в группе фейсбуке #«Русские девушки без чувства юмора и их друзья» десятки тысяч людей. Почему их рассказы переворачивают душу… Прослушайте эти 7300 слов со сцены театра «Маленький» и поймете.
Пару лет назад, еще до пандемии, театр «Маленький» задумал проект «Контейнер» – рассказы о том, что мы привезли оттуда – об оказавшихся бесполезными вещах, о прежней памяти, о бывших  моральных установках, об устаревших взглядах на жизнь, о ненужных меховых шапках, и да – о детях. О детях, у которых не было права принимать решения. Помните – «три чемодана, два ребенка и собака»? Спектакль «Одна с половиной история», основанный на документальных рассказах – первая часть проекта «Контейнер». В любой описанной реальной истории все равно существует некая маска – но не здесь. Все покровы сорваны, актеры и строй спектакля настолько хороши, что нет сомнения – это было, было, было… Из печального, иногда ужасающего прошлого родился прекрасный спектакль – один из лучших из тех, что я видела в последнее время. Спектакль, ставшей для кого-то исследовательской лабораторией, для кого-то – терапией, для кого-то – освобождением.

Спектакль, ставший сценическим анализом текста реальных историй, спектакль, говорящий о внутреннем ощущении счастья и свободы, об уровне пережитого насилия – ментального и физического, о безмолвных прежде жертвах и возможности вырваться из омута, о том, что стоит за внутренними травмами столь успешного внешне «Полуторного поколения» и о том, можно ли до сих по делать вид, что мы этого не заметили тогда и все еще не замечаем сегодня?
За последние две с половиной недели история мира вновь показывает ужасные картины, за эти две с половиной недели прошло несколько представлений «Одной с половиной истории». В Израиль приезжают тысячи и тысячи растерянных людей. Я не хочу, чтобы с их детьми происходило что-то подобное. Чтобы их судьбы решали чиновники со стеклянными глазами, потому что их родители борются за выживание в новом обществе. Посмотрите этот спектакль, чтобы понять, что было и как сделать так, чтобы этого не было.

Этот спектакль проживаешь вместе с актерами и их прототипами с первой реплики, затаив дыхание, точнее – «заперев» дыхание. Дышать некогда, потому что смотришь, слушаешь, запоминаешь… И смеешься – без смеха жить невозможно. И надеешься:  спектакль идет на иврите,  ведь значит «мы» уже «свои»?

Спектакль играется/проживается 4 актерами, в нем – 12 персонажей. Все, как уже сказано, основано на реальных документально зафиксированных историях и видео. Актеры  – Адас Эяль, Давид Зисельсон, Ксения Маркузе, Леон Нонин – знакомы с теми, кто смог написать эти исповеди – рассказы: Ксю Борисова, Даниэль Марголин, Евгений Молибога, Ирина Торч, Люба Лаор, Леон Нонин, Лев Коган, Джули Кайт, Елена Рот.

Драматургия и постановка: Михаил Теплицкий
Координатор проекта и помощник режиссера: Юлия Голанд
Художник по свету: Миша Чернявский, Инна Малкин
Графика: Мария Заикина
Техническое обеспечение спектакля: Саша Ли
При содействии фейсбук-сообщества #«Русские девушки без чувства юмора и их друзья» и его руководителя Лены Руссовской.

В ближайшем будущем состоится премьера второй части проекта «Контейнер» – спектакля-путешествия «Выставка совершенно ненужных вещей, привезенных нами оттуда сюда» создан под эгидой Министерства культуры и спорта, муниципалитета Тель-Авив-Яффо и «Мифаль-ха-Пайс».

31 марта, 1, 2,22, 23 апреля  в 20:00. 29 апреля – в 12:00 и 20:00. Спектакль идет на иврите.
Заказ билетов – https://bit.ly/35y3s0G
Страница театра «Маленький» – https://www.facebook.com/malenkitheater/
Театр «Маленький» – Тель-Авив, ул. Хома у-Мигдаль, 32.

Маша Хинич. Фотографии – © Марк Цо. Предоставлены пресс-службой театра «Маленький».

Assassin’s Creed Odyssey: концовка Fate of Atlantis и руководство по выбору

Вторая сюжетная арка DLC в Assassin’s Creed Odyssey — «Судьба Атлантиды», где Орелоносец оказывается на великих полях Элизиума — загробного рая для славных героев.

Получив задание научиться управлять силой Посоха Гермеса Трисмегиста , Несущий Орла должен не только владеть своей новой силой, но и выбраться из Элизиума целым и невредимым.

Чтобы увидеть этот контент, включите целевые файлы cookie.Управление настройками файлов cookie

Мы постараемся сделать подробности истории как можно более расплывчатыми, но остерегайтесь спойлеров на всей этой странице.

Если вы ищете пошаговые руководства Эпизода 2 — Мучения Аида, то у нас есть страница, посвященная и этому.

На этой странице также предполагается, что вы выполнили все необязательные квесты в DLC, включая «Отдай им Аид» и «Освободи их разум, остальные придут за ним».

Как и в основной игре, на пути к финалу вам предстоит сделать множество выборов.Вот что мы выбрали, чтобы максимально приблизиться к «хорошему» финалу. Если вы уже прошли DLC и собираетесь посмотреть, действительно ли оно так заканчивается — да, да, так оно и есть. Какой клиффхэнгер…

Квест Темной Лошади

Первый квест, в котором вам предстоит принять решение, — «Темная лошадка». Здесь вы должны выбрать, может ли старик оставить лошадь, избавиться от нее для Персефоны или отдать ее Адонису.

Мы решили отдать его Адонису, а потом ты можешь пойти и запугать конюха, чтобы Персефона не узнала.Это, кажется, не имеет большого влияния в любом случае.

Хорошие новости квест

Позже вам будет предъявлено обвинение в привлечении вербовщика Серебряного Языка на сторону Адониса. После спасения ее сына вам будет предложен выбор того, что вы хотите, чтобы она проповедовала.

Мы выбрали «Адонис приведет людей к свободе». Это будет использовано против вас в кульминационный момент истории, но его можно преодолеть, и оно предпочтительнее, чем «Геката — союзник людей».

Квест Хранителя и Кайроса

После того, как вы спасете Кайроса, скажите «это умно», но немедленно заставьте его пойти с вами к Гермесу и Персефоне.Если вы позволите ему бездельничать, это действительно разозлит Гермеса.

Квест Хранитель и пламя

По окончании этого квеста оставьте Пламя себе и никому не давайте рецепт.

Хранитель, квест на убийцу

Во время первого разговора скажите «Ты не убийца Гермес», но в итоге согласитесь убить капитанов. Не забудьте надеть шлем Isu, когда будете это делать. Затем скажите «Это было хорошо», когда вы разговариваете с Гермесом в конце.Любые попытки переубедить его положат конец вашей дружбе.

Квест «Птички Персефоны»

В разгар восстания есть шпионы, но Несущий Орла должен выяснить, кого убрать. Вам будет предоставлен выбор, пойти ли за Кузнецом или за Посланником.

В краткосрочной перспективе и на пути к хорошей концовке этой части DLC Посланник представляет большую угрозу для восстания. Однако убийство Кузнеца раскроет интересную информацию о богине Афродите.

Выпить еще квест

Этот квест сильно влияет на концовку. Когда добудете воду Леты и встретите контакт, откажите ей в этом и уничтожьте. Она поймет, что ее возлюбленный еще жив, а Персефона узнает о предательстве Гекаты.

Популярный квест

Мы выполнили этот квест полностью на стороне Гекаты и повстанцев, но, похоже, это не сильно повлияло на концовку. После того, как вы убили волка, поговорите с человеком внизу, чтобы рассказать ему о яде, затем обойдите и саботируйте все три винных контейнера.На их вопросы мы говорили «просто слухи», «на запад» и «Гермес», а потом «Ура!».

Жизнь за жизнь квест

Это немного странно, так как вы можете выбрать только Фойбу или Брасидаса, а не Натакаса из последнего DLC. Однако обратный вызов к первому ролику игры исправляет это. Похоже, это не сильно повлияет на концовку, так как вы можете либо убить Леонидаса, либо поговорить с ним. Если вы решите не убивать его, он отправит вас за парнем Кироса, которого вы спасли ранее.Приведите его к Персефоне живым, и квест завершится нейтрально.

Маяки зажжены квест

В начале квеста вы можете выбрать «Сражаться за меня» или «Сражаться за Афродиту». В целях экономии мы выбрали вариант «Афродита».

Квест «Никакое доброе дело»

Настало решающее время, здесь ваша концовка действительно выиграна и проиграна. Когда вы встретите Персефону в доме Гекаты, она отправит шпионить за Гекатой и Гермесом в комплексе на севере.Выберите «подождать», затем еще раз «подождать», затем «выйти». Если вы подождете трижды или вообще прервете, Геката одержит верх.

После того, как вы ушли, бегите к дому Персефоны, а в последующем разговоре каждый раз лгите, выбирая вариант с весами рядом с ним. Скажите: «Геката ворвалась в ваше святилище — Персефона узнает, что у нее есть ключ, — затем скажите: «Геката предательница, а не я». Персефона знает, что вы уничтожили воду, поэтому она будет разрываться между вами двумя. .

Кажется, не имеет значения, выберете ли вы «Геката хочет настроить вас против меня» или «Геката хочет ваш трон». Если все сделано правильно, Персефона скажет, что Геката сыграла большую роль в ее несчастьях, и заставит ее сказать правду. Это настраивает вас на желаемый финал.

Восстание повстанцев квест

Когда вы встретите Адониса, выберите «В бой!» Убейте капитанов, затем колоссов, и вы выиграете битву. Это возможно как с Леонидасом, так и без него.

В следующем ролике с Гермесом выберите «Мне нужна твоя помощь», и если вы все еще дружите с ним, вы пропустите битву с ним и сохраните свои отношения.

Так или иначе, Персефона сбрасывает Гермеса со стороны Акрополя — не похоже, что вы можете это остановить.

Тогда, если ты убедишь Персефону отослать Гекату, и она отпустит Адониса.

Это ведет к последнему ролику как в Элизиуме, так и в наши дни — нет возможности сразиться с существом в ролике, который будет во второй части.

Если вы изо всех сил пытаетесь отследить все тайны хранителя в Элизиуме, у нас есть полное руководство по локациям.

У нас также есть руководство по загрузке частей DLC и началу работы.

Когда вы будете готовы перейти к Эпизоду 2, щелкните здесь, чтобы открыть руководство по второму варианту.

Fate, My Savior Part 2 by Messenger-of-Death96 на DeviantArt

Literature Text

Когда я открыл глаза, я лежал на земле, на мягком ковре, и женщина смотрела на меня с искренним беспокойством .
«Ты в порядке?» — спросила она снова. Я моргнул и попытался сесть. Осторожно, — сказала она. — Не напрягайся, — я заставил себя сесть, не обращая внимания на острую, колющую боль, бушующую по моему телу, как лесной пожар. Я стиснул зубы и сделал рваный вдох. Она встала. Я знаю, что ты ранен, — сказала она. — Но я не могу видеть всей глубины твоих ран из-за всей этой грязи, крови и прочего. Эм… как ты думаешь, ты можешь принять душ или ванну в одиночестве? Может быть немного неловко, если я помогу тебе, но мне нужно лучше видеть твои раны, если я хочу тебе помочь, — сказала она.
— Ага, — выдохнул я сквозь стиснутые зубы, моя правая рука сжалась в длинной ране на левом боку, словно на короткое время вспыхнула боль. Она опустила руки, чтобы помочь мне подняться. Я схватил ее мягкие белые руки своими грязными руками, и она рывком подняла меня на ноги. Я чуть не упал снова от боли, слабости и тошноты, охвативших меня, но стиснул зубы, глубоко вдохнул и заставил себя остаться на ногах. Женщина обняла меня за плечи и повела в ванную.Я прислонилась к раковине, делая глубокие вдохи, чтобы побороть беспамятство, которое наползало на меня, как черная пелена.
«Ты уверен, что с тобой все будет в порядке?» — обеспокоенно спросила она. Я посмотрел на нее. Я уже давно не слышал заботы ни в чьем голосе. Не для меня. «Тебе нужна новая одежда, но я немного нервничаю из-за того, что оставлю тебя одного. Что, если ты снова упадешь в обморок, а меня здесь не будет, и ты ударишься головой об раковину, или пол, или что-то в этом роде…» Она начала жевать губу. .
— Со мной все будет в порядке, — сказал я, выдавливая из себя слова.
«Вы уверены?» Она спросила.
«Да.» Я сказал. Она уже столько сделала, чтобы помочь мне. Я не хотел больше спрашивать ее. Она развернулась и ушла, закрыв за собой дверь.
«Я пойду куплю тебе одежду», сказала Она. «Я вернусь через несколько минут. Будьте осторожны!» Я услышал, как закрылась входная дверь, когда она ушла. Я был совершенно чужим, и все же она была здесь, оставив меня здесь одного. Может быть, она думала, что я слишком слаб, чтобы причинить реальный вред. Но более того, она, казалось, полностью доверяла мне. Она казалась такой молодой, такой наивной. Но именно это спасло мою задницу на сегодняшний вечер, и я не собирался портить этот шанс принять теплый душ и, возможно, хоть раз поспать под дождем. Она сказала, что покупает мне одежду… но зачем?
Я вздохнул и вернулся в душ. Я не была уверена, достаточно ли у меня сил, чтобы принять душ и не потерять сознание, но я должна была попытаться. Я уже чувствовал тошноту и сильную слабость, а рана на боку яростно жгла с каждым движением и каждым вздохом.Я сделал глубокий вдох, чтобы подготовиться, и вздрогнул, когда мои ушибленные ребра запротестовали.
Я закрыл дверь в ванную, но решил не запирать ее на случай, если со мной что-нибудь случится. Я бы хотел, чтобы она могла войти и спасти меня, если я снова потеряю сознание и начну тонуть или что-то в этом роде.
Я попытался стянуть рубашку одной рукой, но так уж получилось, что моя рана была на левом боку, из-за чего поднимать левую руку было больно, а правое запястье было вывихнуто, и им тоже было трудно двигать. Каким-то образом мне удалось снять рубашку, а затем осмотреть себя в зеркале.Рана на моем боку была покрыта засохшей слипшейся кровью, а вся остальная грудь и ребра были покрыты темными синяками.
Я оставил свою одежду грудой на полу рядом с душем, затем включил горячую воду и вошел. Я взвизгнул и чуть не выпал из душа, когда вода впервые ударила меня. Было намного жарче, чем я ожидал, и я чуть не упал, пытаясь отпрыгнуть от кипятка. Напряжение заставило меня на минуту удержаться от душа. Я немного включил холодную воду, а затем снова проверил ее ногой.Лучше. Я шагнул под поток воды и вздохнул от блаженства. Как давно я не чувствовал теплой воды? По крайней мере, это немного разбудило меня, затолкнув черноту, которая грозила поглотить меня, в глубины моего подсознания.
До сих пор я купался в любой воде, которую мог найти, и она всегда была холодной. Я использовала ее шампунь и прочее, потому что у меня их не было, и когда я вышла из душа, я почувствовала их запах на своей коже. Он пах, как ее духи, но аромат был не таким сильным и скорее фруктовым, чем цветочным.Он обжег мою рану и все другие раны, которые у меня были, но, по крайней мере, теперь они были чистыми. Я как раз вытиралась полотенцем, когда услышала, как открылась и закрылась входная дверь. Через несколько секунд в мою дверь постучали.
«Эй, ты там еще в порядке?» Она позвала. «У меня есть для тебя кое-какая одежда. Я оставлю ее за дверью. Надеюсь, она подойдет». Я подождал, пока ее шаги стихнут, прежде чем открыть дверь, схватить одежду и закрыть за собой дверь. Теперь, когда я принял душ, я чувствовал себя намного лучше, чище, чем когда-либо, но все еще слаб из-за всей энергии, которую я потратил, стоя все время.Я быстро натянул одежду; джинсы, которые были немного свободными, но она также получила ремень, поэтому я подобрал их по размеру, очень большую простую белую футболку, носки и нижнее белье. Носки были маловаты, но терпимо.
Я вытер свои длинные черные волосы насухо, потом посмотрел в зеркало.
Я действительно давно не смотрел на себя. Я тоже давно не видела себя по-настоящему чистой. Мои глаза были такими же изумрудно-зелеными, как всегда, но теперь в них было что-то другое.Тяжесть… страх или гнев… что-то там, из-за чего мне было трудно смотреть себе в глаза. Когда я смотрел на себя, мне казалось, что я столкнулся с чем-то ужасающим. Я отвел глаза, чтобы осмотреть остальную часть своего лица.
Мои волосы были прямыми, черными как смоль и довольно длинными. Он закрывал мне глаза, если я не отбрасывал его назад, и он лежал на затылке. В прошлый раз, когда я смотрел на себя, мои волосы были очень коротко подстрижены. Военная стрижка. Теперь она была почти до плеч.
Мое лицо было покрыто синяками и царапинами, а левый глаз опух и стал черно-фиолетовым.Внезапно я понял, что совсем ничего не вижу.
Мое правое запястье распухло, и я чувствовал, что в какой-то момент я его вывихнул.
Я глубоко вздохнул и поднял рубашку.
Все шрамы, которые я накопил за эти годы, были болезненно видны на фоне моих острых ребер. Я мог видеть порез ножа с левой стороны ребра, глубокий и длинный, идущий вертикально вниз по ребрам и почти на фут. Она снова открылась со всеми моими движениями и начала кровоточить. Я не хотел использовать белые полотенца женщины, чтобы остановить кровь, поэтому вместо этого я скомкал бумажное полотенце и приложил его к порезу, поморщившись, когда уголок жесткой ткани натер внутреннюю часть моего пореза.
Остальные ребра были сильно ушиблены и болели. Я позволил своей рубашке упасть, скрывая ужасное зрелище, моя дрожащая рука все еще прижимала бумажное полотенце к порезу. Я чувствовал, как кровь пропитывает мои пальцы. Я открыл дверь и огляделся.
Комната, в которую я вошел, когда впервые вошел через дверь, была чем-то вроде гостиной. Ковер был светло-розово-оранжевого цвета, а стены были более темного и теплого оранжевого цвета, как у тыквы. Посреди комнаты стоял большой коричневый замшевый диван, напротив него — телевизор, а между ними — небольшой деревянный столик.Слева от комнаты был коридор. Коридор, по которому я спустился, чтобы попасть в ванную. Ванная была слева, а справа еще одна комната с маленькой кухней. Чуть дальше по коридору справа была еще одна дверь, закрытая. Я догадался, что это женская комната.
Теперь дверь была открыта, и я помедлил, прежде чем доковылять до нее. Она была открыта чуть больше, чем на щель, поэтому я постучал, а затем прислонился к дверному косяку, ожидая ее.
«Эм… эй… э….спасибо за одежду, — позвала я. Я услышала, как она подошла к двери и распахнула ее. Она сняла очки и распустила волосы. Я уставился на нее. Она была намного красивее, чем я думал. Сначала ее волосы доходили до талии густыми темно-каштановыми волнами, а глаза казались больше, детскими и невинными, чем раньше без очков.
На ней была свободная лавандовая футболка с выцветшим логотипом. и свободную пару клетчатых красных фланелевых пижамных штанов.Секунду она смотрела на меня, затем прищурилась, потом раздраженно вздохнула, побежала обратно к комоду и надела очки на нос, прежде чем снова повернуться ко мне лицом.
— Ты выглядишь ужасно, — сказала Она, слегка нахмурившись.
«Гм… Извините», — ответил я, не совсем зная, что сказать. Ее лицо расплылось в улыбке, и она засмеялась, ее голос был легким и звенящим, как колокольчики. Она прошла мимо меня в коридор и прошла на кухню. Я последовал за ней, сильно хромая на правую лодыжку, которая действительно распухла и болела как сумасшедшая.Я удивился, почему я не заметил этого раньше.
Я пытался угадать ее возраст, пока она порхала по кухне, что-то мастеря.
Наверное, около двадцати или около того. На год старше меня. Она поставила кастрюлю на плиту, чтобы закипеть, затем повернулась и посмотрела на меня, неся маленькую белую коробочку с красным крестом на крышке. Она поставила его на стол рядом со мной.
«Сними рубашку», — приказала Она. Я немного поколебался, затем попытался стянуть рубашку через голову одной рукой, в то время как другая рука все еще держала бумажное полотенце сбоку от меня.Некоторое время назад я чувствовал, как кровь стекает по моему боку, но я ничего не мог сделать. Я не хотел израсходовать все ее бумажные полотенца. Она поняла, что одна рука чем-то занята, и помогла другой рукой снять с меня рубашку. Она аккуратно сложила его и положила на стул, а затем снова повернулась ко мне. Ее лицо побледнело, когда она увидела красное бумажное полотенце.
«Извините», сказал я. «Я не знала, что еще использовать, и я не хотела, чтобы это капало на ваш ковер»,
«Меня беспокоят не бумажное полотенце или ковер,» сказала Она.«Это ты. Не знаю, что я могу сделать для тебя с таким порезом».
«Просто… делай, что можешь». Я сказал. Она кивнула и взяла в ванной бумажное полотенце, затем вытерла всю кровь. Она заставила меня лечь на стол, а сама приложила еще один комок бумажного полотенца к моему порезу, нажимая на него, пытаясь остановить кровотечение. Она довольно сильно надавила на мои ребра, которые и без того были в синяках, но если этого было недостаточно, мой порез выглядел так, словно меня проткнули тысячами раскаленных игл.Мне пришлось бороться, чтобы не оттолкнуть ее от себя. Она знала, что делает, больше, чем я, и она уже так много сделала, чтобы помочь мне.
Наконец она отстранилась и осмотрела мой порез.
«Надеюсь, он не заражен», сказала Она. — Что тебя порезало?
«Я нож,» сказал я. Она вздрогнула.
«Я помажу его мазью, а потом перевяжу, хорошо?» Я кивнул. Она нежно работала надо мной, не говоря ни слова, ее пальцы были маленькими и крепкими. Я слышал, как кастрюля с водой кипела на плите, шипя, когда вода плескалась на горячей конфорке.
«Как тебя зовут?» — наконец спросила она, жестом приглашая меня медленно сесть.
— Дерек, — ответил я, поморщившись.
«Встань», сказала Она. «Я должна перевязать его сейчас. Я Триша». Она продолжала ходить вокруг меня кругами с повязкой в ​​руке. У меня закружилась голова.
— Готово, — наконец сказала она. О времени. Мне казалось, что я снова потеряю сознание. Я посмотрел на ее работу. Довольно аккуратно.
«Спасибо», сказал я, затем опустился на ближайший стул. Я посмотрела на нее, когда она упаковала все в свою маленькую аптечку и поставила ее на полку.
«Почему ты мне помог?» Я попросил. Она сделала паузу, затем повернулась, чтобы посмотреть на меня, ее глаза сверкали за очками.
— Не знаю, — ухмыльнулась она. «Но я счастлив, что сделал это. В тебе было что-то такое. Что-то, что звало меня. Я мог сказать, что ты ранен и тебе нужна помощь. Но… по правде говоря, я не знаю, почему я помог тебе. » Она подошла к шкафу и достала коробку с чем-то, затем высыпала содержимое коробки в кипящую кастрюлю с водой и начала помешивать.
«Как долго ты собираешься позволить мне оставаться здесь?» Я попросил. Она пожала плечами.
«По крайней мере, пока тебе не станет лучше. И тебе, кажется, негде остановиться. Без обид», — добавила Она, улыбаясь. — Посмотрим. Кстати, что с тобой случилось?
«На меня напала кучка парней, которые думали, что могут ограбить меня.» Я фыркнул. «Бьюсь об заклад, они все вне себя от радости, обнаружив, что мой бумажник совершенно пуст. Я был удивлен, что он вообще у меня есть». Она улыбнулась и села на стул напротив меня.
«Откуда ты?» — спросила она, подперев голову рукой.
— Крошечный городок к северу отсюда, — немного настороженно ответил я. Я не хотел рассказывать ей слишком много о себе.
«Почему ты ушел?» Она спросила. Я мгновение смотрел на нее, прежде чем ответить.
«Мой отец оскорблял меня и мою мать с самого детства. Моя мама в конце концов покончила с собой, а отец винил в этом меня, постоянно напивался и бил меня еще больше. Поэтому я ушел.» Я сохранял бесстрастное лицо и тон, пока говорил. Я увидел, как ее лицо смягчилось, казалось, что она почти обмякла, как будто она почувствовала, как невыносимая скорбь и печаль борются во мне.
— Понятно, — тихо сказала Она. — Сколько тебе было лет, когда ты ушел? Она спросила. Я должен был подумать об этом.
«Я думаю, пятнадцать.»
«Пятнадцать? Тогда когда твоя мать умерла?»
«Когда мне было девять. Ты видел шрамы на моей спине, да? Это от моего старика.» Она задохнулась.
«Это сделал твой собственный отец?» Она спросила. Кастрюля на плите закипела, и она снова вздохнула и подбежала к ней, лихорадочно помешивая. Она открыла холодильник, достала бутылку соуса и налила его в другую кастрюлю на плите.Я чувствовал запах соуса с того места, где сидел. Это заставило мой желудок громко заурчать. Она улыбнулась мне в ответ.
— Я слышала, — сказала Она. Уголок моего рта дернулся.
«Извините», сказал я. «Прошло много времени с тех пор, как я ел что-нибудь существенное».
«Как долго?» — спросила она с любопытством. Я улыбнулась.
«Давно. И даже дольше, с тех пор как я съел что-то действительно съедобное.» Она снова рассмеялась. Ее смех был нежным, заставил меня расслабиться.
«Ну, ждать осталось недолго», сказала Она.«Он почти готов». Она постоянно перемешивала два горшка, разговаривая со мной. Ее голос то вливался в мою голову, то вылетал из нее. Я положил голову на руки на стол и закрыл глаза. Я слышал, как она сделала паузу в разговоре, потом тихонько засмеялась, а потом начала напевать. Мелодия была запоминающейся, и вскоре она застряла у меня в голове, к моему большому неудовольствию. Но это звучало немного как колыбельная. Что-то, что мать напевала своему ребенку перед тем, как отправить его спать. Я вздрогнул.
Прежде чем я это осознал, я заснул.
Несколько минут спустя я почувствовал, как меня мягко встряхивают. Я открыла глаза и увидела дымящуюся тарелку со спагетти и соусом прямо передо мной, а стакан молока чуть поодаль, чтобы не опрокинуть его. Это разбудило меня сразу. Мой желудок снова заурчал, громче, чем прежде. Триша рассмеялась.
— Я знала, что ты не захочешь пропустить ужин, — сказала Она. Я улыбнулась.
«Нет, не буду. Спасибо.» Я колебался, словно ожидая разрешения.
«Копайся», — засмеялась она.
Я никогда в жизни не пробовал ничего вкуснее.Я тоже постарался сказать ей об этом. Она только рассмеялась и начала есть из своей тарелки.
«Имейте, сколько хотите», сказала Она. «Это легко сделать, и вам нужна ваша сила».
Я справился с этим и практически прикончил горшок. Позже я почувствовал себя виноватым, когда понял, что она съела только одну полную тарелку. Она, казалось, заметила мою вину и отмахнулась от нее, смеясь.
«Не беспокойся об этом», сказала Она. «Я не могу много есть. Я бы съедал по одной кастрюле каждый день в течение следующих двух недель, прежде чем я смог бы ее съесть.Ты должно быть устал. Пойдем, я покажу тебе, где ты можешь спать. Она встала из-за стола, поставив свои и мои вещи в раковину. Она провела меня обратно по коридору в гостиную и указала на диван.
«Ты можешь спать там, — сказала она, — Извини, у меня нет другой кровати, а моя довольно маленькая. Надеюсь, ты не против. Я пойду принесу тебе одеяла и подушку. Она повернулась и исчезла в коридоре. Ей было жаль? Я положил руку на диван, чтобы устоять на ногах. а что у нее маленькое?Я не против поспать на диване и все равно это ее дом.Я был просто обузой. Я бы не стал спать на ее кровати, даже если бы она была больше. Это была ее кровать. Я бы не позволил ей быть такой милой со мной. Я рухнула на кушетку, чувствуя, как мои глаза закрываются сами по себе, и не в силах их остановить.
«-И я знал, что мне нужно было взять больше одеял, потому что я знал, что они будут теплее и легче спать под целой кучей… одеял.» Она замолчала, когда увидела, что я крепко сплю на диване, моя рука все еще сжимает бок. Она осторожно подложила мне под голову подушку, не разбудив меня, затем накинула на меня одеяла и выключила свет.
Я смутно помню, как однажды в ту первую ночь я внезапно проснулся и дико огляделся, как будто что-то искал. Я вспотел и тяжело дышал, и мне казалось, что мне только что приснился кошмар. Я не знал, то ли кошмар разбудил меня, то ли звук бегущей воды и скрежет тарелок друг о друга. Я понял, что Триша мыла посуду, и мне захотелось, чтобы у меня были часы, чтобы узнать, который час. Я чувствовал себя немного виноватым из-за того, что ей пришлось стирать и мои вещи, но я слишком устал, чтобы встать и помочь ей.
Она все еще пела. Я чувствовал, как мои глаза закрываются, когда моя голова откидывается на подушки, ее песня мягко звучит в моей голове, ясной, как колокольчик. Прежде чем я это осознал, я снова заснул.

Глава 20

Резюме и анализ Часть 3: Глава 20

Резюме

Во время первого года изгнания Оконкво уже начал планировать свое грандиозное возвращение в Умуофию.Теперь он полон решимости компенсировать семь лет, которые он считает потраченными впустую. Он не только построит большую территорию, чем раньше, но и построит хижины для двух новых жен.

Однако его планы триумфального возвращения на мгновение рушатся, когда Нвойе присоединяется к христианам. Поначалу действия старшего сына угнетают его. Но он уверен, что остальные пятеро сыновей его не разочаруют. Оконкво также гордится своими дочерьми, особенно Эзинмой, которая выросла красивой молодой женщиной.Периоды ее болезни практически отсутствуют. Многие женихи в Мбанте просили ее руки и сердца, но она всем отказывала, зная, что ее отец хочет, чтобы она вышла замуж в Умуофии. Более того, она призвала свою сводную сестру Обиагели сделать то же самое.

Когда Оконкво возвращается в свою деревню в Умуофии, он обнаруживает, что она сильно изменилась за время его отсутствия. Христианская церковь привлекла многих новообращенных, в том числе уважаемых мужчин, отказавшихся от своих традиционных титулов. Белые люди учредили в Умуофии государственный суд, где судят людей, нарушающих законы белых людей; они также построили тюрьму, куда отправляют для наказания нарушителей закона.Белые люди даже нанимают туземцев в качестве своих «придворных посыльных», чтобы выполнять грязную работу по аресту, охране и наказанию провинившихся граждан.

Оконкво задается вопросом, почему его собратья-умуофийцы не прибегают к насилию, чтобы избавиться от церкви белого человека и репрессивного правительства. Его друг Обиерика говорит, что они боятся такой же участи, как у Абаме, деревни, разрушенной белыми захватчиками. Он также рассказывает Оконкво о крестьянине, которого правительство повесило из-за ссоры из-за участка земли.Он указывает, что любое насилие натравит членов клана друг на друга, потому что многие члены клана уже присоединились к церкви. Обиерика размышляет о том, как белые люди спокойно приспособились к своей религии, а затем остались, чтобы жестко править, никогда не изучая языка или обычаев и не прислушиваясь к разуму.

Анализ

Беспокойство Оконкво по поводу своего статуса, когда он возвращается в Умуофию, предполагает, что статус и мобильность в умуофийском обществе в значительной степени определяются самими собой: все мужчины, кроме изгоев, имеют возможность продвигаться вверх в клане благодаря тяжелой работе, мудрому использованию ресурсов и получению титулов.Выдающийся статус важен для Оконкво в его стремлении к мужественности. Вне сообщества в течение семи лет Оконкво потерял свой статус среди деревенских старейшин и других эгвугву, и он отстал в получении титулов в клане. Он может компенсировать это, устроив демонстрацию своей большой территории, большего количества амбаров и большего количества жен, а также начав посвящать своих сыновей (помимо Нвоя) в получение титулов — то, что немногие мужчины могут себе позволить. Он, кажется, подавляет свою скорбь по поводу потери Нвоя и свое разочарование по поводу потери положения в обществе, вновь подтверждая свои убеждения в традиционных обычаях игбо и предпринимая традиционные шаги к признанию.

В свете своей почти одержимости статусом и титулами Оконкво должно быть особенно трудно понять, как некоторые из лидеров сообщества могут отказаться от своих титулов, когда они стали христианами.

Во второй части книги главным изменением, внесенным белым человеком, стала христианская церковь, которая разделила не только общество, но и семьи. В первой главе третьей части правительство белого человека берет на себя центральную роль не только со своим судом и его «судебными посланниками», но также со своей тюрьмой и казнями.Об этих изменениях Ачебе сообщает в ироническом тоне, как будто создание правительства белыми колонизаторами было первым опытом игбо с правительством, как будто у игбо не было системы правосудия до прибытия белых. Этот тон особенно ироничен, потому что ранее Ачебе прилагает большие усилия, чтобы проиллюстрировать не только разновидности правосудия, отправляемого Оракулом (изгнание Оконкво), но и простыми гражданами (выговоры о нарушении Недели мира и о женщинах, не помогающих в спасение бездомной коровы), но он также иллюстрирует процессы, которым следовали, и виды правосудия, отправляемые официальным судом (глава 10).Помните, что одной из целей Ачебе при написании этого романа было продемонстрировать, что игбо разработали сложное общество, религию и систему правосудия задолго до прибытия европейцев.

Ачебе описывает колониальное правительство, которое подчиняет народ игбо, не требуя от миссионеров изучения их языка или попыток понять традиции и обычаи игбо. (Первый представитель церкви, г-н Браун, является исключением, поскольку он приспосабливается к языку и обычаям игбо.)

Привлекая других африканских аборигенов — котма , или придворных посланников — в качестве своих агентов в повседневном обеспечении своей власти, миссионеры привлекают к своим услугам людей с цветом кожи и языковыми характеристиками, очень похожими на местных аборигенов. — люди, которые вроде бы дружат с местными аборигенами (хотя диалект у них, видимо, был другой). В конечном итоге судебные посланники злоупотребляли своим положением, избивая заключенных и беря взятки. Ачебе подразумевает, что коррупция среди народа игбо характерна не только для Умуофии; придворные посланники больше заинтересованы в том, что они могут выйти из ситуации, а не в том, что они могут сделать для распространения христианства или даже для помощи умуофийцам.

Когда Оконкво говорит Обиерике, что его товарищи-умуофийцы должны восстать против британцев, Обиерика мудро понимает, что уже слишком поздно. Многие умуофийцы уже «пополнили ряды пришельцев». Обиерика говорит, что белый человек «нанес нож на то, что связывало нас вместе, и мы развалились» — первое конкретное подтверждение названия книги « Вещи разваливаются ».

Глоссарий

браслет с его титулами Когда мужчина получает титул, он носит специальный браслет, обозначающий его титул.Он может носить более одного ножного браслета, чтобы указать на большее количество титулов.

таинство Святого Причастия самый священный ритуал участия христиан.

посланники суда коренные африканцы, нанятые британцами для осуществления их правоохранительной деятельности; также называется котма. Котма — это слово на пиджин-английском, происходящее от слов «суд» и «посланник».

Глава 2

Резюме и анализ Часть 1: Глава 2

Резюме

Однажды ночью, когда Оконкво устраивается на своей кровати, он слышит бой барабана и голос городского глашатая.Посланник созывает всех жителей Умуофии на следующее утро на рыночную площадь. Оконкво задается вопросом, связано ли чрезвычайное положение с войной с соседним кланом. Война не пугает Оконкво, потому что он знает, что она напугала его трусливого отца. Например, во время последней войны в Умуофии Оконкво принес домой свою пятую человеческую голову.

На следующее утро Оконкво присоединяется к мужчинам на рыночной площади, чтобы услышать важное сообщение. Сильный оратор кричит им приветствие, приветствуя их во всех четырех направлениях, ударяя кулаком в воздух; собравшиеся мужчины кричат ​​в ответ.После того, как тишина возвращается, он сердито сообщает толпе, что в Мбаино была убита умуофийская женщина, когда она посещала рынок. Возмущенная толпа наконец соглашается с тем, что Умуофия должна следовать своему обычному курсу действий: дать Мбаино выбор: либо начать войну с Умуофией, либо предложить Умуофии молодого человека и молодую девственницу в качестве компенсации за смерть умуофийской женщины.

Сила Умуофии в войне и магии вызывает страх у соседей, которые знают, что Умуофия не пойдет на войну, не попытавшись сначала договориться о мирном урегулировании и не добиваясь принятия войны своим Оракулом.Все знают, что война с Мбаино будет справедливой войной, поэтому клан отправляет Оконкво в качестве своего эмиссара для переговоров с Мбаино; он возвращается через два дня с молодым человеком и девственницей, предложенной Мбаино.

Старейшины Умуофии решают, что девушка должна жить с мужчиной, чья жена была убита, а молодой человек по имени Икемефуна принадлежит всему клану. Они просят Оконкво взять четырнадцатилетнего Икемефуну к себе домой, пока клан решает, что с ним делать. Затем Оконкво поручает заботу об Икемефуне своей старшей жене, матери Нвоя, его старшего сына, которому двенадцать лет.Икемефуна очень напуган, особенно потому, что он не понимает, что произошло и почему он находится в Умуофии, разлученный со своей семьей. Старейшины решают, что подросток будет жить в доме Оконкво три года.

Поскольку Оконкво постоянно боится, что кто-то может считать его слабым, он правит своим домом суровой рукой и свирепым голосом, заставляя всех бояться его взрывного характера. Когда он был ребенком, товарищ по играм назвал его отца agbala , что означает женщина, а также мужчина, не получивший никакого титула.Оконкво научился ненавидеть все, что любил его отец, включая мягкость и праздность. Он также видит признаки лени в своем сыне Нвое. Чтобы избавиться от воспоминаний о своем отце, Оконкво ежедневно пилит и избивает Нвоя.

В своем семейном комплексе Оконкво живет в собственной хижине, и каждая из трех его жен живет в собственной хижине со своими детьми. Процветающий комплекс также включает в себя загон со стопками батата, сараи для коз и кур и лечебницу, где Оконкво хранит символы своего личного бога и духов предков и где он возносит молитвы за себя и свою семью.Он много часов работает на своих фермах и ожидает, что другие будут делать то же самое. Хотя члены его семьи не обладают его силой, они работают без жалоб.

Анализ

В главе 2 читатель начинает знакомиться с верованиями и обычаями традиции игбо, которые имеют особое значение в этой истории — например, широкое разделение между мужскими и женскими действиями и обязанностями. Уважение и успех основаны только на мужественных действиях и достижениях; забота о детях и курах, с другой стороны, является женской деятельностью.

В решимости Оконкво быть идеальным образцом мужественности он начинает раскрывать последствия своего страха перед слабостью — свой трагический недостаток. Оконкво ненавидит не только праздность, но и кротость; он требует, чтобы его семья работала столько же, сколько и он (не считая их меньшей физической выносливости), а также придирается и избивает своего старшего сына Нвоя.

Ачебе продолжает вплетать традиционные элементы общества игбо в главу 2. Собрание на рынке иллюстрирует почтение общества игбо к тому, что является «мужественным» — например, верность жителей деревни мужского пола друг другу, когда они называют женщину, убитую другой деревней, «дочь Умуофии.Эта сцена также иллюстрирует церемониальный характер городских собраний, поскольку оратор выкрикивает обычное приветствие толпе, поворачиваясь в четырех разных направлениях. Кроме того, читатель узнает, что религиозные традиции умуофийцев включают поклонение деревянным предметам, представляющим не только личную бог, но и духи предков, которым молятся и приносят жертвы.

Ачебе продолжает использовать искусство традиционного повествования и ссылки на легенды и поговорки того времени, чтобы проиллюстрировать, во что люди верят и уважают.Например:

  • Оконкво помнит с детства, когда его отца звали бабой.
  • Пословица «Когда светит луна, калека проголодается погулять» представляет собой веру в защитные свойства лунного света в отличие от страха темноты.
  • Легенда об одноногой старухе отчасти объясняет, почему другие кланы боятся Умуофии.

Глоссарий

Ogbuefi человек с высоким титулом, как в Ogbuefi Ezeugo (оратор) и Ogbuefi Udo (человек, чья жена была убита в Мбаино).

Ezeugo имя лица, имеющего большое религиозное значение, например священника игбо.

Удо мир.

около десяти тысяч человек В девяти деревнях Умуофии вряд ли проживает десять тысяч человек. Это высказывание, вероятно, относится ко всем представителям общества — пример гиперболы , преувеличения, не предназначенного для буквального понимания.

Umuofia kwenu крик одобрения и приветствия, что означает United Umuofia!

agadi-nwayi старуха.

Оракул место, или средство, с помощью которого консультируются божества; здесь Оракул Холмов и Пещер.

справедливая война Общества на протяжении всей истории рационализировали определенные войны как оправданные по религиозным или культурным причинам. Например, в пятом веке святой Августин раннехристианской церкви много писал о справедливой войне; крестовые походы позднего средневековья были инициированы как священные войны; а сегодняшнее мусульманское слово джихад означает священную войну.

эмиссар лицо или агент, отправленный с определенной миссией.

ндичие старейшины.

оби хижина на территории комплекса.

комплекс замкнутое пространство со зданием или группой зданий внутри него.

Чтение Колеса Времени: Убийство Посланника в «Властелине Хаоса» Роберта Джордана (часть 12)

С возвращением к чтению Колеса Времени! На этой неделе мы рассмотрим главу 16, в которой Рэнд встречается с городским клерком, несколькими андоранскими дворянами и мясной куклой Отрекшихся.Хорошие времена на Троне Дракона. Хорошие времена.

Глава 16 начинается с того, что Ранд сидит на своем Драконьем троне с драконьим скипетром на коленях и слушает, как старший клерк занимается своими делами.

… [Рэнд] не был уверен, что для Норри что-то реально, кроме цифр в его бухгалтерских книгах. Он тем же пыльным тоном перечислял количество смертей за неделю и цену репы, привозимой из деревни, устраивал ежедневные захоронения бедных, одиноких беженцев с не большим ужасом и не большей радостью, чем нанимал каменщиков для проверки ремонта. городских стен.

Рэнду на самом деле неинтересно слушать декламацию Норри, он слишком увлечен вопросом, почему Аланна и Верин до сих пор не пробовали с ним ничего другого. Ему некомфортно от ощущения Аланны в его голове, а также от жесткого сиденья под ним, но он, по крайней мере, освоил трюк Таима, чтобы игнорировать жару, и он не потеет.

Затем вмешивается Башир, приводя четырех андоранских дворян, которых ждал Ранд: леди Дайлин, леди Эллориэн, лорда Абель и лорда Луана.Башир представляет Рэнда, «Владыку Утра, Князя Зари, Истинный Защитник Света, перед которым мир преклоняет колени в благоговении».

Рэнд отмечает маленькое дополнение, внесенное Баширом в список титулов, которые они выбрали вместе, и размышляет над советом Морейн о том, что то, что люди увидят в нем первым, навсегда останется в их памяти. Он галантно приветствует четверых и приглашает их сесть с ним на несколько стульев и отведать охлажденного вина, которое подает гай’шайн .Рэнд отмечает враждебность андоранцев к Баширу, а также к айильцам, а также к оскорблению гай’шайнов за то, что им приказали служить болотным жителям.

Они обсуждают желание Ранда найти Илэйн и сделать ее королевой, что одобряет Дайлин, но с чем не соглашается Эллориэн, говоря, что Моргейз предала и отвергла ее друзей и союзников. Она хочет, чтобы Дайлин стала следующей королевой Андора. Абель все еще обеспокоена тем, что Ранд убил Моргейз, и Дайлин говорит о слухах, окружающих, кто такой Рэнд и что он там должен делать, некоторые из которых хуже, чем слухи, которые Ранд уже слышал о себе.Некоторые даже говорят, что он убил Илэйн так же, как и Моргейз. Он спрашивает, помогут ли они ему снова сделать Андор целым, и расстраивается, когда ему напоминают, что он должен сражаться с Тармоном Гай’доном, а не становиться правителем. Он уверяет их, что намерен увидеть Илэйн коронованной, а затем уйти и никогда не возвращаться.

Дайлин говорит ему, что она подождет и подумает, и что если он сделает то, что он говорит, она пошлет свои силы, чтобы сражаться на его стороне, когда придет время. И что если он этого не сделает, она пошлет против него свои силы.Все остальные обещают сделать то же самое, и Ранд считает, что честное противодействие еще труднее, чем Тайрен, крадущийся за его спиной.

Когда они уходят, Рэнд отводит Дайелина в сторону и спрашивает, почему она на него странно смотрит. Она спрашивает о его отцовстве, а затем объясняет, что он очень похож на Тигрейн, предыдущую дочь-наследницу Андора, которая исчезла однажды ночью, и ее больше никогда не видели, оставив после себя мужа и сына Галада.

Ранд испытал собственный шок.Ему стало холодно. Фрагменты истории, которую рассказали ему Мудрые, крутились в его голове… златовласый юный болотоземец, в шелках… сын, которого она любила; мужа у нее не было… Шайэль было имя, которое она взяла. Она никогда не давала другому… В твоих чертах есть что-то от нее.

Он узнает, что некоторые считают, что Гитара Морозо была виновата в исчезновении Тигрейны, и что ее исчезновение привело в движение цепочку событий, которые привели к замыслам Кайриэнина и Гордости Ламана.Она задается вопросом, что было бы по-другому, если бы Тигрейн стала королевой, а Моргейз осталась бы только Высоким Престолом Дома Тракандов, а Илейн вообще никогда не родилась, и оставляет Ранда в раздумьях о том, как так много событий, кажется, слились друг с другом.

Так много жизней изменилось, столько жизней закончилось, чтобы она могла родить его в нужное время и в нужном месте и умереть при этом. Кари ал’Тор была матерью, которую он помнил, хотя и смутно, но все же хотел бы узнать Тигрейн, или Шайэль, или как она хочет себя называть, хотя бы ненадолго.Лишь бы ее увидеть.

Башир возвращается, выводя Ранда из задумчивости, говоря, что к нему пришел кто-то еще. Рэнда это не интересует, но Башир настаивает — этот человек утверждает, что является посланником лорда Бренда. Иллианера, седого и хорошо одетого, вводят.

У него был курносый нос и широкий ухмыляющийся рот. Однако, подойдя ближе, Ранд понял, что его ухмылка не изменилась ни на волосок. Все лицо мужчины, казалось, застыло в этом веселом выражении.Напротив, его темные глаза смотрели из-под этой маски, полные страха.

Айильцы замечают, что с мужчиной что-то сделали, и он объявляет, что принес послание от лорда Саммаэля. Когда он произносит сообщение, то совершенно другим голосом, как Рэнд узнает из воспоминаний Льюса Терина. Самаэль предполагает, что, хотя они в конечном итоге встанут на противоположные стороны, они объявят временное перемирие. Он предлагает не выступать против Ранда или расширять его границы за пределы определенной области, оставив большую часть Ранду, и не помогать никому из других Отрекшихся в их попытках сразиться с ним.

«До сих пор вы хорошо справлялись с удалением Избранных с поля боя. Я не сомневаюсь, что ты и дальше будешь хорошо себя вести, лучше, чем раньше, зная, что твой южный фланг в безопасности, а остальные сражаются без моей помощи. Подозреваю, что в День Возвращения, как и положено, будем только ты и я. Как это должно было быть». Зубы мужчины щелкнули, спрятавшись за ледяной ухмылкой. Его глаза были близки к безумию.

Рэнд знает, что даже если бы он мог доверять Саммаэлю, такое перемирие означало бы отдать «бесчисленные тысячи на милость Саммаэля, качество, которого у этого человека никогда не было.Он понимает, что захватил , сказал в , его ярость скользит по поверхности Пустоты, когда он говорит посланнику, что бросит все зло, которое он когда-либо совершал, к его ногам, называя места и действия из воспоминаний Льюса Терина, когда он обещает заставь Саммаэля заплатить за каждого.

«Скажи ему, никаких перемирий с Отрекшимися. Никакого перемирия с Тенью.

Посланник начинает потеть кровью, затем падает, корчась в постоянно расширяющейся луже крови. Ранд знает, что ничем не может помочь, поэтому просто наблюдает, как это делают Башир и Айил.Авиенда замечает, что это странный конец для странного человека, и Ранд понимает, что она прибыла в Зал без его ведома. Он замечает, как она смотрит на него, проверяя, не ранен ли он, и напоминает себе, что она здесь только для того, чтобы шпионить за ним для Мудрецов.

Она говорит ему, что ей нужно отправиться с ним в Кайриэн, чтобы поговорить с Мудрецами, и Ранд любезно отвечает, про себя задаваясь вопросом, сможет ли он оставить ее там. Башир напоминает Ранду, что он должен наблюдать, как всадники Башира проходят свой путь, но, хотя Ранд знает, что это важно, он говорит, что это должно подождать день или два.Ему нужно уйти от королев Андора, чьи нарисованные образы, кажется, смотрят на него с неодобрением, и от ощущения Аланны и осознания ее присутствия. Если только на одну ночь.

 

Думаю, в данном случае хорошо, что у Рэнда есть максима против убийства женщин или причинения им вреда. Он не знает, что сделала с ним Аланна и какой вред причинит ее смерть. Интересно, разрыв связи между Стражем и Айз Седай более или менее серьезен в зависимости от того, насколько близки рассматриваемые рабы и как долго они связаны друг с другом.Очевидно, что часть травмы потери связанного с вами партнера заключается в способности чувствовать его смерть, но если вы были связаны с кем-то в течение длительного времени, его присутствие в вашем уме станет ощущаться как часть вас, и, таким образом, потеря его будет ощущаться не просто как потеря кого-то, с кем вы были очень близки, но на самом деле как потеря части себя. Трудно точно сказать, насколько смерть Аланны могла бы повлиять на Ранда, если бы он приказал Девам убить ее. Но даже если то, что она не в его уме, все еще является облегчением, я уверен, что последствия будут для него серьезными.Я знаю, что он был не в настроении разговаривать, но я действительно чувствую, что Аланна и Верин должны были хотя бы попытаться дать ему краткую информацию о связи. С другой стороны, все это было настолько незапланировано, и я не думаю, что Рэнд это понимает. Вероятно, он полагает, что Верин и Аланна все спланировали, и поэтому, конечно, он ожидает, что они уже попытались сделать еще один ход. Вместо этого Верин понятия не имела, что это вообще произойдет, и даже у Аланны нет никакого плана, кроме мысли о том, что было бы хорошо надеть веревку на Ранда, а также на Перрина и Мэта, если они смогут с этим справиться.

Я заметил, что, когда Ранд обнаружил, что смотрит в стену в направлении Аланны, он твердо сказал себе, что не заменит Морейн женщиной, которая устроит ему такую ​​засаду. Конечно, мы знаем, что Илэйн, Найнив и Эгвейн — единственные Айз Седай, которым Ранд действительно доверяет, и даже им с осторожностью. Но на самом деле мы почти не видели, как развивались его отношения с Морейн после того, как они заключили перемирие. После ее смерти у нас было несколько моментов, подобных этому, когда Рэнд обдумывал, насколько он доверял ей и полагался на нее.

Мне нравится контраст между Рэндом, слушающим отчет Халвина Норри, и Найлом, слушающим отчет Балвера в главе 9. Затем Найл размышлял о том, что Балвер будет служить любому хозяину так же хорошо, как он служит Найлу, и что это делает его лучше. шпион — у него нет особых планов относительно того, как следует использовать информацию. Но своего рода нейтралитет Балвера не совсем нейтрален — ему может быть все равно, как используется информация, но ее можно использовать различными сомнительными способами, и он предпочитает служить под началом кого-то с очень конкретной повесткой дня.Норри, с другой стороны, полностью сосредоточившись на своих обязанностях клерка, на самом деле делает что-то весьма замечательное, не говоря уже о том, что полезное. Как отмечает Рэнд в этом разделе, так много людей отказались от своей жизни сейчас, когда в мир прибыл Возрожденный Дракон. Некоторые оставили старые узы и последовали за ним. Другие бегут из завоеванных им городов, как и многие в Андоре. Но работа Норри как главного клерка должна выполняться независимо от того, кто правит Андором или управляет Кэймлином, поэтому его отстраненность в конечном счете полезна и хороша — по крайней мере, до тех пор, пока он продолжает выполнять свою работу должным образом.Если бы он позволил изменить свои обязанности так, чтобы важные аспекты заботы о людях остались без внимания, это, конечно, было бы иначе.

В любом случае, повествование продолжает устанавливать это тематическое сравнение между Рэндом и Найлом, поскольку они оба стремятся контролировать Кэймлин и Андор. Дело с титулами и тем, что Ранд следует советам Морейн, пытаясь произвести на людей нужное впечатление, было интересным и очень проницательным наблюдением со стороны Морейн. Не то чтобы я ожидал от нее чего-то меньшего, но если психология, стоящая за действиями Рэнд, сосредоточена вокруг сложных политических маневров и Игры Домов, это прямое наблюдение о том, насколько важны для людей первые впечатления.И это также напоминание о том, что Рэнд не может позволить, чтобы его видели таким, каким он хочет быть. Во время его встречи с посвященными Айз Седай из Эмондова Луга нам напомнили, как сильно ему больно потерять свою личность Ранда ал’Тора, пастуха из Двуречья. Он пытается культивировать образ Дракона как сильного и доброжелательного перед лицом страха и слухов, которые сделали бы его монстром, но на самом деле это его единственные два варианта. Он — Возрожденный Дракон, и он не может позволить себе выглядеть простым пастухом.

Как и Ранд, я находил забавным, когда он столкнулся с открытой враждебностью Дайелин, Эллориен, Абель и Луан, и обнаружил, что с этим может быть даже сложнее, чем с подлизыванием или крадучись, с которыми он имел дело из-за Тайренская и кайриэнская знать. Но также они мне очень нравятся, и мне нравится, как мы можем видеть, что не только в Двуречье живут упрямые и сильные люди. Это все Андор.

Тем не менее, я беспокоюсь за Моргейза. Абель, Луан и Эллориэн — все они поддержали первое притязание Моргейз на трон, и в главе 9 в повествовании упоминается, что она расстроится, если услышит эти имена в списке тех, кто «преклонил колени перед ал’Тором».Если эти четверо решат довериться Ранду и поддержать его попытки найти Илэйн и добиться ее коронации, Моргейз может услышать об этом — а она может услышать только то, что они дружат с ним и поддерживают его. Конечно, только Дайлин на самом деле поддерживает даже эту идею прямо сейчас; все остальные, кажется, затаили обиду на Моргейз за ее очевидное предательство. К сожалению, похоже, никому не приходило в голову, что она могла находиться под влиянием Рахвина. Рэнд ничего не знает о Принуждении, но наверняка любой, кто признает, что лорд Гэбрил на самом деле был одним из Отрекшихся, по крайней мере подумает, что Моргейз, который всегда считался хорошим и справедливым правителем и который, казалось, резко изменился в характере, мог находился под его влиянием и каким-то образом манипулировал им.

Конечно, чтобы прийти к такому соображению, андоранская знать должна была бы принять заявление Рэнда о лорде Гэбриле, чего они явно не сделали, поскольку многие до сих пор подозревают, что именно Рэнд убил ее. Но если бы я был Рэндом, я думаю, что хотел бы больше продвигать этот угол. Вы могли бы подумать, что он захочет напомнить им о том, почему он приехал в Кэймлин — он напомнил им, что не хочет править, но он пренебрегает напоминанием о том, почему он был вынужден взять власть в свои руки.Абель напоминает ему, что в Караэтонском цикле говорится, что Рэнд должен сражаться с Темным, но не то, что он должен править. Если оставить в стороне тот факт, что эти пророчества могут быть открыты для немного большего толкования, чем Абель принимает в данный момент, прибытие Рэнда в Кэймлин было связано с борьбой с Темным, а не с правлением.

Но тогда, я думаю, это подводит нас к главному, а именно к тому, что Рэнд говорит, что не хочет править Андором, и тем не менее решает, кто будет править.Дайлин, возможно, готова пока терпеть его присутствие, потому что она также хочет, чтобы Илейн заняла Львиный трон, но Рэнд говорит этим людям, кто будет их правителем. Его мотивы могут быть благими: Илэйн является законной наследницей, как с юридической, так и с моральной точки зрения, если вы признаете, что Рахвин несет ответственность за то, что случилось с Моргейз, и он знает, что ему нужно, чтобы Андор был сильным и объединился во время Последнего. Битва — но он все еще в основном иностранный авторитет, приходящий и говорящий им, кто будет их правителем, и что он отпустит власть, которую он захватил в Андоре, только тогда, когда Львиный Трон будет заполнен в соответствии с его замыслом.

Это еще один из тех моментов, когда я испытываю гораздо большее сочувствие к тем, кто изо всех сил пытается принять Рэнда и доверять ему. Не чувствуй этого к Высшим Лордам Слезы. Но будем надеяться, что эти четверо, по крайней мере, поверят намерениям Рэнда в отношении Илэйн. Интересно, сколько времени потребуется, чтобы все это привести в порядок. Будет ли у Илейн шанс закончить обучение в качестве Айз Седай до того, как она станет королевой Андора? И как она будет сбалансировать необходимость ставить свою страну на первое место, когда у нее также есть обязанности по отношению к Рэнду и к Последней Битве? Она единственная Айз Седай, которая может сделать тер’ангриала , и она понимает их лучше, чем кто-либо.Она также является одним из самых мощных современных ченнелеров. Они будут нуждаться в ней не только для управления.

Я так рада, что Ранд наконец-то узнал правду о своей матери! Повествование уже дало читателю всю информацию, необходимую для того, чтобы собрать ее воедино, хотя я все время забывал об этом, потому что между различными моментами, когда персонажи упоминают Тигрейн и ее исчезновение, слишком много промежутка. Точно так же я постоянно забываю, что Предсказание Элайды о важности правящей семьи Андора в Последней Битве, возможно, на самом деле указывало на важность Тигрейны как матери Ранда, а не на важность Моргейз.К тому времени, как Элайда прибыла в Андор, Тигрейна уже ушла, а Моргейз стала королевой. Она, похоже, не учла, что в тот момент у власти была Королева, а не та, которая находится у власти при приближении Тармона Гай’дона, значение которого она должна была увидеть. . (Хотя все еще возможно, что значение Илэйн было предметом предсказания Элайды — она сильна сама по себе, а также тесно связана с Рэндом и, несомненно, сыграет важную роль в его успехе в Последней битве.)

Осознание Рэндом круговой природы обстоятельств его зачатия и рождения действительно является одним из лучших примеров работы Лабиринта. Не в первый раз возникает вопрос, какую роль в этих событиях должна играть свободная воля — теоретически возможно ли, чтобы Гитара решила не передавать свое послание Тигрейне, или чтобы Тигрейн не поверила ей, или не смогла найти в себе силы? пойти на такую ​​трудную личную жертву? Действовал ли Узор через Гитару, направляя то, что должно было произойти, или Гитара влияла на Узор через свою способность Предсказывать и свой авторитет Айз Седай?

Я не знаю ответа ни на один из этих вопросов, и я уверен, что есть философы Айз Седай, которые посвятили много времени размышлениям на эту тему.Интересно делать это вместе с ними.

Итак, посланник Саммаэля был невероятно жутким. Описание его улыбки и ужаса в его глазах, а также «обрубок носа» и широкий рот напомнили мне о некоторых видениях, которые Баалзамон дал Ранду, Перрину и Мэту в первых двух книгах, а также как описание измученного лица Агинора, когда мы встретили его в Оке Мира . Это также напомнило мне о Падане Мордет-Фейне, особенно до того, как он полностью освоился в своей персоне Ордейта.Все это вызывает ощущение разложения и использования живых тел в качестве марионеток, чего я ожидал от всего, что связано с Темным или любым другим Злом с большой буквы «Е» в этом мире. Здесь это очень эффектно, и Джордан в очередной раз впечатляет своими невероятно яркими и подробными описаниями.

Часть меня думает, что предложение Саммаэля действительно было искренним. Я уверен, что он, конечно, в любой момент откажется от обещания, что его это устраивает, но я понимаю, как можно искренне верить, что этот компромисс выгоден обеим сторонам.У него очень завышенное чувство собственной важности для Льюса Терина, и, кажется, он искренне верит, что должен был стать главным соперником этого человека, поэтому я вижу, как он желает остаться единственным оставшимся Отрекшимся и выйти один на один. с Рэндом, когда придет время. С другой стороны, его комментарий о том, что он оставил «большую долю» земли Рэнду, определенно кажется дымовой завесой — он хочет иметь мощную армию, чтобы предложить ее Темному, когда придет время, и это не будет очень впечатляющим, если Собственная армия Рэнда затмевала армию Саммаэля.И хотя его эго смехотворно, можно подумать, что предупреждение Грендаль о том, что всех Отрекшихся уничтожают и что им нужно держаться вместе, все еще блуждает в его голове, по крайней мере, немного? Он не может быть настолько самонадеянным, чтобы думать, что его победа над Рэндом будет легкой после того, как все остальные Отрекшиеся будут уничтожены.

Ну, нет, наверное. И он, возможно, был наименее вероятным из врагов Рэнда, чтобы напасть на него тайно, поскольку желание встретиться с Льюсом Тэрином было для него такой большой вещью.Отрекшихся трудно сказать, когда их превосходные знания и опыт возьмут верх, а где их высокомерие и жадность подставят их под ноги.

На следующей неделе Ранд отправляется в Кайриэн, где мы узнаем, что он оставил Берелейн главной. На самом деле я еще не закончил главу, поэтому я не уверен, что еще произойдет, или мы охватим только 17 или мы доберемся до 18. Но мне не терпится увидеть, станет ли персонаж Берелейн более интересным теперь, когда у нее больше дел, чем попытки переспать с Рэндом и/или Перрином.А пока я оставляю вам мою любимую строчку Главы 16:

— Я думаю, — медленно сказал Башир, — может быть, Саммаэль получит ответ, когда этот парень не вернется. Я слышал об убийстве гонца, принесшего плохие новости, но никогда не убивал его, чтобы сообщить вам плохие новости».

Я так люблю Башира, его сухой юмор просто подарок. Я полагаю, у Ранда нет перспективы оценить это, но я вижу, что айилы довольно хорошо с ним ладят.

Сайлас К. Барретт очень сочувствует всем персонажам, страдающим от продолжающейся волны тепла, вызванной Темным.Но он также очень благодарен за то, что весна не за горами.

Гормоны с рецепторами клеточной поверхности

Механизм действия: гормоны с рецепторами клеточной поверхности

Белковые и пептидные гормоны, катехоламины, такие как адреналин, и эйкозаноиды, такие как простагландины, находят свои рецепторы, украшающие плазматическую мембрану клеток-мишеней.

Связывание гормона с рецептором инициирует ряд событий, которые приводят к генерации так называемых вторичных мессенджеров внутри клетки (гормон является первым мессенджером).Затем вторичные мессенджеры запускают серию молекулярных взаимодействий, которые изменяют физиологическое состояние клетки. Другим термином, используемым для описания всего этого процесса, является преобразование сигнала .

Структура рецепторов клеточной поверхности

Рецепторы клеточной поверхности являются интегральными мембранными белками и, как таковые, имеют области, которые вносят вклад в три основных домена:

  • Внеклеточные домены: Некоторые из остатков, экспонированных снаружи клетки, взаимодействуют с гормоном и связывают его — другим термином для этих областей является лиганд-связывающий домен .
  • Трансмембранные домены: Гидрофобные участки аминокислот «удобны» в липидном бислое и служат для закрепления рецептора в мембране.
  • Цитоплазматические или внутриклеточные домены: Хвосты или петли рецептора, находящиеся внутри цитоплазмы, реагируют на связывание гормона, взаимодействуя тем или иным образом с другими молекулами, что приводит к образованию вторичных мессенджеров. Таким образом, цитоплазматические остатки рецептора представляют собой эффекторную область молекулы.

Было идентифицировано несколько характерных вариаций в структуре рецепторов. Как показано ниже, некоторые рецепторы представляют собой простые однопроходные белки; многие рецепторы фактора роста принимают эту форму. Другие, такие как рецептор инсулина, имеют более одной субъединицы. Другой класс, включающий бета-адренорецепторы, семь раз пронизывают мембрану.

Молекулы рецепторов не изолированы сами по себе и не зафиксированы в одном месте плазматической мембраны.В некоторых случаях другие интегральные мембранные белки взаимодействуют с рецептором, модулируя его активность. Некоторые типы рецепторов группируются в мембране после связывания гормона. Наконец, как подробно описано ниже, взаимодействие гормон-связанного рецептора с другими мембранными или цитоплазматическими белками является ключом к генерации вторичных мессенджеров и передаче гормонального сигнала.

Системы второго посыльного

Подумайте, что произойдет, если поздно ночью вы заметите горящее здание. Надеюсь, вы наберете 911 или аналогичный номер службы экстренной помощи. Вы бы сообщили диспетчеру о пожаре, а диспетчер, в свою очередь, свяжется и «активирует» несколько пожарных. Затем пожарные быстро приступали к работе, заливая огонь водой, устанавливая блокпосты и тому подобное. Они также, вероятно, активируют других «игроков», таких как полиция и пожарные следователи, которые придут позже, чтобы попытаться определить причину пожара. Важно отметить, что как только пожар потушен (или здание полностью разрушено), пожарные возвращаются на станцию ​​и ложатся спать.

Реакция общества на пожар, по крайней мере в некотором отношении, аналогична системе вторичных мессенджеров, участвующих в действии гормонов. В описанном сценарии вы — «первый вестник», диспетчер — «приемник», пожарные — «вторичные вестники».

В настоящее время в клетках распознаются четыре системы вторичных мессенджеров, как показано в таблице ниже. Обратите внимание, что не только несколько гормонов используют одну и ту же систему вторичных мессенджеров, но и один гормон может использовать более одной системы. Понимание того, как клетки интегрируют сигналы от нескольких гормонов в когерентный биологический ответ, остается сложной задачей.

Второй вестник Примеры гормонов, которые используют эту систему
Циклический AMP Эпинефрин и норадреналин, глюкагон, лютеинизирующий гормон, фолликулостимулирующий гормон, тиреотропный гормон, кальцитонин, паратгормон, антидиуретический гормон
Активность протеинкиназы Инсулин, гормон роста, пролактин, окситоцин, эритропоэтин, несколько факторов роста
Кальций и/или фосфоинозитиды Эпинефрин и норадреналин, ангиотензин II, антидиуретический гормон, гонадотропин-рилизинг-гормон, тиреотропный гормон.
Циклический GMP Природный гормон предсердий, оксид азота

Во всех случаях кажущийся слабым сигнал, генерируемый гормоном, связывающим его рецептор, усиливается внутри клетки в виде каскада действий, который изменяет физиологическое состояние клетки. Ниже представлены два примера систем вторичных мессенджеров, обычно используемых гормонами. В качестве примеров используются глюкагон и инсулин, оба из которых в конечном счете работают через молекулярный переключатель, включающий фосфорилирование белка.Имейте в виду, что в обоих случаях очень сложная система значительно упрощается.

Cyclic AMP Second Messenger Systems

Циклический аденозинмонофосфат (цАМФ) представляет собой нуклеотид, образующийся из АТФ под действием фермента аденилатциклазы. Внутриклеточная концентрация цАМФ увеличивается или уменьшается под действием различных гормонов, и такие колебания влияют на различные клеточные процессы. Одним заметным и важным эффектом повышенных концентраций цАМФ является активация цАМФ-зависимой протеинкиназы, называемой протеинкиназой А.

Протеинкиназа А номинально находится в каталитически неактивном состоянии, но становится активной, когда связывает цАМФ. При активации протеинкиназа А фосфорилирует ряд других белков, многие из которых сами по себе являются ферментами, которые либо активируются, либо подавляются фосфорилированием. Такие изменения ферментативной активности внутри клетки явно меняют ее состояние.

Теперь давайте объединим эту информацию, чтобы понять механизм действия гормона, такого как глюкагон:

  • Глюкагон связывается со своим рецептором на плазматической мембране клеток-мишеней (например,грамм. гепатоциты).
  • Связанный рецептор
  • взаимодействует и через набор G-белков включает аденилатциклазу, которая также является интегральным мембранным белком.
  • Активированная аденилатциклаза начинает преобразовывать АТФ в циклический АМФ, что приводит к повышению внутриклеточной концентрации цАМФ.
  • Высокие уровни цАМФ в цитозоле делают вероятным, что протеинкиназа А будет связываться с цАМФ и, следовательно, будет каталитически активной.
  • Активная протеинкиназа А «бегает по клетке», присоединяя фосфаты к другим ферментам, тем самым изменяя их конформацию и модулируя их каталитическую активность — — — абракадабра, клетка изменилась!
  • Уровни цАМФ снижаются за счет разрушения цАМФ-фосфодиэстеразой и инактивации аденилатциклазы.

В приведенном выше примере действие гормона заключалось в изменении активности ранее существовавших компонентов в клетке. Повышение уровня цАМФ также оказывает важное влияние на транскрипцию некоторых генов.

Тирозинкиназные системы второго посыльного

Рецепторы для некоторых белковых гормонов сами по себе являются протеинкиназами, которые включаются при связывании гормона. Активность киназы, связанная с такими рецепторами, приводит к фосфорилированию остатков тирозина на других белках.Инсулин является примером гормона, рецептором которого является тирозинкиназа.

Гормон связывается с доменами, экспонированными на поверхности клетки, что приводит к конформационным изменениям, активирующим киназные домены, расположенные в цитоплазматических областях рецептора. Во многих случаях рецептор фосфорилирует себя как часть процесса активации киназы. Активированный рецептор фосфорилирует множество внутриклеточных мишеней, многие из которых представляют собой ферменты, которые активируются или инактивируются при фосфорилировании.

Рисунок справа предназначен для изображения тирозинкиназного рецептора, похожего на тот, который используется инсулином. После связывания гормона рецептор претерпевает конформационные изменения, фосфорилирует сам себя, а затем фосфорилирует различные внутриклеточные мишени.

Как было показано в системах вторичных мессенджеров цАМФ, активация рецепторных тирозинкиназ приводит к быстрой модуляции ряда белков-мишеней внутри клетки.Интересно, что некоторыми мишенями рецепторных киназ являются протеинфосфатазы, которые после активации рецепторной тирозинкиназой приобретают способность удалять фосфаты из других белков и изменять их активность. Опять же, кажущееся небольшим изменение из-за связывания гормона усиливается множеством эффектов внутри клетки.

В некоторых случаях связывание гормона с поверхностным рецептором индуцирует каскад тирозинкиназы даже через рецептор, который сам по себе не является тирозинкиназой. Рецептор гормона роста является одним из примеров такой системы: взаимодействие гормона роста с его рецептором приводит к активации цитоплазматических тирозинкиназ с результатами, концептуально сходными с результатами, наблюдаемыми с рецепторными киназами.

Судьба гормонально-рецепторного комплекса

Нормальная функция клеток зависит от каскадов вторичных мессенджеров, являющихся временными событиями. Действительно, ряд видов рака связаны с рецепторами, которые постоянно стимулируют системы вторичных мессенджеров. Одной из важных частей негативной регуляции действия гормонов является то, что рецепторы клеточной поверхности интернализуются. Во многих случаях интернализация стимулируется связыванием гормонов.

Интернализация происходит путем эндоцитоза через структуры, называемые покрытыми ямками.Образовавшиеся эндосомы (иногда называемые «рецепторосомами») могут сливаться с лизосомами, что приводит к разрушению рецептора и гормона. В других случаях оказывается, что гормон диссоциирует, и рецептор рециркулирует путем слияния эндосомы обратно с плазматической мембраной.

Отправить комментарии по адресу [email protected]

для перевода или деградации

EMBO J. 2008 Feb 6; 27(3): 471–481.

Ann-Bin Shyu

1 Факультет биохимии и молекулярной биологии Техасского университета, Медицинская школа, Хьюстон, Техас, США

4 Эти авторы в равной степени внесли свой вклад в эту работу

Miles F1 Wilkinson 9000

2 Кафедра биохимии и молекулярной биологии Техасского университета Онкологический центр им. М. Д. Андерсона, Хьюстон, Техас, США

Амбро ван Хуф

3 Кафедра микробиологии и молекулярной генетики Техасского университета, Медицинская школа, Хьюстон , TX, USA

4 Эти авторы внесли одинаковый вклад в эту работу Молекулярная биология, Онкологический центр им. М. Д. Андерсона Техасского университета, Хьюстон, Техас, США

3 Департамент микробиологии и молекулярной медицины ular Genetics, The University of Texas, Medical School, Houston, TX, USA

4 Эти авторы внесли равный вклад в эту работу

a Кафедра биохимии и молекулярной биологии, Техасский университет, Медицинская школа, 6431 Fannin Street , Хьюстон, Техас 77030, США.Тел.: +1 713 500 6068; Факс: +1 713 500 0652; Электронная почта: [email protected]

Поступила в редакцию 10 ноября 2007 г.; Принято 6 декабря 2007 г.

Авторское право © 2008 г., Европейская организация молекулярной биологииЭта статья цитировалась в других статьях PMC.

Abstract

Контроль качества экспрессии генов у эукариот осуществляется посттранскрипционно на различных уровнях. После транскрипции мРНК связываются с множеством белков на протяжении всей своей жизни. Эти мРНК-белковые комплексы (мРНП) подвергаются серии событий ремоделирования, на которые влияет и/или влияет механизм трансляции и распада мРНК.В этом обзоре мы обсуждаем, как принимается решение о трансляции или деградации цитоплазматической мРНК. В качестве примеров приведены бессмысленно-опосредованный распад мРНК (NMD) и опосредованное микроРНК (миРНК) молчание мРНК. NMD представляет собой механизм надзора, который обнаруживает и устраняет аберрантные мРНК, экспрессия которых может привести к образованию укороченных белков, часто вредных для организма. miRNA-опосредованное молчание мРНК представляет собой механизм, обеспечивающий экспрессию данного белка на надлежащем уровне, обеспечивающем нормальную клеточную функцию.В то время как NMD и miRNA-опосредованное замалчивание мРНК используют разные процессы принятия решений для определения судьбы своих мишеней, на оба сильно влияет динамика mRNP. Кроме того, оба связаны с тельцами процессинга РНК. Обсуждаются возможные способы, вовлекающие 3′-нетранслируемую область и ассоциированные с ней факторы, которые, по-видимому, играют ключевую роль в обоих процессах.

Ключевые слова: микроРНК, распад мРНК, NMD, P-тела, трансляция. для синтеза белка.Как только мРНК попадают в цитоплазму, они транслируются, сохраняются для последующей трансляции или деградируют. мРНК, которые изначально транслируются, позже могут быть временно репрессированы трансляционно. Все мРНК в конечном итоге деградируют с определенной скоростью. Как принимаются эти решения? На протяжении всей своей жизни мРНК связываются с множеством белковых факторов, некоторые из которых стабильно связаны, а другие подвержены динамическому обмену (Moore, 2005). Индивидуальные компоненты мРНК-белкового комплекса (мРНП) могут служить адаптерами, которые позволяют мРНК взаимодействовать с механизмами, обеспечивающими их внутриклеточную локализацию, трансляцию и распад.Т.о., ремоделирование мРНП, вероятно, играет критическую роль в принятии решения о том, следует ли транслировать или деградировать мРНК.

В этом обзоре мы используем два регуляторных механизма, которые контролируют трансляцию и распад мРНК, в качестве примеров, чтобы проиллюстрировать, как может быть принято решение о трансляции или деградации цитоплазматической мРНК. Одним из них является нонсенс-опосредованный распад мРНК (NMD), механизм надзора за РНК, который быстро разрушает мРНК, несущие кодоны преждевременной терминации (PTC). Другим является подавление экспрессии генов, опосредованное микроРНК (миРНК), которое включает спаривание оснований микроРНК с 3′-нетранслируемыми областями (UTR) их мРНК-мишеней.События ремоделирования, вероятно, имеют решающее значение как для опосредованного микроРНК сайленсинга, так и для NMD (Schell et al , 2002; Dreyfuss et al , 2003; Maquat, 2004; Amrani et al , 2006; Chang 4 al et al et al et al , 2006). 2007; Jackson and Standart, 2007; Nilsen, 2007; Pillai и др. , 2007). Мы обсуждаем две разные модели того, как NMD различает нормальные и аберрантные мРНК, несущие PTC, и предлагаем способы их согласования с помощью «унифицированной» модели. Мы описываем то, что известно о том, как miRNAs нацелены на мРНК для быстрого распада и репрессии трансляции, и освещаем недавние исследования, которые начали точно определять, как miRNAs ингибируют инициацию трансляции.В нашем обсуждении механизмов, лежащих в основе NMD и сайленсинга, опосредованного миРНК, мы рассматриваем роль РНК-процессирующих телец (P-тел), недавно идентифицированных цитоплазматических очагов, которые содержат трансляционно молчащие мРНП и могут быть местами захоронения, по крайней мере, некоторых мРНК (Parker and Sheth, 2007; Eulalio et al. , 2007a). Мы также обсуждаем роль деаденилирования в событиях, опосредованных NMD и микроРНК, поскольку потеря поли(А)-хвоста приводит к потере поли(А)-связывающего белка (РАВР), что, в свою очередь, известно, имеет серьезные последствия для обоих трансляция и распад мРНК (Jacobson, 1996; Mangus et al. , 2003).

NMD: консервативный механизм контроля качества эукариотического качества

NMD является консервативным путем, обнаруженным в Saccharomyces Cerevisiae (дрожжи; Losson и Lacrote, 1979), Drosophila Melanogaster (БРОГНА, 1999), Caenorhabdither et al. , 1989), млекопитающих (Maquat et al. , 1981) и растений (van Hoof and Green, 1996). Большинство нормальных эукариотических клеточных мРНК не подвержены NMD, потому что они содержат стоп-кодон только в конце кодирующей области.Напротив, мутантные мРНК, которые имеют стоп-кодон в рамке выше нормального стоп-кодона, распознаются механизмом NMD, что приводит к дестабилизации мРНК. Многие наследственные заболевания человека вызываются мутациями, запускающими NMD (Frischmeyer and Dietz, 1999). Некоторые аллели болезни содержат мутацию, которая напрямую заменяет смысловой кодон на стоп-кодон, а другие вводят стоп-кодон внутри рамки более косвенными путями, такими как вставки, делеции и мутации, которые нарушают сплайсинг РНК, и все это может привести к сдвиг рамки считывания.Было подсчитано, что 30% аллелей заболеваний человека вызывают НМД, и во многих из этих случаев НМД вносит вклад в фенотип заболевания (Frischmeyer and Dietz, 1999; Holbrook et al. , 2004).

Коровые факторы, повсеместно необходимые для NMD (т.е. Upf1p, Upf2p и Upf3p), были первоначально идентифицированы при генетическом скрининге дрожжей (Culbertson et al. , 1980). Впоследствии были идентифицированы гомологи этих белков, и было показано, что они функционируют при NMD у людей (Sun et al. , 1998), D.Melanogaster (Gatfield et al , 2003), C. elegans (Page et al , 1999; Aronoff et al , 2001) и Arabidopsis Thaliana (Hori and Watanabe, 2005; Arciga-Reyes и др. , 2006). Дополнительные гены также необходимы для NMD у высших эукариот (см. ниже). Несмотря на большое количество работ по этим трем белкам Upf, их механизм действия при NMD только начинает пониматься. Единственным белком Upf с четко определенной биохимической функцией является Upf1, который представляет собой АТФ-связывающий белок с активностью РНК-хеликазы.Upf1 может катализировать раскручивание двухцепочечной РНК (dsRNA), но его субстраты не идентифицированы (Czaplinski et al. , 1995; Bhattacharya et al. , 2000). Возможно, Upf1 может катализировать некоторые другие реакции, такие как действие моторного белка, перемещающегося вдоль РНК, или ремоделирование мРНП для терминации трансляции и/или последующей деградации мРНК (см. ниже).

Было предложено много моделей NMD, но они по существу делятся на две большие категории.Первую группу моделей мы будем называть «моделью нижестоящего маркера». Эта модель постулирует центральную роль «маркерных» белков, которые откладываются на мРНК ниже по течению от PTC и выше нормального терминирующего кодона. В нормальной мРНК транслирующие рибосомы и/или ассоциированные с ними факторы замещают эти маркерные белки, так что они не могут запускать NMD (10). Однако в мРНК, содержащей PTC, маркерные белки все еще будут связаны, когда аппарат трансляции распознает PTC.Взаимодействие этих белков-маркеров с факторами терминации трансляции, рекрутируемыми в PTC, приводит к быстрой деградации мРНК (14). Вторая группа моделей будет называться здесь «моделью аберрантного прекращения» (). В этой модели нормальная терминация индуцирует перестройку мРНП, что приводит к стабильности мРНК, тогда как аберрантная терминация, индуцированная ПТК, не вызывает этого ремоделирования мРНП или запускает аберрантное ремоделирование мРНП. В следующих разделах мы обсудим эти две группы моделей, а также некоторые важные особенности, которые, по нашему мнению, могут их объединить.

Модели нонсенс-опосредованного распада. ( A ) Нижний маркер указывает на присутствие маркерного белка, который связан с мРНК ниже преждевременного стоп-кодона. Присутствие этого маркера запускает деградацию мРНК, содержащих ПТК (правая панель). В нормальной мРНК транслирующие рибосомы удаляют нижний маркер из кодирующей области мРНК, тем самым предотвращая нацеливание нормальных мРНК на путь NMD (левая панель). ( B ) Модель аберрантной терминации постулирует, что терминация на нормальном стоп-кодоне (восьмиугольный знак остановки) отличается от терминации трансляции на PTC (аберрантный квадратный знак остановки).Разница в терминации может быть связана с близостью PABP к нормальному стоп-кодону (двунаправленная стрелка) и/или терминация на нормальных стоп-кодонах может происходить быстрее, чем терминация на PTC (часы). Эти две возможности не исключают друг друга. Нормальная терминация на нормальном стоп-кодоне запускает ремоделирование в стабильную мРНП, тогда как аберрантная терминация на ПТК либо предотвращает это ремоделирование, либо запускает ремоделирование в аберрантную мРНП, которая, в свою очередь, запускает деградацию мРНК с помощью различных механизмов.( C ) Модели аберрантного завершения и нисходящего маркера могут быть объединены в одну когерентную модель. В этой модели на разницу между нормальным завершением и аберрантным завершением может влиять ряд различных сигналов. Например, близость к PABP и другим функциям делает завершение более нормальным, тогда как нисходящие маркеры и другие функции делают завершение более аномальным. Преобладание положительных сигналов вызывает нормальную терминацию, которая запускает ремоделирование в стабильный мРНП.Преобладание негативных сигналов либо предотвращает это ремоделирование, либо запускает ремоделирование в аберрантную мРНП.

Модель нижнего маркера для NMD

Одним из наиболее хорошо охарактеризованных субстратов NMD является дрожжевая PTC-несущая мРНК PGK1. Эта мРНК нестабильна, но ее можно стабилизировать, удаляя большую часть последовательности ниже PTC. Повторная вставка небольшой 3′-области мРНК PGK1, называемой нижележащим элементом последовательности (DSE), в делеционный мутант восстанавливает нестабильность мРНК (Peltz et al. , 1993).Дальнейший анализ показал, что гетерогенный ядерный белок RNP, Hrp1p, который способен связываться с DSE in vitro , необходим для NMD мРНК PGK1 (Gonzalez et al. , 2000). Таким образом, Hrp1p рассматривается как нижележащий маркер NMD. Однако неизвестно, необходимы ли DSEs и Hrp1p для быстрого распада всех несущих PTC транскриптов у дрожжей.

В клетках млекопитающих белковый комплекс большого экзона (EJC), откладывающийся примерно на 20–24 нуклеотида (нт) выше экзон-экзонного соединения во время сплайсинга РНК, широко считается маркером, запускающим NMD (Le Hir et al. , 2000).Несколько линий доказательств подтверждают это. Во-первых, нонсенс-кодоны более чем на 55 нуклеотидов выше последнего интрона обычно запускают NMD, тогда как нонсенс-кодоны, вставленные в последний экзон, этого не делают (Zhang et al. , 1998). Во-вторых, истощение компонентов EJC с помощью РНК-интерференции (РНКи) снижает эффективность NMD (Mendell et al , 2002; Palacios et al , 2004; Gehring et al , 2005; Kim et al , 20364; Чан и др. , 2007). В-третьих, EJC остается ассоциированным с мРНК, пока он входит в транслирующий пул мРНК (Kim et al. , 2001; Le Hir et al. , 2001).Наконец, связывание компонентов EJC ниже нормального стоп-кодона запускает NMD (Lykke-Andersen et al. , 2001; Gehring et al. , 2003; Palacios et al. , 2004). Эта модель также согласуется с наблюдением, что нормальный стоп-кодон в мРНК млекопитающих обычно встречается в последнем экзоне (Nagy and Maquat, 1998).

Хотя имеется достаточно данных, подтверждающих его роль в NMD, EJC не всегда необходим для NMD в клетках млекопитающих (Zhang et al , 1998; Rajavel and Neufeld, 2001; Wang et al , 2002; LeBlanc and Beemon, 2004). ; Buhler и др. , 2006).Хотя в некоторых случаях может существовать альтернативный нижестоящий маркер, это не так, по крайней мере, в случае IGμ (Buhler et al , 2006). Интересно, что хотя NMD не сохраняется у прокариот, бактериальные гены могут подвергаться NMD при введении в эукариоты. Например, PTC-содержащая мРНК CAT может подвергаться NMD у мух (Gatfield et al. , 2003), а PTC-содержащая мРНК LacZ может подвергаться NMD у дрожжей (Keeling et al. , 2004). Более того, большинство компонентов EJC не сохраняются в S.cerevisiae . Хотя компоненты EJC консервативны у D. melanogaster и C. elegans , NMD не зависит от сплайсинга у этих организмов (Gatfield et al. , 2003; Longman et al. роль в NMD у этих организмов. Таким образом, оказывается, что NMD может иметь место без известного нижестоящего маркера.

Модель аберрантной терминации для NMD

Модель аберрантной терминации () зависит от представления о том, что существует разница в событиях терминации трансляции, которые происходят в нормальных мРНК и мРНК, содержащих PTC (Amrani et al , 2006).Согласно этой модели нормальная терминация трансляции происходит на нативном стоп-кодоне из-за непосредственной близости нормального 3’UTR, ассоциированных с ним факторов и/или поли(А)-хвоста/РАВР. Это нормальное завершение предлагается для предотвращения возникновения NMD. Субстраты NMD не имеют нормальной 3’UTR сразу после стоп-кодона, потому что трансляция останавливается в кодирующей области. Аномальный 3′-конец не допускает правильных шагов ремоделирования, необходимых для нормальной терминации трансляции. Разница между преждевременным и нормальным прекращением трансляции неясна.Возможно, что терминация трансляции происходит медленнее при преждевременном стоп-кодоне (Hilleren and Parker, 1999) или терминация может быть биохимически разной при нормальном и преждевременном стоп-кодоне (Amrani et al. , 2004). Эта идея подтверждается наблюдениями, что частота терминации (по сравнению с прочитанной трансляцией) варьируется в зависимости от идентичности стоп-кодона (UAA, UAG или UGA) и нуклеотида, следующего за стоп-кодоном, и других характеристик мРНК (Brown et al. ). , 1990; Bonetti и др. , 1995; McCaughan et al. , 1995).Последовательно, стоп-кодоны с низким уровнем считывания вызывают NMD у дрожжей, тогда как кодоны с более высоким уровнем считывания — нет (Keeling et al. , 2004). Связь между реакцией терминации и NMD была также выявлена ​​с использованием трансляционных экстрактов in vitro (Amrani et al , 2004). Анализ отпечатков пальцев позволил обнаружить рибосому в процессе терминации на PTC, но не на нескольких нормальных стоп-кодонах. Кроме того, рибосомы, остановившиеся рядом с PTC, могут быть обнаружены в экстрактах, полученных из штамма дикого типа, но не из штаммов с мутациями upf1 или upf2.Хотя эти наблюдения предполагают, что рибосомы более тесно связаны с PTC и/или высвобождаются из PTC медленнее, чем из нормальных стоп-кодонов, неясно, как эта аномалия приводит к NMD и является ли она консервативной особенностью NMD.

Центральный вопрос относительно модели аберрантной терминации касается того, какая особенность мРНК запускает нормальную или аберрантную терминацию трансляции. Одна из возможностей состоит в том, что правильное расстояние между стоп-кодоном и белками, депонированными на 3’UTR мРНК во время формирования 3′-конца (т.g., PABP) важен для терминации трансляции (Hilleren and Parker, 1999). Это мнение подтверждается наблюдением, что вставка дополнительной последовательности в 3’UTR мРНК может запускать NMD (Buhler et al. , 2006; Behm-Ansmant et al. , 2007). Интересно, что NMD может возникать, когда мРНП 3’UTR и полиаденилирование генерируются независимо от нормального механизма расщепления и полиаденилирования (Baker and Parker, 2006; Behm-Ansmant et al. , 2007). Некоторые наблюдения указывают на то, что белковые факторы, связанные со стоп-кодоном, его расположенной ниже 3’UTR и/или поли(А)-хвостом, также играют критическую роль в детерминации события терминации трансляции.Например, прикрепление PABP ниже PTC задействует фактор терминации и восстанавливает стабильность мРНК (Amrani et al. , 2004; Behm-Ansmant et al. , 2007). Такую стабилизацию также наблюдали при присоединении PABP ниже нормального стоп-кодона нестабильной в других отношениях мРНК (Coller et al. , 1998). Кроме того, когда деаденилирование в клетках млекопитающих нарушается путем нокдауна поли(А)-нуклеазы Caf1 или сверхэкспрессии доминантно-негативного мутанта Caf1, мРНК, содержащая PTC, стабилизируется, предположительно, потому, что PABP остаются связанными с неукороченным поли(A)-хвостом. (N Ezzeddine, D Zheng, C-YA Chen, W Zhu, X He и AB Shyu, неопубликованные наблюдения).Хотя эти данные свидетельствуют о том, что PABP играют ингибирующую роль в предотвращении возникновения NMD, правильное различие между нормальным стоп-кодоном и PTC может происходить в отсутствие поли(А) или PABP. Например, мРНК, содержащая PTC, несущая 3′-конец транскрипта, который не подвергается полиаденилированию (гистоновая мРНК), является субстратом для NMD у млекопитающих (Neu-Yilik et al. , 2001). Сходным образом, у дрожжей NMD может возникать на неаденилированной мРНК или у мутанта, у которого отсутствует PABP (Meaux et al. , 2008).Тем не менее, стоит отметить, что эти наблюдения также согласуются с представлением о том, что существование PABP предотвращает возникновение NMD.

Несмотря на то, что модель аберрантного завершения получила значительную поддержку, некоторые наблюдения не могут быть объяснены этой моделью. Например, модель аберрантного завершения нелегко объясняет роли DSE и EJC в NMD. Кроме того, у организмов с длинной и гетерогенной длиной 3’UTR труднее понять важную роль длины 3’UTR.

Важные особенности, которые могут объединить две модели для NMD

Ни модель «нисходящего маркера», ни модель «аберрантного завершения», по-видимому, не применимы ко всем случаям NMD. Тем не менее, оба они объясняют несколько критических особенностей NMD, большинство из которых связаны с сигналами в PTC или ниже по течению. Здесь мы представляем согласованную модель, которая объединяет элементы каждой модели, чтобы объяснить, как PTC распознаются NMD (). Представляется, что множество признаков (например, природа стоп-кодона UAA, UAG или UGA, нуклеотид, следующий непосредственно за стоп-кодоном, а также последовательности, длина и ассоциированные белки 3’UTR) и факторы (например,g., DSE, EJC, PABP) влияют на характер события завершения. Эти функции могут работать противоположным или дуэльным образом (например, подавлять или стимулировать нормальное или аберрантное завершение). Вполне вероятно, что сочетание различных признаков будет приводить к различиям в терминации трансляции и/или распаде мРНК. В зависимости от транскрипта, клеточных условий и/или экспериментальной установки некоторые из этих функций могут оказаться более важными, чем другие.

От преждевременной терминации к деградации

Когда мРНК распознается как содержащая ПТК, как это приводит к ее распаду? Одной из возможностей является то, что нижестоящий маркер может рекрутировать ферменты распада мРНК на мРНК, непосредственно взаимодействуя с этими ферментами (He and Jacobson, 1995).Однако, насколько нам известно, убедительных доказательств такой возможности нет. Другая возможность передачи сигналов о деградации мРНК заключается в том, что она зависит от стадии ремоделирования мРНП между терминацией и фактическим распадом (Hilleren and Parker, 1999; Amrani et al. , 2004). Например, нормальная терминация трансляции может привести к общему ремоделированию мРНП, которое стабилизирует мРНК. Напротив, аберрантная терминация не может запустить ремоделирование или запустить альтернативное событие ремоделирования мРНП, любое из которых может привести к деградации мРНК.Одной из текущих задач является разработка анализов структуры мРНП, которые могут протестировать эту модель. Кандидатами, которые могут опосредовать эти события ремоделирования, являются хеликазы и GTPase, которые, как сообщалось, играют важную роль в ремоделировании мРНП (Jankowsky and Bowers, 2006; Small et al. , 2006; Bleichert and Baserga, 2007). Напр., возможно, что геликазная активность Upf1 и/или GTPase активность eRF3 играют ключевую роль в стадиях ремоделирования (Kashima et al. , 2006).Поскольку eRF3 является белком, взаимодействующим с PABP (Uchida et al. , 2002), возможно, что взаимодействие между тримером Upf1-eRF1-eRF3 и PABP предотвращает аберрантное ремоделирование мРНП.

Промежуточный этап ремоделирования мРНК, существующий между терминацией трансляции и распадом мРНК, обеспечивает универсальность того, как мРНК в конечном итоге расщепляется NMD. Т.о., в то время как ядро ​​пути NMD, по-видимому, консервативно у всех эукариот, последующие последствия распознавания PTC, по-видимому, различны.У дрожжей декапирование является основным последствием распознавания PTC (т.е. удаление 5′-кэпирующей структуры) (Muhlrad and Parker, 1994), тогда как у мух распознавание PTC приводит к эндонуклеолитическому расщеплению мРНК в непосредственной близости от PTC. аберрантный стоп-кодон (Gatfield and Izaurralde, 2004). У других видов, включая млекопитающих, узнавание PTC приводит к ускоренному деаденилированию (Cao and Parker, 2003; Chen and Shyu, 2003). Другая особенность предполагаемой стадии ремоделирования mRNP заключается в том, что последствия аберрантного или нормального завершения могут не ограничиваться одним специфическим путем распада.Например, распознавание PTC у дрожжей может увеличивать скорость декапирования (Muhlrad and Parker, 1994), снижать трансляцию (Muhlrad and Parker, 1999) или ускорять деаденилирование (Cao and Parker, 2003) и последующую деградацию экзосомой (Cao and Parker, 2003; Митчелл и Толлерви, 2003). Мы пришли к выводу, что ремоделирование мРНП, направленное по множеству признаков ниже стоп-кодона, играет важную роль в контроле качества экспрессии генов. Это повторяющаяся тема посттранскрипционной регуляции, включая miRNA-опосредованное молчание мРНК, как описано в следующем разделе.

микроРНК-опосредованное подавление экспрессии генов

микроРНК представляют собой эндогенные некодирующие РНК длиной ~22 нуклеотида, которые контролируют фундаментальные клеточные процессы у животных и растений. У позвоночных гены микроРНК являются одним из наиболее распространенных классов регуляторных генов (~1% всех генов) (Lim et al , 2003; Bartel, 2004; Bartel and Chen, 2004; Lim et al , 2005). ). После включения в РНК-индуцированный комплекс сайленсинга (RISC) миРНК направляют механизм РНКи к мРНК-мишеням, образуя дуплексы РНК, что приводит к специфичной для последовательности репрессии продуктивной трансляции или распаду мРНК (Ambros, 2004; Bartel, 2004; Zamore and Хейли, 2005).Регуляция miRNAs обычно опосредуется образованием несовершенных гибридов с последовательностями 3’UTR мРНК-мишеней. Данная мРНК-мишень для микроРНК часто имеет несколько сайтов-мишеней для микроРНК. Вычислительные методы, которые были разработаны для предсказания генов-мишеней miRNA, предполагают, что 20-30% генов, кодирующих белки, являются вероятными мишенями miRNAs (Lewis et al. , 2003, 2005; Rajewsky, 2006).

Первоначально считалось, что miRNAs подавляют экспрессию белка исключительно путем ингибирования трансляции мРНК-мишени (Olsen and Ambros, 1999; Seggerson et al. , 2002).Однако недавние исследования показали, что многие микроРНК могут вызывать быстрый распад мРНК-мишеней (Bagga et al. , 2005; Lim et al. , 2005; Behm-Ansmant et al. , 2006; Giraldez et al.

64). ; Wu et al. , 2006; Eulalio et al. , 2007c), что затем косвенно снижает количество вырабатываемого белка. Таким образом, существует, по крайней мере, два основных режима опосредованного миРНК подавления мишеней в клетках многоклеточных животных: опосредованная миРНК репрессия трансляции и опосредованный миРНК распад РНК (Jackson and Standart, 2007; Nilsen, 2007; Pillai et al. , 2007). ).

Механизмы сайленсинга мРНК, опосредованного микроРНК. После включения в RISC для образования miRNP, miRNAs направляют miRNP к их мРНК-мишеням, образуя несовершенные гибриды с последовательностями 3’UTR мРНК-мишеней. Взаимодействие между miRNP и его мРНК-мишенью может способствовать прямому ингибированию инициации трансляции. Альтернативно, miRNP может ускорять деаденилирование мРНК-мишени, что, в свою очередь, подавляет инициацию трансляции или приводит к деградации мРНК. В P-телах мРНК, нацеленные на miRNA, могут быть изолированы от механизма трансляции и деградированы или сохранены для последующего использования.

Механизмы miRNA-опосредованной репрессии трансляции

Механизм репрессии трансляции miRNAs до сих пор является предметом споров. Два различных механизма были предложены для объяснения того, как miRNA-опосредованная репрессия трансляции осуществляется без влияния на обилие мРНК-мишеней. Одна гипотеза предполагает, что miRNAs ингибируют инициацию трансляции, а другая гипотеза предполагает ингибирование «пост-инициаторной» стадии трансляции, которая также вызывает котрансляционную деградацию возникающего пептида.Мы отсылаем читателей к трем недавним превосходным обзорам по этому спорному вопросу (Jackson and Standart, 2007; Nilsen, 2007; Pillai и др. , 2007). Здесь мы сосредоточимся на нескольких новых исследованиях, все из которых указывают на то, что miRNAs могут ингибировать инициацию трансляции.

Было обнаружено, что комплекс miRNA-RISC связан с фактором инициации трансляции, eIF6, который ингибирует присоединение 60S к 40S субъединицам, тем самым предотвращая инициацию трансляции (Chendrimada et al , 2007).Истощение eIF6 либо в клетках человека, либо в клетках C. elegans эффективно устраняет репрессию трансляции, опосредованную микроРНК. В другом исследовании (Thermann and Hentze, 2007) была разработана бесклеточная система с использованием экстрактов эмбрионов D. melanogaster , которые воспроизводили репрессию трансляции, опосредованную miRNA miR-2, не влияя на стабильность мРНК. Авторы обнаружили, что репрессия трансляции зависит от наличия физиологической кэп-структуры m 7 GpppG на 5′-конце мРНК-субстрата, что необходимо для кэп-зависимой инициации трансляции у эукариот (Jacobson, 1996; Gingras ). и др. , 1999).Интересно, что мРНП miR-2 совместно осаждаются с полирибосомами в градиенте сахарозы, но не обладают свойствами полирибосомы. miRNP (тяжелее, чем моносома 80S) все еще могут образовываться, когда образование полирибосом и присоединение 60S рибосомных субъединиц заблокированы, что указывает на то, что мРНК, связанные с этими miRNP, не транслировались. Во многих прошлых исследованиях предполагалось, что совместное осаждение миРНК-содержащих комплексов с полисомами означает, что эти комплексы содержат рибосомы, но исследование Thermann and Hentze (2007) указывает на то, что миРНК-мРНП, совместно осажденные с полисомами, не обязательно транслируются. .

Наблюдение (Kiriakidou et al , 2007) о том, что белки Argonaute, каталитические компоненты RISC (Rand et al , 2005), содержат высококонсервативный мотив, связывающийся со структурой m 7 G-кэпа, также подтверждает что микроРНК ингибируют инициацию трансляции. Возможно, что белки Argonaute конкурируют с eIF4E за связывание кэпа, тем самым предотвращая образование комплекса eIF4F на 5′-кэпе, необходимого для кэп-зависимой инициации трансляции. Это согласуется с наблюдениями, что Ago2, но не его вариант с мутациями в кэп-связывающем мотиве, блокирует трансляцию при искусственном присоединении к 3’UTR мРНК (Pillai et al. , 2004).В двух других исследованиях трансляционная репрессия, опосредованная let-7 микроРНК, была воспроизведена в двух различных бесклеточных системах, созданных с использованием экстрактов, полученных либо из асцитических клеток мыши Кребс-2 (Mathonnet et al. , 2007), либо из клеток человека HEK293F. избыточная экспрессия компонентов пути микроРНК (Wakiyama et al. , 2007). В этих системах и поли(А)-хвост, и 5′-кэп необходимы для репрессии трансляции, что позволяет предположить, что let-7 репрессирует трансляцию, нарушая синергетическое усиление трансляции 5′-кэпом и 3′-поли( Хвост.В совокупности эти исследования in vivo и in vitro подтверждают, что ингибирование инициации трансляции с помощью miRNAs представляет собой один из способов, с помощью которого достигается miRNA-опосредованная репрессия трансляции.

miRNA-опосредованный распад РНК

Несмотря на сходство по длине, miRNAs генерируются с помощью механизма, отличного от механизма образования малых интерферирующих РНК (siRNA). siRNA вырезаются из длинных dsRNA с помощью Dicer (Bernstein et al. , 2001). Антисмысловая цепь siRNA собирается в RISC, который затем расщепляет молекулы РНК с последовательностями, полностью комплементарными siRNA, посредством эндонуклеолитического расщепления (rev. Hannon, 2002; Dykxhoorn et al. , 2003).С др. стороны, miRNAs происходят из нативных генов и образуют несовершенные совпадения с мРНК-мишенями, которые не вызывают эндонуклеолитического расщепления мРНК-мишеней (Ambros, 2004; Bartel, 2004). Вместо этого недавние данные указывают на то, что miRNA-опосредованный распад может запускаться деаденилированием (см. ниже).

Общая картина распада РНК, опосредованного микроРНК, вытекает из недавних исследований на клетках D. melanogaster (Behm-Ansmant et al , 2006), эмбрионах рыбок данио (Giraldez et al , 2006) и клетках человека ( Wu et al. , 2006), а именно, мРНК, на которые направлены miRNAs для деградации, предварительно подвергаются деаденилированию.Было показано, что у рыбок данио miRNA miR-430 нацеливается на распад нескольких сотен материнских мРНК, сначала вызывая быстрое деаденилирование. Это массовое разрушение материнских мРНК необходимо для подавления экспрессии материнской мРНК в белки, чтобы могло продолжаться развитие эмбрионов рыбок данио. Этот пример хорошо иллюстрирует, как замалчивание генов с помощью miRNA осуществляется главным образом на уровне распада мРНК, запускаемого деаденилированием. В клетках Drosophila деаденилирование опосредуется комплексом нуклеаз Ccr4-Caf1-Not poly(A) (Behm-Ansmant et al. , 2006).Однако детальный механизм индуцированного miRNA деаденилирования и участвующих поли(A) нуклеаз, а также многие вопросы, связанные с индуцированным miRNA распадом мРНК у др. организмов, еще предстоит решить. Учитывая, что деаденилирование, индуцированное микроРНК, не обязательно приводит к распаду тела РНК (Behm-Ansmant et al. , 2006), возможно, что деаденилирование является одним из путей, по которому различные способы опосредованного микроРНК молчания мРНК, включая микроРНК, опосредованная трансляционная репрессия и опосредованный микроРНК распад РНК могут конвергировать.Поскольку механизмы только нескольких miRNAs до сих пор были подробно охарактеризованы, универсальность любого способа miRNA-опосредованного сайленсинга мРНК еще предстоит увидеть.

Роль деаденилирования в опосредованной миРНК репрессии трансляции

Цитоплазматические белки PABP взаимодействуют как с поли(А)-хвостами, так и с комплексом eIF4F, связанным с 5′-кэпом, тем самым объединяя два конца мРНК (Kahvejian et al. , 2001; Mangus и др. , 2003). Поскольку это взаимодействие важно как для инициации трансляции, так и для стабильности мРНК (Jacobson, 1996), неудивительно, что поли(А)-хвосты имеют решающее значение для стабильности мРНК и для инициации трансляции.Поскольку одной из основных стадий, на которой miRNAs репрессируют трансляцию, является стадия инициации, возможно, что стимулирование деаденилирования miRNP, образованного на мРНК-мишени для нарушения 5′-3′-концевого взаимодействия, может представлять собой эффективный и непосредственный способ снижения инициации трансляции.

Некоторые наблюдения указывают на то, что деаденилирование является причиной, но не следствием miRNA-опосредованной репрессии трансляции, особенно на стадии инициации. Блокирование инициации трансляции стволовой петлей в 5’UTR мРНК-мишени не устраняет ее быстрое деаденилирование и распад, индуцированные miRNA (Wu et al. , 2006).Mishima et al. (2006) показали, что miR-430 направляет деаденилирование и репрессию трансляции nanos1 мРНК во время эмбриогенеза рыбок данио (Mishima et al. , 2006). Когда мРНК-мишень miR-430 была снабжена неприродным кэпом ApppG, который значительно нарушает нормальную инициацию трансляции, быстрое деаденилирование не влияло. Используя бесклеточную систему, Wakiyama et al. показали, что деаденилирование, запускаемое miRNA let-7 , не требует активной трансляции и может происходить в присутствии циклогексимида, мощного ингибитора трансляции.Более того, let-7 -опосредованное деаденилирование не зависит от структуры 5′-конца мРНК, в то время как кэп и поли(А)-хвост необходимы для репрессии трансляции с помощью let-7 (Wakiyama et al , 2007). Эти наблюдения указывают на то, что let-7 miRNAs рекрутируют комплексы miRNP с let- 7 мишенями для мРНК, что приводит к деаденилированию, которое, в свою очередь, устраняет синергию кэп-поли(А), тем самым репрессируя инициацию трансляции. Это напоминает механизм, с помощью которого репрессия трансляции материнских мРНК осуществляется за счет укорочения поли(А)-хвоста во время созревания ооцитов Xenopus laevis (Richter, 1996; Gray and Wickens, 1998).

Хотя некоторые исследования подтверждают идею, что ускоренное деаденилирование, индуцированное miRNAs, представляет собой основной способ репрессии трансляции мРНК-мишеней без влияния на стабильность мРНК, вряд ли это универсальный механизм, с помощью которого это достигается. Напр., в клетках D. melanogaster блокирование деаденилирования мРНК путем нокдауна поли(А)-нуклеазного комплекса Caf1 не устраняет опосредованную микроРНК трансляционную репрессию (Behm-Ansmant et al. , 2006).В этом случае оказывается, что трансляционная репрессия и деаденилирование являются двумя независимыми событиями при опосредованном miRNA сайленсинге мРНК. Более того, Wu et al. (2006) показали, что трансляция мРНК, лишенных поли(А)-хвоста, остается репрессированной микроРНК, указывая на то, что деаденилирование не является причиной опосредованного микроРНК молчания трансляции в этом случае. В качестве альтернативы возможно, что когда деаденилирование нарушено, альтернативный отказоустойчивый механизм, который также может эффективно блокировать инициацию трансляции (например,g., декапирование) активируется, чтобы обойти требование деаденилирования (Eulalio et al. , 2007c).

Роль Р-телец в контроле качества мРНК

Р-тела представляют собой специфические цитоплазматические фокусы, которые содержат белки, которые, как известно, участвуют в метаболизме мРНК (Kedersha and Anderson, 2007; Parker and Sheth, 2007; Eulalio et al , 2007a ). Эти очаги также называют телами GW, поскольку они несут белки GW182, которые необходимы для опосредованной миРНК репрессии трансляции (Eystathioy et al. , 2002; Jakymiw et al. , 2005; Meister et al. , 2005; Rehwinkel ). et al , 2005; Liu et al , 2005a; Behm-Ansmant et al , 2006).Функция P-тел еще полностью не изучена, но ясно, что мРНК в P-тельцах может либо деградировать, либо повторно входить в транслирующий пул мРНК. Одним из важных аспектов белкового состава P-тела является наличие ферментов, которые способствуют распаду мРНК, включая деаденилазу CCR4 (Sheth and Parker, 2003; Andreas et al. , 2005) и декапирующий комплекс DCP1-DCP2 (Ingelfinger et al., 2005). al , 2002; Sheth and Parker, 2003). Поскольку P-тела содержат 5′-3′-экзонуклеазу XRN1 (Ingelfinger et al. , 2002; Sheth and Parker, 2003), но не имеют экзосомного комплекса (который содержит 3′-5′-экзонуклеазы), вполне вероятно, что мРНК разлагается по пути распада от 5 ‘до 3’ в P-телах.P-тела лишены рибосомных компонентов, большинства факторов инициации трансляции и PABP, что подтверждает представление о том, что P-тела являются сайтами репрессии трансляции. Эта особенность P-телец также указывает на то, что рибосомы, PABP и факторы инициации трансляции должны диссоциировать от мРНП до или сразу после того, как они входят или агрегируют с образованием P-телец.

Помимо общих факторов распада, в Р-телах обнаружены факторы, необходимые для NMD (Upf1, Upf2, Upf3, Smg5 и Smg7), а также мРНК, содержащие PTC (Unterholzner and Izaurralde, 2004; Sheth and Parker , 2006).Первым фактором NMD, локализованным в P-тельцах, был человеческий белок Smg7 (Unterholzner and Izaurralde, 2004). Поскольку известно, что Smg7 связывает фосфорилированный Upf1 (Kashima et al. , 2006), возможно, что после того, как Upf1 обнаруживает PTC-содержащую мРНК, взаимодействие между Smg7 и фосфорилированным Upf1 нацеливает субстрат NMD на P-тела для последующей деградации мРНК. . У дрожжей Upf1, Upf2 и Upf3 локализуются в P-тельцах, а локализация Upf1 усиливается у мутантов upf2 и upf3 (Sheth and Parker, 2006).В совокупности эти наблюдения предполагают, что NMD может возникать в P-телах.

Р-тела также содержат белковые факторы, участвующие в опосредованной миРНК репрессии трансляции, включая белки Argonaute, Rck/p54 и GW182 (обзор в Kedersha and Anderson, 2007; Parker and Sheth, 2007; Eulalio et al. , 2007a). ). Истощение Rck/p54 приводит к потере Р-телец и дефекту опосредованной миРНК репрессии трансляции (Chu and Rana, 2006) и опосредованного миРНК распаду мРНК (Eulalio et al. , 2007c), что позволяет предположить, что P-тела и События, опосредованные микроРНК, взаимосвязаны.Однако ясно, что Р-тела не являются абсолютно необходимыми для функции микроРНК, поскольку истощение Lsm1 или GW182 в клетках человека и клеток D. melanogaster вызывает потерю Р-тел и рассеивает белки Argonaute по всей клетке. не влияет на функцию микроРНК (Chu and Rana, 2006; Stoecklin et al. , 2006; Eulalio et al. , 2007b). Более того, сообщалось, что миРНК связаны с полисомами, что, по-видимому, несовместимо с представлением о том, что P-тела необходимы для подавления трансляционного молчания миРНК-мРНП (Nelson et al , 2004; Maroney et al , 2006; Nottrott). и др. , 2006).Т.о., хотя явно существует тесная связь между P-телами и miRNA-опосредованной репрессией трансляции, точная природа этой связи еще предстоит определить.

Мы предполагаем, что вместо того, чтобы быть необходимыми для распада мРНК и репрессии трансляции, P-тела увеличивают эффективность этих событий. Одна из возможностей заключается в том, что концентрация репрессированных мРНП в Р-телцах облегчает дополнительные этапы ремоделирования мРНП, которые усиливают эту репрессию для длительного хранения в репрессированной форме.В других случаях эти события ремоделирования могут запускать более эффективную деградацию мРНК. Секвестрация в P-тельцах также может обеспечить быстрое средство для предотвращения случайной трансляции аберрантных мРНК, таких как PTC-содержащие транскрипты, до деградации. Более того, поскольку мРНК могут покидать P-тела и снова входить в транслирующийся пул (Brengues et al. , 2005; Bhattacharyya et al. , 2006), P-тела могут функционировать как места временного хранения репрессированных мРНК. Таким образом, P-тела могут регулировать экспрессию генов в различных условиях, а также обеспечивать дополнительную точку контроля качества, где мРНК, которая была ошибочно репрессирована, может быть реактивирована.При этом P-тела обеспечивают дополнительный слой для точной настройки экспрессии генов для поддержания клеточного гомеостаза.

Общие и отличительные черты NMD и сайленсинга, опосредованного miRNA

NMD и сайленсинга, опосредованного miRNA, имеют общие черты, но они явно различаются во многих отношениях. Оба происходят в цитоплазме и приводят к деградации мРНК, но микроРНК обладают дополнительной способностью ингибировать трансляцию, что обеспечивает возможность обратимой репрессии. NMD млекопитающих облегчается событиями ядерной обработки, которые депонируют сигнал EJC (Chang et al , 2007), тогда как неясно, требует ли опосредованное miRNA сайленсинг ядерных событий, отличных от Drosha-опосредованного расщепления, которое генерирует предшественники miRNA (Lee и др. , 2006).Как NMD, так и miRNA-опосредованное замалчивание, по-видимому, требуют последовательных шагов ремоделирования mRNP, повышая вероятность того, что они могут использовать общие события ремоделирования, но это не будет известно до тех пор, пока эти шаги не будут определены лучше. Четкое различие между ними заключается в том, что NMD абсолютно необходима трансляция для определения PTC, тогда как miRNA-опосредованный распад мРНК может происходить в отсутствие трансляции. Как NMD, так и miRNA-опосредованное замалчивание, по-видимому, могут иметь место в P-тельцах (Liu et al. , 2005b; Sheth and Parker, 2006), но доля этих двух событий, происходящих в P-тельцах по сравнению с другими цитоплазматическими сайты могут быть совершенно разными, т.к. ингибирование образования P-телец подавляет NMD, но не оказывает очевидного влияния на miRNA-опосредованное замалчивание (Chu and Rana, 2006; Eulalio et al. , 2007b).Наконец, как NMD, так и miRNA-опосредованное молчание мРНК могут использовать деаденилирование в качестве решающего шага к опосредованию их эффектов, но оба могут также использовать независимые от деаденилирования пути, возможно, в качестве безотказного механизма для достижения своих целей (Yamashita et al ). , 2005; Behm-Ansmant и др. , 2006; Wu и др. , 2006).

Будущие направления

В этой области существует множество вопросов, требующих решения и выяснения того, как миРНК определяют, должны ли они проявлять свое действие посредством репрессии трансляции или распада мРНК, а также как ремоделируются мРНП и какие изменения в компонентах мРНП происходят во время НМД. и miRNA-опосредованное молчание мРНК.Одной из ключевых проблем является разработка методов для независимого изучения многих шагов, необходимых для NMD и miRNA-опосредованного сайленсинга. Теперь очевидно, что в NMD есть несколько отдельных этапов, включая распознавание PTC, ремоделирование mRNP, нацеливание на P-тела и распад мРНК. Следовательно, простого мониторинга устойчивого уровня общей мРНК, включая как ядерную, так и цитоплазматическую мРНК, недостаточно для решения этих сложных проблем. Больше внимания следует уделять наблюдению за кинетикой распада и изучению взаимосвязи предшественник-продукция с помощью таких методов, как пульсация транскрипции (Yamashita et al , 2005; Chen et al , 2007).Хотя факторы Hrp1p, eRF3, PABP и EJC, вероятно, служат для того, чтобы отличить нормальные стоп-кодоны от PTCs, они также могут действовать на последующие события, включая само событие деградации мРНК. Например, анализ терминации трансляции в трансляционных экстрактах дрожжей in vitro показывает, что Upf1p и Upf2p необходимы на стадии распознавания PTC (Amrani et al. , 2004). Кроме того, было показано, что Upf1 преимущественно связывается с субстратами NMD in vivo у червей и S.pombe (Rodriguez-Gabriel et al. , 2006; Johns et al. , 2007). Основной задачей на будущее будет уточнение роли каждого фактора НПРО на различных этапах НПРО.

Ключевой вопрос, оставшийся без ответа относительно miRNAs, заключается в том, что определяет, будут ли они запускать распад мРНК или репрессию трансляции. Возможно, что первичный эффект механизма miRNA заключается в ремоделировании мРНП, чтобы либо избежать образования, либо разрушить структуру замкнутой петли между 5′-кэпом и 3′-поли(А) хвостом, которая является критической для инициации трансляции.Последующие нижестоящие эффекты ремоделирования mRNP могут варьировать в зависимости от физиологических условий, сигналов развития и др. факторов. В некоторых случаях мРНК, нацеленные на miRNA, могут подвергаться быстрой деградации, тогда как в других случаях они могут быть просто репрессированы для трансляции и храниться в P-телах до тех пор, пока они не потребуются позже; например, во время клеточной реакции на стресс. Поскольку Р-тела не являются абсолютно необходимыми для опосредованного миРНК сайленсинга мРНК и нормального распада мРНК, тщательное изучение статуса Р-тел во время эмбриогенеза, роста и дифференцировки клеток, а также при различных болезненных состояниях может пролить новый свет на физиологическую функцию и значение P-тела в регуляции экспрессии генов.

Важность ремоделирования мРНП может быть дополнительно выявлена ​​путем изучения того, когда и как PABP диссоциируют от мРНП. Это особенно важная проблема, которая не была решена, поскольку PABP не присутствуют в P-телах. PABP проявляет очень высокую аффинность связывания со своим РНК-субстратом (в наномолярном диапазоне) (Görlach et al. , 1994; Kuhn and Pieler, 1996; Deardorff and Sachs, 1997), поэтому удаление PABP является особенно сложной задачей, если ремоделирование мРНП оказывает его влияние на репрессию трансляции per se без деаденилирования.Это поднимает вопрос о том, что отталкивает PABP от мРНП, захваченных P-тельцами, чтобы они могли входить в существующие или формировать новые P-тела, что является ключевым шагом, определяющим их судьбу. Будущие исследования, посвященные ключевым изменениям в составе мРНП на каждом критическом этапе ремоделирования мРНК на пути от ядра к цитоплазме, будут иметь решающее значение для понимания того, как регулируются механизмы распада, трансляции и контроля качества РНК. благодаря взаимодействию различных механизмов.

Благодарности

Мы благодарим Chyi-Ying A Chen за критическое прочтение и ценные комментарии к статье, а также Nader Ezzeddine за помощь в оформлении.

Ссылки

  • Амброс В. (2004) Функции животных микроРНК. Nature 431: 350–355 [PubMed] [Google Scholar]
  • Амрани Н., Ганесан Р., Кервестин С., Мангус Д.А., Гош С., Джейкобсон А. (2004) Фальшивая 3′-UTR способствует аберрантной терминации и запускает нонсенс-опосредованную мРНК разлагаться. Nature 432: 112–118 [PubMed] [Google Scholar]
  • Amrani N, Sachs MS, Jacobson A (2006) Ранний вздор: распад мРНК решает проблему трансляции. Nat Rev Mol Cell Biol 7: 415–425 [PubMed] [Google Scholar]
  • Андрей М.А., Ильингельфингер Д., Хайнцманн Р., Ахсель Т., Ривера-Помар Р., Лурманн Р. (2005) Роль eIF4E и транспортера eIF4E в нацеливание мРНП на процессинговые тела млекопитающих.RNA 11: 717–727 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Arciga-Reyes L, Wootton L, Kieffer M, Davies B (2006) UPF1 необходим для нонсенс-опосредованного распада мРНК (NMD) и РНКи в арабидопсисе . Plant J 47: 480–489 ​​[PubMed] [Google Scholar]
  • Aronoff R, Baran R, Hodgkin J (2001) Молекулярная идентификация smg-4, необходимая для наблюдения за мРНК у C. elegans . Gene 268: 153–164 [PubMed] [Google Scholar]
  • Bagga S, Bracht J, Hunter S, Massirer K, Holtz J, Eachus R, Pasquinelli AE (2005) Регуляция микроРНК let-7 и lin-4 приводит к деградация мРНК мишени.Cell 122: 553–563 [PubMed] [Google Scholar]
  • Baker KE, Parker R (2006) Обычное формирование 3′-конца не требуется для распознавания субстрата NMD у Saccharomyces cerevisiae . RNA 12: 1441–1445 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Bartel DP (2004) МикроРНК: геномика, биогенез, механизм и функция. Cell 116: 281–297 [PubMed] [Google Scholar]
  • Bartel DP, Chen CZ (2004) Микроменеджеры экспрессии генов: потенциально широко распространенное влияние многоклеточных микроРНК.Nat Rev Genet 5: 396–400 [PubMed] [Google Scholar]
  • Behm-Ansmant I, Gatfield D, Rehwinkel J, Hilgers V, Izaurralde E (2007) Законсервированная роль цитоплазматического поли(А)-связывающего белка 1 ( PABPC1) в нонсенс-опосредованном распаде мРНК. EMBO J 26: 1591–1601 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Behm-Ansmant I, Rehwinkel J, Doerks T, Stark A, Bork P, Izaurralde E (2006) Деградация мРНК микроРНК и GW182 требует как декапирующие комплексы CCR4:NOT, так и декапирующие комплексы DCP1:DCP2. Genes Dev 20: 1885–1898 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Bernstein E, Caudy AA, Hammond SM, Hannon GJ (2001) Роль бидентатной рибонуклеазы на этапе инициации РНК-интерференции.Nature 409: 363–366 [PubMed] [Google Scholar]
  • Bhattacharya A, Czaplinski K, Trifillis P, He F, Jacobson A, Peltz SW (2000) Характеристика биохимических свойств продукта гена Upf1 человека, который участвует в Нонсенс-опосредованный распад мРНК. РНК 6: 1226–1235 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Бхаттачарья С.Н., Хабермахер Р., Мартин У., Клосс Э.И., Филипович В. (2006) Облегчение репрессии трансляции, опосредованной микроРНК, в клетках человека, подвергшихся стрессу . Cell 125: 1111–1124 [PubMed] [Google Scholar]
  • Bleichert F, Baserga SJ (2007) Долгая извилистая дорога РНК-геликаз.Mol Cell 27: 339–352 [PubMed] [Google Scholar]
  • Bonetti B, Fu L, Moon J, Bedwell DM (1995) Эффективность терминации трансляции определяется синергетическим взаимодействием между восходящими и нисходящими последовательностями в Saccharomyces cerevisiae. . J Mol Biol 251: 334–345 [PubMed] [Google Scholar]
  • Brengues M, Teixeira D, Parker R (2005) Движение эукариотических мРНК между полисомами и цитоплазматическими процессирующими телами. Science 310: 486–489 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Brogna S (1999) Бессмысленные мутации в гене алкогольдегидрогеназы Drosophila melanogaster коррелируют с аномальным процессингом 3′-конца соответствующего пре- мРНК.RNA 5: 562–573 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Brown CM, Stockwell PA, Trotman CNA, Tate WP (1990) Анализ последовательности предполагает, что тетрануклеотиды сигнализируют об окончании синтеза белка у эукариот. Nucleic Acids Res 18: 6339–6345 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Buhler M, Steiner S, Mohn F, Paillusson A, Muhlemann O (2006) EJC-независимая деградация бессмысленного иммуноглобулина-mu мРНК зависит на длине 3′ UTR. Nat Struct Mol Biol 13: 462–464 [PubMed] [Google Scholar]
  • Cao D, Parker R (2003) Вычислительное моделирование и экспериментальный анализ нонсенс-опосредованного распада у дрожжей.Cell 113: 533–545 [PubMed] [Google Scholar]
  • Chan WK, Huang L, Gudikote JP, Chang YF, Imam JS, MacLean JA II, Wilkinson MF (2007) Альтернативная ветвь пути распада, опосредованного нонсенсом. EMBO J 26: 1820–1830 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chang Y-F, Imam JS, Wilkinson MF (2007) Нонсенс-опосредованный путь наблюдения за РНК распада. Ann Rev Biochem 76: 51–74 [PubMed] [Google Scholar]
  • Chen C-YA, Shyu AB (2003) Быстрое деаденилирование, запускаемое нонсенс-кодоном, предшествует распаду тела РНК в цитоплазматическом нонсенс-опосредованном пути распада млекопитающих.Mol Cell Biol 23: 4805–4813 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chen C-YA, Yamashita Y, Chang TC, Yamashita A, Zhu W, Zhong Z, Shyu AB (2007) Универсальные приложения импульсная транскрипция для изучения оборота мРНК в клетках млекопитающих. RNA 13: 1775–1786 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chendrimada TP, Finn KJ, Ji X, Baillat D, Gregory RI, Liebhaber SA, Pasquinelli AE, Shiekhattar R (2007) Молчание микроРНК с помощью RISC рекрутирование eIF6. Nature 447: 823–828 [PubMed] [Google Scholar]
  • Chu CY, Rana TM (2006) Подавление трансляции в клетках человека путем индуцированного микроРНК подавления генов требует RCK/p54.PLoS Биол 4: e210. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Coller JM, Gray NK, Wickens MP (1998) Стабилизация мРНК поли(А)-связывающим белком не зависит от поли(А) и требует трансляции. Genes Dev 12: 3226–3235 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Калбертсон М.Р., Андербринк К.М., Финк Г.Р. (1980) Подавление сдвига рамки у Saccharomyces cerevisiae . II. Генетические свойства супрессоров группы II. Genetics 95: 833–853 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Czaplinski K, Weng Y, Hagan KW, Peltz SW (1995) Очистка и характеристика белка Upf1: фактор, участвующий в трансляции и деградации мРНК .RNA 1: 610–623 [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Дирдорф Дж. А., Сакс А. Б. (1997) Дифференциальные эффекты замен ароматических и заряженных остатков в РНК-связывающих доменах поли(А)-связывания дрожжей белок. J Mol Biol 269: 67–81 [PubMed] [Google Scholar]
  • Dreyfuss G, Kim VN, Kataoka N (2003) Белки, связывающие мессенджер-РНК, и сообщения, которые они несут. Nat Rev Mol Cell Biol 3: 195–205 [PubMed] [Google Scholar]
  • Dykxhoorn DM, Novina CD, Sharp PA (2003) Killing the messenger: короткие РНК, подавляющие экспрессию генов.Nat Rev Mol Cell Biol 4: 457–467 [PubMed] [Google Scholar]
  • Eulalio A, Behm-Ansmant I, Izaurralde E (2007a) P-тела: на перекрестке посттранскрипционных путей. Nat Rev Mol Cell Biol 8: 9–22 [PubMed] [Google Scholar]
  • Eulalio A, Behm-Ansmant I, Schweizer D, Izaurralde E (2007b) Образование Р-тел является следствием, а не причиной РНК- опосредованное молчание генов. Mol Cell Biol 27: 3970–3981 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Эулалио А., Ревинкель Дж., Стрикер М., Ханцингер Э., Ян С.Ф., Доеркс Т., Дорнер С., Борк П., Бутрос М., Изаурральде E (2007c) Специфические для мишени требования к энхансерам декэппинга при опосредованном микроРНК молчании генов.Genes Dev 21: 2558–2570 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Eystathioy T, Chan EKL, Tenenbaum SA, Keene JD, Griffith K, Fritzler MJ (2002) Фосфорилированный цитоплазматический аутоантиген, GW182, связан с уникальная популяция мРНК человека в новых цитоплазматических спеклах. Mol Biol Cell 13: 1338–1351 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Frischmeyer PA, Dietz HC (1999) Бессмысленный распад мРНК в норме и при болезни. Hum Mol Genet 8: 1893–1900 [PubMed] [Google Scholar]
  • Gatfield D, Izaurralde E (2004) Распад матричной РНК, опосредованный нонсенсом, инициируется эндонуклеолитическим расщеплением у Drosophila .Nature 429: 575–578 [PubMed] [Google Scholar]
  • Gatfield D, Unterholzner L, Ciccarelli FD, Bork P, Izaurralde E (2003) Бессмысленно-опосредованный распад мРНК у Drosophila : на пересечении дрожжей и млекопитающих пути. EMBO J 22: 3960–3970 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Gehring K, Neu-Yilik G, Schell T, Hentze MW, Kulozik AE (2003) Y14 и hUpf3b образуют NMD-активирующий комплекс. Mol Cell 11: 939–949 [PubMed] [Google Scholar]
  • Gehring NH, Kunz JB, Neu-Yilik G, Breit S, Viegas MH, Hentze MW, Kulozik AE (2005) Компоненты комплекса экзон-переходов определяют различные пути нонсенс-опосредованный распад мРНК с различными потребностями в кофакторах.Mol Cell 20: 65–75 [PubMed] [Google Scholar]
  • Gingras A-C, Raught B, Sonenberg N (1999) Факторы инициации eIF4: эффекторы рекрутирования мРНК на рибосомы и регуляторы трансляции. Annu Rev Biochem 68: 913–963 [PubMed] [Google Scholar]
  • Giraldez AJ, Mishima Y, Rihel J, Grocock RJ, Van Dongen S, Inoue K, Enright AJ, Schier AF (2006) Zebrafish MiR-430 способствует деаденилированию и клиренс материнских мРНК. Science 312: 75–79 [PubMed] [Google Scholar]
  • Gonzalez CI, Ruiz-Echevarria MJ, Vasudevan S, Henry MF, Peltz MF (2000) Дрожжевой hnRNP-подобный белок Hrp1/Nab4 маркирует транскрипт для нонсенс-опосредованного распад мРНК.Mol Cell 5: 489–499 [PubMed] [Google Scholar]
  • Görlach M, Burd CG, Dreyfuss G (1994) Поли(А)-связывающий белок мРНК: локализация, распространенность и специфичность связывания РНК. Exp Cell Res 211: 400–407 [PubMed] [Google Scholar]
  • Gray NK, Wickens M (1998) Контроль инициации трансляции у животных. Annu Rev Cell Dev Biol 14: 399–458 [PubMed] [Google Scholar]
  • Hannon GJ (2002) РНК-интерференция. Nature 418: 244–251 [PubMed] [Google Scholar]
  • He F, Jacobson A (1995) Идентификация нового компонента нонсенс-опосредованного пути распада мРНК с использованием скрининга взаимодействующих белков.Genes Dev 9: 437–454 [PubMed] [Google Scholar]
  • Hilleren P, Parker R (1999) Наблюдение за мРНК у эукариот: кинетическая проверка правильной терминации трансляции по оценке организации домена мРНП? RNA 5: 711–719 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Ходжкин Дж., Папп А., Пулак Р., Амброс В., Андерсон П. (1989) Новый вид подавления информации у нематоды Caenorhabditis elegans . Genetics 123: 301–313 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Holbrook JA, Neu-Yilik G, Hentze MW, Kulozik AE (2004) Абсурдно-опосредованный распад приближается к клинике.Nat Genet 36: 801–808 [PubMed] [Google Scholar]
  • Hori K, Watanabe Y (2005) UPF3 подавляет аберрантную сплайсированную мРНК в Arabidopsis . Plant J 43: 530–540 [PubMed] [Google Scholar]
  • Ingelfinger D, Arndt-Jovin DJ, Luhrmann R, Achsel T (2002) Белки LSm1-7 человека совместно локализуются с ферментами, разрушающими мРНК, Dcp1/2 и Xrnl. в отдельных цитоплазматических очагах. RNA 8: 1489–1501 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Jackson RJ, Standart N (2007) Как микроРНК регулируют экспрессию генов? Sci STKE 2007: re1.[PubMed] [Google Scholar]
  • Jacobson A (1996) Poly(A) метаболизм и трансляция: модель замкнутой петли. В Tanslational Control, Hershey JWB, Mathews MB, Sonenberg N (ред.), стр. 451–480. Plainview: Cold Spring Harbour Laboratory Press [Google Scholar]
  • Jakymiw A, Lian S, Eystathioy T, Li S, Satoh M, Hamel JC, Fritzler MJ, Chan EK (2005) Разрушение тел GW нарушает интерференцию РНК млекопитающих. Nat Cell Biol 8: 1267–1274 [PubMed] [Google Scholar]
  • Jankowsky E, Bowers H (2006) Ремоделирование рибонуклеопротеиновых комплексов с геликазами DExH/D РНК.Nucleic Acids Res 34: 4181–4188 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Johns L, Grimson A, Kuchma SL, Newman CL, Anderson P (2007) Caenorhabditis elegans SMG-2 селективно маркирует мРНК, содержащие Кодоны терминации преждевременной трансляции. Mol Cell Biol 27: 5630–5638 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Kahvejian A, Roy G, Sonenberg N (2001) Модель замкнутой петли мРНК: функция PABP и белков, взаимодействующих с PABP в трансляция мРНК. Cold Spring Harb Symp Quant Biol 66: 293–300 [PubMed] [Google Scholar]
  • Kashima I, Yamashita A, Izumi N, Kataoka N, Morishita R, Hoshino S, Ohno M, Dreyfuss G, Ohno S (2006) Binding нового комплекса SMG-1-Upf1-eRF1-eRF3 (SURF) в комплекс соединения экзонов запускает фосфорилирование Upf1 и нонсенс-опосредованный распад мРНК.Genes Dev 20: 355–367 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Кедерша Н., Андерсон П. (2007)Стрессовые гранулы млекопитающих и перерабатывающие органы. Methods Enzymol 431: 61–81 [PubMed] [Google Scholar]
  • Keeling KM, Lanier J, Du M, Salas-Marco JOE, Gao LIN, Kaenjak-Angeletti A, Bedwell DM (2004) Негерметичная терминация на преждевременных стоп-кодонах противодействует нонсенс-опосредованный распад мРНК у S. cerevisiae . RNA 10: 691–703 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Kim VN, Yong J, Kataoka N, Abel L, Diem MD, Dreyfuss G (2001) Белок Y14 сообщает цитоплазме положение экзон-экзонные соединения.EMBO J 20: 2062–2068 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Kim YK, Furic L, Desgroseillers L, Maquat LE (2005) Mammalian Staufen1 рекрутирует Upf1 на специфические 3’UTR мРНК, чтобы выявить мРНК разлагаться. Cell 120: 195–208 [PubMed] [Google Scholar]
  • Кириакиду М., Тан Г.С., Лампринаки С., Де Планелл-Сагер М., Нельсон П.Т., Мурелатос З. (2007) Мотив, подобный связыванию кепки мРНК m7G, в пределах репрессии Ago2 человека перевод. Cell 129: 1141–1151 [PubMed] [Google Scholar]
  • Kuhn U, Pieler T (1996) Xenopus поли(А) связывающий белок: функциональные домены в связывании РНК и белок-белковом взаимодействии.J Mol Biol 256: 20–30 [PubMed] [Google Scholar]
  • Le Hir H, Gatfield D, Izaurralde E, Moore MJ (2001) Комплекс соединения экзон-экзон обеспечивает платформу для связывания факторов, участвующих в экспорте мРНК, и бессмыслице. — опосредованный распад мРНК. EMBO J 20: 4987–4997 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Le Hir H, Moore MJ, Maquat LE (2000) Сплайсинг пре-мРНК изменяет состав мРНП: свидетельство стабильной ассоциации белков в экзонах соединения экзонов. Genes Dev 14: 1098–1108 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • LeBlanc JJ, Beemon KL (2004) Несплайсированные геномные РНК вируса саркомы Рауса транслируются и подвергаются нонсенс-опосредованному распаду мРНК перед упаковкой.J Virol 78: 5139–5146 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Lee Y, Han J, Yeom KH, Jin H, Kim VN (2006) Drosha in Primary MicroRNA Processing. Cold Spring Harb Symp Quant Biol 71: 51–57 [PubMed] [Google Scholar]
  • Lewis BP, Burge CB, Bartel DP (2005) Консервативное спаривание семян, часто окруженное аденозинами, указывает на то, что тысячи генов человека являются мишенями для микроРНК. Cell 120: 15–20 [PubMed] [Google Scholar]
  • Lewis BP, Shih IH, Jones-Rhoades MW, Bartel DP, Burge CB (2003) Прогнозирование мишеней микроРНК млекопитающих.Cell 115: 787–798 [PubMed] [Google Scholar]
  • Lim LP, Glasner ME, Yekta S, Burge CB, Bartel DP (2003) Гены микроРНК позвоночных. Science 299: 1540. [PubMed] [Google Scholar]
  • Lim LP, Lau NC, Garrett-Engele P, Grimson A, Schelter JM, Castle J, Bartel DP, Linsley PS, Johnson JM (2005) Анализ микрочипов показывает, что некоторые микроРНК подавляют большое количество мРНК-мишеней. Nature 433: 769–773 [PubMed] [Google Scholar]
  • Liu J, Rivas FV, ​​Wohlschlegel J, Yates JR III, Parker R, Hannon GJ (2005a) Роль компонента P-тела GW182 в функции микроРНК.Nat Cell Biol 7: 1261–1266 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Liu J, Valencia-Sanchez MA, Hannon GJ, Parker R (2005b) MicroRNA-зависимая локализация мРНК-мишеней в P-телах млекопитающих . Nat Cell Biol 7: 719–723 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Longman D, Plasterk RHA, Johnstone IL, Caceres JF (2007) Механические идеи и идентификация двух новых факторов в C. elegans Путь NMD . Genes Dev 21: 1075–1085 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Losson R, Lacroute F (1979) Вмешательство нонсенс-мутаций в стабильность матричной РНК эукариот.Proc Natl Acad Sci USA 76: 5134–5137 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Lykke-Andersen J, Shu MD, Steitz JA (2001) Связь положения экзон-экзонных соединений с наблюдением за мРНК механизм белком RNPS1. Science 293: 1836–1839 [PubMed] [Google Scholar]
  • Мангус Д.А., Эванс М.С., Джейкобсон А. (2003) Поли(А)-связывающие белки: многофункциональные каркасы для посттранскрипционного контроля экспрессии генов. Genome Biol 4: 233 http://genomebiology.com/2003/2004/ 2007/2223 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Maquat LE (2004) Бессмысленно опосредованный распад мРНК: сплайсинг, трансляция и динамика мРНП .Nat Rev Mol Cell Biol 5: 89–99 [PubMed] [Google Scholar]
  • Maquat LE, Kinniburgh AJ, Rachmilewitz EA, Ross J (1981) Нестабильная мРНК бета-глобина при бета-талассемии с дефицитом мРНК. Cell 27: 543–553 [PubMed] [Google Scholar]
  • Maroney PA, Yu Y, Fisher J, Nilsen TW (2006) Доказательства того, что микроРНК связаны с трансляцией матричных РНК в клетках человека. Nat Struct Mol Biol 13: 1102–1107 [PubMed] [Google Scholar]
  • Mathonnet G, Fabian MR, Svitkin YV, Parsyan A, Huck L, Murata T, Biffo S, Merrick WC, Darzynkiewicz E, Pillai RS, Filipowicz W , Duchaine TF, Sonenberg N (2007)Ингибирование микроРНК инициации трансляции in vitro путем нацеливания на кэп-связывающий комплекс eIF4F.Science 317: 1764–1767 [PubMed] [Google Scholar]
  • McCaughan KK, Brown CM, Dalphin ME, Berry MJ, Tate WP (1995) На эффективность терминации трансляции у млекопитающих влияет основание, следующее за стоп-кодоном. Proc Natl Acad Sci USA 92: 5431–5435 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Meaux S, van Hoof A, Baker KE (2008) Распад мРНК, опосредованный бессмысленностью, в дрожжах не требует PAB1 или поли (Хвост. Mol Cell (в печати) [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Meister G, Landthaler M, Peters L, Chen PY, Urlaub H, Luhrmann R, Tuschl T (2005) Идентификация новых белков, связанных с аргонавтом .Curr Biol 15: 2149–2155 [PubMed] [Google Scholar]
  • Mendell JT, ap Rhys CM, Dietz HC (2002) Разделяемые роли для rent1/hUpf1 в измененном сплайсинге и распаде бессмысленных транскриптов. Science 298: 419–422 [PubMed] [Google Scholar]
  • Mishima Y, Giraldez AJ, Takeda Y, Fujiwara T, Sakamoto H, Schier AF, Inoue K (2006) Дифференциальная регуляция мРНК зародышевой линии в соме и зародышевых клетках рыбками данио миР-430. Curr Biol 16: 2135–2142 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Mitchell P, Tollervey D (2003) Путь NMD у дрожжей, включающий ускоренное деаденилирование и опосредованную экзосомами 3′ → 5′ деградацию.Mol Cell 11: 1405–1413 [PubMed] [Google Scholar]
  • Moore MJ (2005) От рождения до смерти: сложная жизнь эукариотических мРНК. Science 309: 1514–1518 [PubMed] [Google Scholar]
  • Muhlrad D, Parker R (1994) Преждевременная терминация трансляции запускает декапирование мРНК. Nature 370: 578–581 [PubMed] [Google Scholar]
  • Muhlrad D, Parker R (1999) Распознавание мРНК дрожжей как «содержащих ерунду» приводит как к ингибированию трансляции мРНК, так и к деградации мРНК: последствия для контроля декапирования мРНК .Mol Biol Cell 10: 3971–3978 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Nagy E, Maquat LE (1998) Правило положения терминирующего кодона в генах, содержащих интрон: когда нонсенс влияет на изобилие РНК. Trends Biochem Sci 23: 198–199 [PubMed] [Google Scholar]
  • Nelson PT, Hatzigeorgiou AG, Mourelatos Z (2004) ассоциация miRNP:mRNA в полирибосомах в линии нейронов человека. RNA 10: 387–394 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Neu-Yilik G, Gehring NH, Thermann R, Frede U, Hentze MW, Kulozik AE (2001) Сплайсинг и формирование 3′-конца в определение нонсенс-опосредованных компетентных человеческих {бета}-глобиновых мРНП.EMBO J 20: 532–540 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Nilsen TW (2007) Механизмы генной регуляции, опосредованной микроРНК, в клетках животных. Trends Genet 23: 243–249 [PubMed] [Google Scholar]
  • Nottrott S, Simard MJ, Richter JD (2006) Человеческая let-7a miRNA блокирует продукцию белка на активно транслирующихся полирибосомах. Nat Struct Mol Biol 13: 1108–1114 [PubMed] [Google Scholar]
  • Olsen PH, Ambros V (1999) Регуляторная РНК lin-4 контролирует сроки развития у Caenorhabditis elegans путем блокирования синтеза белка LIN-14 после инициации. перевода.Dev Biol 216: 671–680 [PubMed] [Google Scholar]
  • Page MF, Carr B, Anders KR, Grimson A, Anderson P (1999) SMG-2 представляет собой фосфорилированный белок, необходимый для наблюдения за мРНК у Caenorhabditis elegans и связанный с Upf1p дрожжей. Mol Cell Biol 19: 5943–5951 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Palacios IM, Gatfield D, St Johnston D, Izaurralde E (2004) Комплекс, содержащий eIF4AIII, необходимый для локализации мРНК и нонсенс-опосредованный распад мРНК. Nature 427: 753–757 [PubMed] [Google Scholar]
  • Parker R, Sheth U (2007) Р-тела и контроль трансляции и деградации мРНК.Mol Cell 25: 635–646 [PubMed] [Google Scholar]
  • Peltz SW, Brown AH, Jacobson A (1993) Дестабилизация мРНК, вызванная преждевременной терминацией трансляции, зависит как минимум от трех цис--действующих элементов последовательности и одного транс -действующий коэффициент. Genes Dev 7: 1737–1754 [PubMed] [Google Scholar]
  • Pillai RS, Artus CG, Filipowicz W (2004) Присоединение белков Ago человека к мРНК имитирует опосредованную miRNA репрессию синтеза белка. RNA 10: 1518–1525 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Pillai RS, Bhattacharyya SN, Filipowicz W (2007) Подавление синтеза белка микроРНК: сколько механизмов? Trends Cell Biol 17: 118–126 [PubMed] [Google Scholar]
  • Rajavel KS, Neufeld EF (2001) Бессмысленный распад мРНК HEXA человека.Mol Cell Biol 21: 5512–5519 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Rajewsky N (2006) Прогнозы мишеней микроРНК у животных. Nat Genet 38 (Suppl): S8–S13 [PubMed] [Google Scholar]
  • Rand TA, Petersen S, Du F, Wang X (2005) Argonaute2 расщепляет анти-направляющую цепь siRNA во время активации RISC. Cell 123: 621–629 [PubMed] [Google Scholar]
  • Rehwinkel JAN, Behm-Ansmant I, Gatfield D, Izaurralde E (2005) Решающая роль GW182 и декапирующего комплекса DCP1:DCP2 в опосредованном микроРНК молчании генов.RNA 11: 1640–1647 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Richter JD (1996) Dynamics of poly(A) добавление и удаление во время разработки. In Translational Control, Hershey JWB, Mathews MB, Sonenberg N (ред.), стр. 481–503. Plainview: Cold Spring Harbor Laboratory Press [Google Scholar]
  • Rodriguez-Gabriel MA, Watt S, Bahler J, Russell P (2006) Upf1, геликаза РНК, необходимая для нонсенс-опосредованного распада мРНК, модулирует транскрипционный ответ на окислительный стресс у делящиеся дрожжи.Mol Cell Biol 26: 6347–6356 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Schell T, Kulozik A, Hentze M (2002) Интеграция сплайсинга, транспорта и трансляции для достижения контроля качества мРНК с помощью нонсенс-опосредованного путь распада. Genome Biol 3: обзоры 1006.1–1006.6 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Seggerson K, Tang L, Moss EG (2002) Две генетические схемы репрессируют гетерохронный ген Caenorhabditis elegans lin-28 после трансляции посвящение.Dev Biol 243: 215–225 [PubMed] [Google Scholar]
  • Sheth U, Parker R (2003) Декапирование и распад матричной РНК происходят в цитоплазматических процессинговых телах. Science 300: 805–808 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Sheth U, Parker R (2006) Нацеливание аберрантных мРНК на цитоплазматические процессинговые тела. Cell 125: 1095–1109 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Small EC, Leggett SR, Winans AA, Staley JP (2006) EF-G-подобная GTPase Snu114p регулирует динамику сплайсосомы, опосредованную Brr2p, a DExD/H бокс-АТФаза.Mol Cell 23: 389–399 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Stoecklin G, Mayo T, Anderson P (2006) Деградация ARE-мРНК требует 5′-3′ пути распада. EMBO Rep 7: 72–77 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Sun X, Perlick HA, Dietz HC, Maquat LE (1998) Мутировавший человеческий гомолог дрожжевого белка Upf1 оказывает доминантно-негативное влияние на распад нонсенс-содержащих мРНК в клетках млекопитающих. Proc Natl Acad Sci USA 95: 10009–10014 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Thermann R, Hentze MW (2007) Drosophila miR2 индуцирует псевдополисомы и ингибирует инициацию трансляции.Nature 447: 875–878 [PubMed] [Google Scholar]
  • Учида Н., Хосино С.И., Иматака Х., Соненберг Н., Катада Т. (2002) Новая роль GSPT/eRF3 млекопитающих, связанных с поли(А)-связывающим белком в Cap/poly(A)-зависимом переводе. J Biol Chem 277: 50286–50292 [PubMed] [Google Scholar]
  • Unterholzner L, Izaurralde E (2004) SMG7 действует как молекулярная связь между наблюдением за мРНК и распадом мРНК. Mol Cell 16: 587–596 [PubMed] [Google Scholar]
  • van Hoof A, Green PJ (1996) Преждевременные нонсенс-кодоны снижают стабильность мРНК фитогемагглютинина зависимым от положения образом.Plant J 10: 415–424 [PubMed] [Google Scholar]
  • Wakiyama M, Takimoto K, Ohara O, Yokoyama S (2007) Опосредованное микроРНК Let-7 деаденилирование мРНК и репрессия трансляции в бесклеточной системе млекопитающих. Genes Dev 21: 1857–1862 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Ван Дж., Гудикоте Дж. П., Оливас О.Р., Уилкинсон М.Ф. (2002) Гранично-независимый полярно-бессмысленный распад. EMBO Rep 3: 274–279 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Wu L, Fan J, Belasco JG (2006) МикроРНК направляют быстрое деаденилирование мРНК.Proc Natl Acad Sci USA 103: 4034–4039 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Yamashita A, Chang TC, Yamashita Y, Zhu W, Zhong Z, Chen CY, Shyu AB (2005) Согласованные действия поли(А)нуклеазы и декапирующий фермент в обороте мРНК млекопитающих. Nat Struct Mol Biol 12: 1054–1063 [PubMed] [Google Scholar]
  • Zamore PD, Haley B (2005) Рибогеном: большой мир малых РНК. Science 309: 1519–1524 [PubMed] [Google Scholar]
  • Zhang J, Sun X, Qian Y, LaDuca JP, Maquat LE (1998) По крайней мере один интрон необходим для нонсенс-опосредованного распада мРНК триозофосфатизомеразы: возможная связь между ядерным сплайсингом и цитоплазматической трансляцией.

Post A Comment

Ваш адрес email не будет опубликован.