Мазин александр библиография: Все книги Александра Мазина | Читать онлайн лучшие книги автора на ЛитРес

Содержание

Персональный сайт — Главная библиография фантастики

 

Публикации в журналах 2011 года: «Если», 2011, № 1-4; «Полдень, XXI век», 2011, № 1-4; Наука и жизнь, №№ 1–3; Машины и Механизмы, № 1-3; Популярная механика, №№ 1–4; Техника–молодежи, №№ 1–3; Химия и жизнь, №№ 1–3. (2011 / Периодика_2011)

 

Публикации в журналах 2007 года: «Если», 2007, №№ 1—12. (356 №№) (2007 / Периодика_2007)

Публикации в журналах 2010 года: «Если»; «Знание–сила. Фантастика», 2010, № 1; «Мир фантастики», № 7; «Полдень, XXI век»; Наука и жизнь, №№ 1–11; Техника–молодежи, №№ 1–10; Химия и жизнь, №№ 1–11. (2010 / Периодика_2010) + (2010 / Периодика_2010 / Рецензии_2010)

 

 

Предварительный список книг фантастических жанров за 2006–2009 годы

В библиографию фантастики включены произведения всех фантастических жанров и посвященная им критическая литература

Только за последние 10 лет вышло порядка 30.

000 книг 

Ряд произведений можно отнести одновременно к нескольким жанрам. Библиография за 2009 год будет включать в себя списки книг, разнесенных по разным жанровым разделам.

 

Предварительный список книг фантастических жанров за 2009 год: 2.252

Предварительный список книг детективных жанров за 2009 год: 2.419

Предварительный список книг приключенческих жанров за 2009 год:

 Предварительный список книг исторических жанров за 2009 год:

Предварительный список книг в жанрах женского любовного романа за 2009 год:

 

 Статистика книгоиздания фантастики. 2009 год

Фантастические жанры

Всего в базе данных 

 

2009 год

2843 

 

2008 год

3001 

 

2007 год

3133

 

2006 год

2644

 

 Всего

11621

 

 

Статистика составлена на основе учтенных на сайте книг и пока содержит около 90% от всех книг фантастических жанров, вышедших в 2009 году. Библиография дополняется и исправляется.

 

100 самых издаваемых авторов фантастических книг (по общему тиражу). 2009 год

 

 

Автор

Всего книг

1000 Общий тираж

 

ФРАЙ, Макс [псевдоним]

41

419

 

ЛИВАДНЫЙ, Андрей Львович (1969—)

24

393

 

КОЭЛЬО, Пауло (1947—) (Бразилия)

15

329600

 

ЛЕВИЦКИЙ, Андрей Юрьевич (1971—)

4

295000

 

ПАНОВ, Вадим Юрьевич (1972—)

23

295

 

КАСТ, Филис Кристина и КАСТ, Кристин (US)

7

286

 

БЕЛЯНИН, Андрей Олегович (1967—)

12

282

 

МАЙЕР, Стефани (1973—) (US)

8

277

 

ОРЛОВСКИЙ, Гай Юлий [псевдоним]

10

266

 

ПЕРУМОВ, Николай Данилович (1963—) >

15

250

 

СТРУГАЦКИЙ, Аркадий Натанович (1925—1991) и СТРУГАЦКИЙ, Борис Натанович (1933—)

66

230

 

ГОЛОВАЧЕВ, Василий Васильевич (1948—)

34

219

 

ЕМЕЦ, Дмитрий Александрович (1974—) >

21

218

 

ВЕРБЕР, Бернар (1961—) (Франция)

13

210

 

ЛУКЬЯНЕНКО, Сергей Васильевич (1968—) (Казахстан)

13

235000

 

ВОЛКОВ, Александр Мелентьевич (1891—1977) +

24

198

 

ОРЛОВ, Алекс [псевдоним] Настоящее имя автора: Дарищев, Вадим

20

198

 

ЗЛОТНИКОВ, Роман Валерьевич (1963—)

5

197000

 

ГЛУХОВСКИЙ, Дмитрий Алексеевич (1979—) >

8

182

 

НОЧКИН, Виктор (1966—)

5

170

 

КРУЗ, Андрей и КРУЗ, Мария

7

164

 

ПЕХОВ, Алексей Юрьевич (1978—) + БЫЧКОВА, Елена Александровна (1976—) и ТУРЧАНИНОВА, Наталья Владимировна (1976—)

10

159

 

ПЕЛЕВИН, Виктор Олегович (1962—)

17

240200

 

БУЛЫЧЕВ, Кир [псевдоним] Настоящее имя автора: Можейко, Игорь Всеволодович (1934—2003) +

33

153

 

КАЛУГИН, Алексей Александрович (1963—)

5

149100

 

БУЛГАКОВ, Михаил Афанасьевич (1891—1940)

25

139

 

ВЕРН, Жюль (1828—1905) (Франция)

31

138

 

ИВАНОВИЧ, Юрий Иванович (1958—)

10

137

 

РОЛЛИНС, Джеймс (1961—) (US)

12

135

 

КИНГ, Стивен (1947—) (US)

35

122

 

ТОЛСТОЙ, Алексей Николаевич (1882—1945)

8

120

 

БРЭДБЕРИ, Рэй (1920—) (US)

25

119

 

ГРИН, Александр [псевдоним] Настоящее имя автора: Гриневский, Александр Степанович (1880—1932)

13

115

 

ПРОЗОРОВ, Александр Дмитриевич (1962—)

7

114

 

ЗОРИЧ, Александр [совместный псевдоним] (Украина)

5

109

 

ХАНТЕР, Эрин (UK)

24

103

 

РОЛИНГ, Джоан Кэтлин (1965—) (UK)

4

100

 

ПАЛИЙ, Сергей Викторович (1979—)

3

97

 

ГАРРИСОН, Гарри (1925—) (US)

23

97

 

ЗВЯГИНЦЕВ, Василий Дмитриевич (1944—)

14

92

 

ЭЛЬТЕРРУС, Иар [псевдоним] Настоящее имя автора: Тертышной, Игорь (1966—) (Израиль)

9

88

 

БРАУН, Дэн (1965—) (US)

9

386

 

ВОЛЬНОВ, Сергей

3

83

 

ЛАДЫЖЕНСКИЙ, Олег Семенович (1963—) и ГРОМОВ, Дмитрий Евгеньевич (1963—) + ОЛДИ, Генри Лайон [совместный псевдоним] (Украина)

19

83

 

СТАЙН, Роберт Лоуренс (1943—) (US)

17

81

 

КОРЧЕВСКИЙ, Юрий Григорьевич (1951—)

7

80

 

БУШКОВ, Александр Александрович (1956—) +

19

78

 

ТОЛКИН, Джон Роналд Руэл (1892—1973) (UK)

21

70

 

ГОГОЛЬ, Николай Васильевич (1809—1852) +

11

70

 

КОРНЕВ, Павел Николаевич (1978—)

4

69

 

КУНЦ, Дин Р. (1945—) (US)

13

68

 

КЭРРОЛЛ, Льюис (1832—1898) (UK)

11

68

 

ЛЕМ, Станислав (1921—2006) (Польша)

23

66

 

РОЙ, Олег Юрьевич (1967—)

3

65

 

УСАЧЕВА, Елена Александровна (1975—)

3

64

 

ЯНССОН, Туве (1914—2001) (Финляндия)

8

62

 

ВОЗНЕСЕНСКАЯ, Юлия Николаевна (1940—)

6

62

 

НИКИТИН, Юрий Александрович (1939—)

12

62

 

СЕМЕНОВА, Мария Васильевна (1958—)

7

60

 

ПРАТЧЕТТ, Терри (1948—) (UK)

16

59

 

ПОСНЯКОВ, Андрей Анатольевич (1967—)

8

58

 

ВАЛЕТОВ, Ян (1963—)

5

57

 

КРАСНИЦКИЙ, Евгений Сергеевич (1951—)

5

57

 

КОЛФЕР, Йон (1965—) (UK)

6

56

 

МАЗИН, Александр Владимирович (1959—)

12

54

 

ГЕЙМАН, Нил (1960—) (UK)

6

50

 

САЛЬВАТОРЕ, Роберт (1959—) (US)

9

48

 

БАХ, Ричард (1936—) (US)

9

47

 

ЮРИН, Денис (1971—)

8

47

 

ПАНКЕЕВА, Оксана Петровна (1967—)

5

47

 

ТАРМАШЕВ, Сергей С. >>

7

47

 

ХАЙНЛАЙН, Роберт Ансон (1907—1988) (US)

11

45

 

САДОВ, Сергей [псевдоним] Настоящее имя автора: Диденко, Сергей Александрович (1975—)

6

44

 

ВОННЕГУТ, Курт (1922—2007) (US)

18

43

 

ДЯЧЕНКО-ШИРШОВА, Марина Юрьевна (1968—) и ДЯЧЕНКО, Сергей Сергеевич (1945—) (Украина)

10

43

 

ЕФРЕМОВ, Иван Антонович (1907—1972) >>

20

43

 

КАЗАКОВ, Дмитрий Львович (1976—)

7

42

 

АНДРЕЕВ, Николай (1965—)

9

41

 

БРЮССОЛО, Серж (1951—) (Франция)

8

41

 

АХМАНОВ, Михаил Сергеевич (1945—)

6

40

 

ЗЮСКИНД, Патрик (1949—) (Германия) +

4

40

 

РАЙС, Энн (1941—) (US)

12

40

 

КУАТЬЕ, Анхель де (1974—)

22

39

 

ЛЕ ГУИН, Урсула (1929—) (US)

9

37

 

ГЛУШКОВ, Роман Анатольевич (1975—)

5

37

 

УЭЛЛС, Герберт Джордж (1866—1946) (UK)

13

36

 

ВЕРКИН, Эдуард Николаевич (1975—)

8

34

 

ЛАТЫНИНА, Юлия Леонидовна (1966—) +

7

34

 

АКУНИН, Борис [псевдоним] Настоящее имя автора: Чхартишвили, Григорий Шалвович (1956—) [всего: 50 книг, общий тираж: 1. 751.000 экз.]

5

59000

 

БЕЛЯЕВ, Александр Романович (1884—1942?) >

9

34

 

ГУЛЯКОВСКИЙ, Евгений Яковлевич (1934—)

6

33

 

ГРОМОВ, Александр Николаевич (1959—)

6

32000

 

УАЙЛЬД, Оскар (1854—1900) (Ирландия)

6

32

 

САПКОВСКИЙ, Анджей (1948—) (Польша)

5

31

 

ТИХОМИРОВ, Артем Юрьевич

5

30

 

ФОМИЧЕВ, Алексей Сергеевич (1970—)

8

30

 

АЛЕКСЕЕВ, Сергей Трофимович (1952—) +

5

29

 

КЛАРК, Артур Чарлз (1917—2008) (UK)

5

28

 

ДОЙЛ, Артур Конан (1859—1930) (UK) + >

7

28

 

ХАРРИС, Джоанн (1964—) (UK)

6

27

 

ЖЕЛЯЗНЫ, Роджер (1937—1995) (US)

6

26000

 

ВАРГО, Александр

8

34100

 

АЗИМОВ, Айзек (1920—1992) (US)

6

24

 

ВЕСТЕРФЕЛЬД, Скотт (US)

6

24

 

МЕЛЬНИКОВ, Руслан (1973—)

5

24

 

ПУЛМАН, Филип (1946-) (UK)

5

24

 

ТРОИСИ, Личия (1980—) (Италия)

6

23

 

ПРОКУДИН, Вадим Геннадьевич (1973—)

5

22

 

ШЕКЛИ, Роберт (1928—2005) (US)

5

22

 

ФЛЕВЕЛЛИНГ, Линн (1958—) (US)

6

21

 

КРАПИВИН, Владислав Петрович (1938—)

5

20

 

СТРАУД, Джонатан (1970—) (UK)

5

20

 

ЗАМЯТИН, Евгений Иванович (1884—1937) +

8

19

 

ПО, Эдгар Аллан (1809—1849) (US) >

6

19

 

ЛУКИН, Евгений Юрьевич (1950—)

5

18

 

МАРТИН, Джордж Р. Р. (1948—) (US)

5

13

 

ОБРУЧЕВ, Владимир Афанасьевич (1863—1956)

5

 

 

 КАРТАСАР, Хулио Флоренсио (1914—1984) (Аргентина)

 9

24000 

 

 

 

 

 

 

100 самых издаваемых авторов фантастических книг (по количеству наименований). 2009 год

 

 

Автор

100 Всего книг

1000 Общий тираж

 1

СТРУГАЦКИЙ, Аркадий Натанович (1925—1991) и СТРУГАЦКИЙ, Борис Натанович (1933—)

66

230

 2

ФРАЙ, Макс [псевдоним]

41

419

 3

КИНГ, Стивен (1947—) (US)

35

122

 4

ГОЛОВАЧЕВ, Василий Васильевич (1948—)

34

219

 5

БУЛЫЧЕВ, Кир [псевдоним] Настоящее имя автора: Можейко, Игорь Всеволодович (1934—2003) +

33

153

 6

ВЕРН, Жюль (1828—1905) (Франция)

31

138

 7

БУЛГАКОВ, Михаил Афанасьевич (1891—1940)

25

139

 8

БРЭДБЕРИ, Рэй (1920—) (US)

25

119

 9

ЛИВАДНЫЙ, Андрей Львович (1969—)

24

393

 10

ВОЛКОВ, Александр Мелентьевич (1891—1977) +

24

198

 

ХАНТЕР, Эрин (UK)

24

103

 

ПАНОВ, Вадим Юрьевич (1972—)

23

295

 

ГАРРИСОН, Гарри (1925—) (US)

23

97

 

ЛЕМ, Станислав (1921—2006) (Польша)

23

66

 

КУАТЬЕ, Анхель де (1974—)

22

39

 

ЕМЕЦ, Дмитрий Александрович (1974—) >

21

218

 

ТОЛКИН, Джон Роналд Руэл (1892—1973) (UK)

21

70

 

ОРЛОВ, Алекс [псевдоним] Настоящее имя автора: Дарищев, Вадим

20

198

 

ЕФРЕМОВ, Иван Антонович (1907—1972) >>

20

43

 

ЛАДЫЖЕНСКИЙ, Олег Семенович (1963—) и ГРОМОВ, Дмитрий Евгеньевич (1963—) + ОЛДИ, Генри Лайон [совместный псевдоним] (Украина)

19

83

 

БУШКОВ, Александр Александрович (1956—) +

19

78

 

ВОННЕГУТ, Курт (1922—2007) (US)

18

43

 

СТАЙН, Роберт Лоуренс (1943—) (US)

17

81

 

ПРАТЧЕТТ, Терри (1948—) (UK)

16

59

 

КОЭЛЬО, Пауло (1947—) (Бразилия)

15

329600

 

ПЕРУМОВ, Николай Данилович (1963—) >

15

250

 

ЗВЯГИНЦЕВ, Василий Дмитриевич (1944—)

14

92

 

ВЕРБЕР, Бернар (1961—) (Франция)

13

210

 

ГРИН, Александр [псевдоним] Настоящее имя автора: Гриневский, Александр Степанович (1880—1932)

13

115

 

КУНЦ, Дин Р. (1945—) (US)

13

68

 

УЭЛЛС, Герберт Джордж (1866—1946) (UK)

13

36

 

БЕЛЯНИН, Андрей Олегович (1967—)

12

282

 

ЛУКЬЯНЕНКО, Сергей Васильевич (1968—) (Казахстан)

13

235000

 

РОЛЛИНС, Джеймс (1961—) (US)

12

135

 

НИКИТИН, Юрий Александрович (1939—)

12

62

 

МАЗИН, Александр Владимирович (1959—)

12

54

 

РАЙС, Энн (1941—) (US)

12

40

 

ГОГОЛЬ, Николай Васильевич (1809—1852) +

11

70

 

КЭРРОЛЛ, Льюис (1832—1898) (UK)

11

68

 

ХАЙНЛАЙН, Роберт Ансон (1907—1988) (US)

11

45

 

ОРЛОВСКИЙ, Гай Юлий [псевдоним]

10

266

 

ПЕХОВ, Алексей Юрьевич (1978—) + БЫЧКОВА, Елена Александровна (1976—) и ТУРЧАНИНОВА, Наталья Владимировна (1976—)

10

159

 

ИВАНОВИЧ, Юрий Иванович (1958—)

10

137

 

ДЯЧЕНКО-ШИРШОВА, Марина Юрьевна (1968—) и ДЯЧЕНКО, Сергей Сергеевич (1945—) (Украина)

10

43

 

ЭЛЬТЕРРУС, Иар [псевдоним] Настоящее имя автора: Тертышной, Игорь (1966—) (Израиль)

9

88

 

САЛЬВАТОРЕ, Роберт (1959—) (US)

9

48

 

БАХ, Ричард (1936—) (US)

9

47

 

АНДРЕЕВ, Николай (1965—)

9

41

 

ЛЕ ГУИН, Урсула (1929—) (US)

9

37

 

БЕЛЯЕВ, Александр Романович (1884—1942?) >

9

34

 

МАЙЕР, Стефани (1973—) (US)

8

277

 

ГЛУХОВСКИЙ, Дмитрий Алексеевич (1979—) >

8

182

 

ТОЛСТОЙ, Алексей Николаевич (1882—1945)

8

120

 

БРАУН, Дэн (1965—) (US)

9

386

 

ЯНССОН, Туве (1914—2001) (Финляндия)

8

62

 

ПОСНЯКОВ, Андрей Анатольевич (1967—)

8

58

 

ЮРИН, Денис (1971—)

8

47

 

Брюссоло, Серж (Франция)

8

41

 

ВЕРКИН, Эдуард Николаевич (1975—)

8

34

 

ФОМИЧЕВ, Алексей Сергеевич (1970—)

8

30

 

ЗАМЯТИН, Евгений Иванович (1884—1937) +

8

19

 

КАСТ, Филис Кристина и КАСТ, Кристин (US)

7

286

 

КРУЗ, Андрей и КРУЗ, Мария.

7

164

 

ПРОЗОРОВ, Александр Дмитриевич (1962—)

7

114

 

КОРЧЕВСКИЙ, Юрий Григорьевич (1951—)

7

80

 

СЕМЕНОВА, Мария Васильевна (1958—)

7

60

 

ТАРМАШЕВ, Сергей С. >>

7

47

 

КАЗАКОВ, Дмитрий Львович (1976—)

7

42

 

ЛАТЫНИНА, Юлия Леонидовна (1966—) +

7

34

 

ДОЙЛ, Артур Конан (1859—1930) (UK) + >

7

28

 

ВОЗНЕСЕНСКАЯ, Юлия Николаевна (1940—)

6

62

 

КОЛФЕР, Йон (1965—) (UK)

6

56

 

ГЕЙМАН, Нил (1960—) (UK)

6

50

 

САДОВ, Сергей [псевдоним] Настоящее имя автора: Диденко, Сергей Александрович (1975—)

6

44

 

АХМАНОВ, Михаил Сергеевич (1945—)

6

40

 

ГУЛЯКОВСКИЙ, Евгений Яковлевич (1934—)

6

33

 

ГРОМОВ, Александр Николаевич (1959—)

6

32000

 

УАЙЛЬД, Оскар (1854—1900) (Ирландия)

6

32

 

ХАРРИС, Джоанн (1964—) (UK)

6

27

 

ЖЕЛЯЗНЫ, Роджер (1937—1995) (US)

6

26

 

ВАРГО, Александр

6

25

 

АЗИМОВ, Айзек (1920—1992) (US)

6

24

 

ВЕСТЕРФЕЛЬД, Скотт (US)

6

24

 

ТРОИСИ, Личия (1980—) (Италия)

6

Продолжение »

Культурное наследие Югры

Internal error org. springframework.core.convert.ConversionFailedException: Unable to convert value 1809553118?lc=ru from type ‘java.lang.String’ to type ‘java.lang.Long’; nested exception is java.lang.NumberFormatException: For input string: «1809553118?lc=ru» at org.springframework.core.convert.support.ConversionUtils.invokeConverter(ConversionUtils.java:40) at org.springframework.core.convert.support.GenericConversionService.convert(GenericConversionService.java:135) at org.springframework.beans.TypeConverterDelegate.convertIfNecessary(TypeConverterDelegate.java:199) at org.springframework.beans.TypeConverterDelegate.convertIfNecessary(TypeConverterDelegate.java:104) at org.springframework.beans.SimpleTypeConverter.convertIfNecessary(SimpleTypeConverter.java:47) at org.springframework.validation.DataBinder.convertIfNecessary(DataBinder.java:526) at org.springframework.web.bind.annotation.support.HandlerMethodInvoker.resolvePathVariable(HandlerMethodInvoker.java:602) at org.springframework.web.bind. annotation.support.HandlerMethodInvoker.resolveHandlerArguments(HandlerMethodInvoker.java:289) at org.springframework.web.bind.annotation.support.HandlerMethodInvoker.invokeHandlerMethod(HandlerMethodInvoker.java:163) at org.springframework.web.servlet.mvc.annotation.AnnotationMethodHandlerAdapter.invokeHandlerMethod(AnnotationMethodHandlerAdapter.java:414) at org.springframework.web.servlet.mvc.annotation.AnnotationMethodHandlerAdapter.handle(AnnotationMethodHandlerAdapter.java:402) at org.springframework.web.servlet.DispatcherServlet.doDispatch(DispatcherServlet.java:771) at org.springframework.web.servlet.DispatcherServlet.doService(DispatcherServlet.java:716) at org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.processRequest(FrameworkServlet.java:647) at org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.doGet(FrameworkServlet.java:552) at javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:624) at javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:731) at org.apache. catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:303) at org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:208) at org.springframework.web.filter.HiddenHttpMethodFilter.doFilterInternal(HiddenHttpMethodFilter.java:71) at org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:76) at org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:241) at org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:208) at org.apache.tomcat.websocket.server.WsFilter.doFilter(WsFilter.java:52) at org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:241) at org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:208) at com.altsoft.kaisa_internet.kaisa_internet_core.util.RequestFilter.doFilter(RequestFilter.java:28) at org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain. internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:241) at org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:208) at org.apache.catalina.core.StandardWrapperValve.invoke(StandardWrapperValve.java:220) at org.apache.catalina.core.StandardContextValve.invoke(StandardContextValve.java:122) at org.apache.catalina.authenticator.AuthenticatorBase.invoke(AuthenticatorBase.java:505) at org.apache.catalina.core.StandardHostValve.invoke(StandardHostValve.java:170) at org.apache.catalina.valves.ErrorReportValve.invoke(ErrorReportValve.java:103) at org.apache.catalina.valves.AccessLogValve.invoke(AccessLogValve.java:956) at org.apache.catalina.core.StandardEngineValve.invoke(StandardEngineValve.java:116) at org.apache.catalina.connector.CoyoteAdapter.service(CoyoteAdapter.java:423) at org.apache.coyote.ajp.AjpProcessor.process(AjpProcessor.java:190) at org.apache.coyote.AbstractProtocol$AbstractConnectionHandler.process(AbstractProtocol.java:625) at org.apache. tomcat.util.net.JIoEndpoint$SocketProcessor.run(JIoEndpoint.java:316) at java.util.concurrent.ThreadPoolExecutor.runWorker(ThreadPoolExecutor.java:1145) at java.util.concurrent.ThreadPoolExecutor$Worker.run(ThreadPoolExecutor.java:615) at org.apache.tomcat.util.threads.TaskThread$WrappingRunnable.run(TaskThread.java:61) at java.lang.Thread.run(Thread.java:724) Caused by: java.lang.NumberFormatException: For input string: «1809553118?lc=ru» at java.lang.NumberFormatException.forInputString(NumberFormatException.java:65) at java.lang.Long.parseLong(Long.java:441) at java.lang.Long.valueOf(Long.java:540) at org.springframework.util.NumberUtils.parseNumber(NumberUtils.java:158) at org.springframework.core.convert.support.StringToNumberConverterFactory$StringToNumber.convert(StringToNumberConverterFactory.java:59) at org.springframework.core.convert.support.StringToNumberConverterFactory$StringToNumber.convert(StringToNumberConverterFactory.java:1) at org.springframework.core.convert. support.GenericConversionService$ConverterFactoryAdapter.convert(GenericConversionService.java:420) at org.springframework.core.convert.support.ConversionUtils.invokeConverter(ConversionUtils.java:37) … 43 more Cookies:

БиблиографиЯ. Книга для таких, как я

БиблиографиЯ

Айзенберг Михаил. Взгляд на свободного художника. М.: Гендальф, 1997.

Базилева Ирина. Бунт художников, или «Вперед в прошлое» // «ХЖ». № 30–31. 2000.

Барабанов Евгений. Возможность невозможного // «ХЖ». № 3. 1994.

Барт Джон. Химеры. СПб.: Азбука, 2000.

Бобринская Екатерина. «Коллективные действия» как институция // «ХЖ». № 23. 1999.

Богемская Ксения. Хо, Ые, Стомаки, Даблоиды // Итоги. 04.02.97.

Бойм Светлана. Конец ностальгии? // НЛО. № 39. 1999.

Бренер Александр. Поэзия и правда сейчас и больше никогда // «ХЖ». № 11. 1996.

Бухло Бенджамин Х. Д. Бойс: сумерки богов // «ХЖ». № 5. 1995

Гаврилов Александр, Ишутина Наталья, Курицын Вячеслав. Быскусство-2. http://www.vesti.ru/kuricyn/2000/06/16/feedback/

Гершкович Евгения. Митьки. Галерея на Трехпрудном; Владимир Архипов. Водка. // «ХЖ». № 18. 1997.

Гройс Борис. Медицинская герменевтика, или Лечение от здоровья. http://ad-marg.rinet.ru/pepper/medicin.htm

Гройс Борис. Московский романтический концептуализм // А-Я. № 1. 1979.

Гройс Борис. Музей и дифференция // «ХЖ». № 13. 1996.

Грузов Роман. Капремонт. — http://www.msk.ru/neo/stolytsa/txt_gruzov.ht ml

Деготь Екатерина. Сердце автора // Динамические пары. М.: ГИФ, 2000.

Ермакова О. П., Земскова Е. А., Розина Р. И. Толковый словарь русского общего жаргона. М.: Азбуковник, 1999.

Ерофеев Андрей. Безумный двойник // «ХЖ». № 26–27. 1999.

Культура русского модернизма. Статьи, эссе и публикации. М., 1993.

Зиник Зиновий. Из чего твой панцырь, черепаха? // «ХЖ». № 23. 1999.

Илюхин Максим. Новый день, много дел // «ХЖ». № 30–31. 2000.

Ковалев Андрей. Существует ли Кабаков? — http://members. tripod.com/~kri titizer/kabak.htm

Курицын Вячеслав. Быскусство. — http://www.vesti.ru/ kuricyn/2000/06/06/byskusstvo/

Курицын Вячеслав. Русский литературный постмодернизм. http://www.guelman.ru/slava/postmod/1.html

Курицын Вячеслав. Симуляция диалога // Динамические пары. М.: ГИФ, 2000.

Литичевский Георгий. Заметки о 90-х. Как важно быть серьезным // «ХЖ». № 28–29. 2000.

Литичевский Георгий. Огюрн и Харуспекс в лучах заходящей ауры // «ХЖ». № 18. 1997.

Лялина Ольга. Более странно, чем рай. — http://www.zhurnal.ru/5/olialia.htm

Лялина Ольга, Шульгин Алексей. Сети для художника // КоммерсантЪ-Daily. 27.09.96.

Мазин Виктор. О журнале «Кабинет». — http://www.vavilon.ru/metatext/mj4 0/cabinet.html

Мазин Виктор. О некрореализме. — http://www.msk.ru/neo/ stolytsa/txt_mazin.html

Мазин Виктор. Хождения по Венецианской Бьеннале // «ХЖ». № 25. 1999.

Мизиано Виктор. Институционализация дружбы // «ХЖ». № 28–29. 2000.

Мизиано Виктор. Культурные противоречия тусовки // «ХЖ». № 25. 1999.

Немиров Мирослав. А. С. Тер-Оганян: жизнь, судьба и контемпорари арт. М.: ГИФ, 2000.

Молок Николай, Ромер Федор. Наше все // Итоги. № 41. 1998.

Осмоловский Анатолий. Искусство простое, как мычание // «ХЖ». № 26–27. 1999.

Осмоловский Анатолий. Как было и как будет? // «ХЖ». № 25. 1999.

Пепперштейн Павел. НОМА-НОМА // «ХЖ». № 4. 1994.

Пепперштейн Павел. В Росси тайны больше нет // Exlibris НГ. № 43. 1999.

Поплавский Борис. Дадафония. М.: Гилея, 1999.

Пригов Дмитрий. Что надо знать о концептуализме. http://www.guelman.ru/critics/prig.htm

Райскин Максим. О жизни и о том, как она вредна искусству. http://alternativa.msk.ru/neo/stolytsa/txt_raiskin.html

Ромер Федор. Таня Антошина «Музей женщины»; Марина Герцовская «Женщины-самолеты» // Итоги. № 47. 1998.

Рубинштейн Лев. Интервью для журнала «Уральская новь» // Уральская новь. № 2. 1998.

Руднев Вадим. КАК БЫ и НА САМОМ ДЕЛЕ. // «ХЖ». № 18. 1997.

Рыклин Михаил. Роза Ветров // Словарь терминов московской концептуальной школы. М.: Ad Marginem, 1999.

Сальников Владимир. Произведение искусства и автор в 90-е годы // «ХЖ». № 25. 1999.

Словарь терминов московской концептуальной школы // Сост. Андрей Монастырский. М.: Ad Marginem, 1999.

Софронов Владислав. Вернисаж. // «ХЖ». № 23. 1999.

Тупицын Виктор. Коммунальный (пост)модернизм. М.: Ad Marginem, 1998.

Тупицын Виктор. Разговор с И. Кабаковым. Arts, 1991.

Хартен Юрген. Куратор в демократическом обществе // «ХЖ». № 7. 1995.

Чахал Гор. Объект искусства // «ХЖ». № 13.

Шинкарев Владимир. Митьки. СПб.: Красный матрос, 1998.

Якут Александр. У нас ушанка — подлинное, а матрешка — фальсификация. Интервью Полит. Ру. — http://www.polit.ru/ documents/154271.html

Van Dijk Teun. Ideology: A Multidisciplinary Approach. London: Sage, 1998.

Данный текст является ознакомительным фрагментом.

Продолжение на ЛитРес

Из собрания Юрия Минаевича Пирютко

В 2017 г. наследники Ю. М. Пирютко передали в дар Центру петербурговедения библиотеки им. В.В. Маяковского книги из его библиотеки. Коллекция книг стала частью Анциферовской библиотеки и доступна исследователям в Центре петербурговедения.

Юрий Минаевич Пирютко (27 мая 1946 г. – 3 октября 2014 г.) – историк, литератор, искусствовед, краевед, экскурсовод, начальник отдела мемориальной скульптуры Государственного музея городской скульптуры (1977–2014). Лауреат Анциферовской премии (1996).

Из автобиографии Юрия Минаевича Пирютко:

«Родился в Ташкенте 27 мая 1946 г. и с ноября того же года переселился в Сиверскую под Ленинградом. Затем жил в Гатчине, а последние двадцать восемь лет провел в Ленинграде (с 1991 — Санкт-Петербурге).
В 1969 г. окончил искусствоведческое отделение исторического факультета Ленинградского государственного университета им. А. А. Жданова с дипломной работой, посвященной художнику-любителю князю Г. Г. Гагарину, вице-президенту Академии художеств и одному из создателей русско-византийского стиля. С большой благодарностью помню о своей университетской наставнице Элеоноре Петровне Гомберг-Вержбинской, привлекшей меня к обработке материалов для сборника «Константин Андреевич Сомов. Дневники, письма, суждения современников». Книга вышла в 1979 г., после пятилетних издательских мытарств и, к сожалению, без имени основного составителя. Гомберг-Вержбинская уехала в Вену, что в то время было достаточным основанием для рассыпания набора. Чтобы спасти многолетний труд, она великодушно сняла свое имя с титула.
Интерес к «серебряному веку» выразился в наших совместных занятиях с Владимиром Генриховичем Перцем историей артистических подвалов «Привал комедиантов» и «Бродячая собака». На эту тему мы не только подготовили несколько статей, но провели вечера памяти «Собаки» и «Привала» в Театральном музее и Музее истории Ленинграда (в начале 1970-х были живы еще посетители этих заведений).
Одновременно я готовил к изданию путеводитель по Гатчине- городу и его окрестностям, в то время не входившим в обычные туристские маршруты. Перейдя из Гатчинского краеведческого музея на работу в Музей истории города, я опубликовал несколько статей по архитектуре социалистического Ленинграда, обратившись, в частности, к уникальным блокадным дневникам А. С. Никольского.
Больше четверти века являясь хранителем музейных некрополей Государственного музея городской скульптуры, в основном пишу на темы, связанные с историей Александро-Невской лавры как первого российского пантеона. Особенно для меня важна книга «Исторические кладбища Петербурга» (1993 г.). Общий интерес к этой теме с Александром Валерьевичем Кобаком воплотился в организации осенью 1987 г. общественной комиссии «Некрополь» при Ленинградском отделении Советского фонда культуры, проведении нескольких циклов лекций: в Центральном лектории, Доме журналиста, собиравших в конце 1980-х годов полные залы. Наша работа была отмечена в 1996 г. только что учрежденной Анциферовской премией.
Не могу не упомянуть, что давно витавшая в воздухе идея сооружения памятника первым строителям Санкт-Петербурга вблизи Сампсониевского собора была осуществлена в 1995 г. при моем деятельном участии. Увы, это творение архитектора В. Б. Бухаева и художника М. М. Шемякина, стало жертвой акта вандализма, исполнители которого известны, к сожалению, только его заказчикам.
В 1995 г. мной был получен заказ от бизнесмена Валентина Леоновича Ковалевского, издавшего с моей помощью книгу «Душа деянием жива», Работая над книгой, я заинтересовался ресторанным делом как частью петербургской культуры, результатом чего стал обширный исторический очерк, включенный в названный труд.
В 1998 г. вышла моя книга «Другой Петербург» (под псевдонимом «К. К. Ротиков»), которая неожиданно оказалась замеченной многими. Этот квази-путеводитель, конечно, принадлежит не к научно-популярной, а просто к художественной, развлекательной литературе, и на этом основании не включен в общий библиографический список моих работ…»

(По материалам сайта «Анциферовская библиотека»).

Анциферовская библиотека

Из собрания Юрия Минаевича Пирютко

1.       Акимова Софья Владимировна (1887-1972). Воспоминания певицы / С. Акимова ; [предисл. и общ. ред. Г. Тигранова]. — Ленинград : Музыка, 1978. — 95, [1] с. : ил., портр. — Библиогр. в подстроч. примеч. — 20000 экз.

2.       Ампир в России : краткое содержание докладов Третьей Царскосельской научной конференции / Гос. музей-заповедник «Царское Село» ; [науч. ред.: В. М. Файбисович]. - Санкт-Петербург : [б. и.], 1997. — 92, [4] с. + 1 бр. — Библиогр. в подстроч. примеч. — 300 экз.

3.       Ананьич Б. В. Банкирские дома в России, 1860-1914 гг. : очерки истории частного предпринимательства / Б. В. Ананьич ; Акад. наук СССР, Ин-т истории СССР, Ленингр. отд-ние. — Ленинград : Наука. Ленинградское отделение, 1991. — 196, [2] с. — Библиогр. в примеч. в конце гл. — Указатели: с. 170-197. — 6200 экз.

4.       Анциферовская библиотека : аннотированный каталог / Междунар. благотворит. фонд спасения Петербурга-Ленинграда, Балт. гуманитар. фонд ; [сост.: И. С. Галеева, А. В. Кобак, А. Д. Марголис]. — Санкт-Петербург : Издательство Чернышева, 1996. — 63 с. ; 1.

5.       Архитекторы — строители Санкт-Петербурга : середина XIX — начала XX века : справочник / Междунар. благотворит. фонд спасения Петербурга-Ленинграда, Гос. музей истории Санкт-Петербурга ; под общ. ред. Б. М. Кирикова. — Санкт-Петербург : Пилигрим, 1996. — 397 с.

6.       Александр Карлович Беггров : произведения художника в собрании Центрального военно-морского музея : каталог / под общ. ред. Е. Н. Корчагина. — Санкт-Петербург : ЦВММ, 2001. — 55 с. : ил., цв. ил. — Библиогр.: с. 53. — Указ. кораблей и судов: с. 54.

7.       Богданов Игорь Алексеевич (1949-2010). Unitas, или Краткая история туалета / Игорь Богданов. — Москва : Новое литературное обозрение, 2007. — 179, [2] с., [8] л. ил. — (Культура повседневности). — Библиогр.: с. 172-176. — Предм.-имен. указ.: с. 177-180. — 3000 экз.

8.       Богданович Евгений Васильевич (1829-1914). Род князей Барятинских : исторический очерк : по поводу 250-летнего юбилея г. Симбирска / [Е. Богданович. — Репр. воспр. изд. 1898 года]. — Ленинград : Ингрия, 1990. — 45, [3] с., 1 л. генеал. табл. : ил. — Список ил. в конце кн. — 50000 экз. Авт. указан в конце предисл.

9.       Боголюбов Алексей Николаевич. Августин Бетанкур (1758-1824) : ученый, инженер, архитектор, градостроитель / А. Н. Боголюбов, В. Е. Павлов, Н. Ф. Филатов. - Нижний Новгород : ННГУ, 2002. — 219 с., [16] л. цв. ил., портр., факс. : ил. - Библиогр. в конце гл. — 2000 экз.

На тит.л.: Посвящается 300-летию Санкт-Петербурга

10.   Борзин Борис Федорович. Росписи петровского времени = Decorative art of the time of Peter the great : [альбом] / Б. Ф. Борзин. — Ленинград : Художник РСФСР, 1986. — 206, [2] с. : ил., цв. ил. — Рез. англ. — Список ил. рус., англ. — Библиогр.: с. 200-201 и в примеч.: с. 195-199. — Список ил.: с. 202-204. — 30000 экз.

11.   Бурлаков Андрей Вячеславович. Гатчинские названия по-свойски: прогулки по городу от Мадрида до Карлухи с пикником на Вшивой горке и обедом в ресторане Коряга [Текст] : первый народный микротопонимический словарь / Андрей Бурлаков. - Гатчина : [б.и.], 2013. — 62, [2] с., [4] л. цв. ил. : ил. — Др. кн. авт. на 4-й с. обл. — Предм. указ.: с. 63-64. — 500 экз.

12.   Бурлаков Андрей. Записки гатчинского краеведа / Андрей Бурлаков. — Гатчина : [б. и.], 2012 — .

Кн. 1. — 2012. - 239 с., [8] л. цв. ил., портр., факс. : ил. — Библиогр. в подстроч. примеч. - На 4-й с. обл. др. кн. авт.

Содержание:

Знаменитые Гатчинцы минувших столетий. — С. 5-26

Все профессии старой Гатчины. — С. 27-48

Легенды и были старой Гатчины. — С. 49-82

Сады и парки старой Гатчины. — С. 83-102

Гатчина снимается в кино. — С. 103-118

Памятные адреса гатчинского края. — С. 119-138

Прогулки по окрестностям Гатчины. — С. 139-160

Суйда. Пушкин. Лукоморье. — С. 161-184

По старинным аллеям дворянских поместий. — С. 185-200

13.   Бурлаков Андрей. Туристические маршруты Гатчинского района : южное направление / Андрей Бурлаков. — Гатчина : СЦДБ, 2003. — 118 с., [12] л. ил., портр.

14.   Валера, Хуан (1824-1905). Письма из России / Хуан Валера. — Санкт-Петербург : Сервантес, 2001. — 437, [2] с. — (Библиотека испанской литературы). — 1000 экз.

15.   Вектор наблюдения : городская скульптура : [фотоальбом] / Гос. музей гор. скульптуры ; авт. вступ. ст. Ю. М. Пирютко. — Санкт-Петербург : Союз-Дизайн, 2007. — 134 с. : ил.

16.   Великие имена Музейного некрополя : деятели музыкальной культуры / Гос. музей гор. скульптуры ; сост.: А. А. Алексеев, Ю. М. Пирютко ; фотографии: И. А. Садова ; дизайн: Ю. В. Загороднева. — Санкт-Петербург : [б. и.], 2010. — 55, [1] с. : цв. ил., портр.

17.   Великие имена Музейного некрополя : художники : скульпторы, архитекторы, живописцы и графики / Гос. музей гор. скульптуры ; сост.: А. А. Алексеев, А. Н. Латышев, Ю. М. Пирютко ; дизайн: Ю. В. Загороднева. — Санкт-Петербург : [б. и.], 2013. — 49, [7] с. : цв. ил., портр.

18.   Великие имена Музейного некрополя : деятели российского театра / Гос. музей гор. скульптуры ; сост.: Ю. М. Пирютко, А. А. Алексеев, А. Н. Латышев ; дизайн; Ю. В. Загороднева. - Санкт-Петербург : [б. и.], 2013. — 59 с. : цв. ил., портр. — На обл. подзаг.: Актеры.

19.   Академия русского балета им. А. Я. Вагановой (Санкт-Петербург).

Вестник Академии Русского балета имени А. Я. Вагановой : [сборник статей] / Акад. рус. балета им. А. Я. Вагановой, Учеб.-метод. об-ние вузов Рос. Федерации по образованию в обл. хореограф. искусства. — Санкт-Петербург : Абрис, 1993 — . - Загл. на обл. и тит. л.: Vaganova a Ballet Academy. Saint-Petersburg. Russia.

Вып. 13. - Санкт-Петербург : Академия русского балета им. А. Я. Вагановой, 2004. — 246, [1] с. — Библиогр. в конце ст. — 500 экз.

Содержание:

Асылмуратова А. А. Особенности конкурса в Лозанне / А. А. Асылмуратова. — С. 9-12

Васильева Марина Александровна. Педагогические секреты Н. Г. Легата / М. А. Васильева. — С. 15

Кадырматова Неля Рустемовна. Наследие Николая Легата / Н. Р. Кадырматова. — С. 16-28

Мирзоян Альберт Амасиевич. Продолжая традиции / А. А. Мирзоян. — С. 29-36

Цырулева Валентина Павловна. О выразительности рук / В. П. Цырулева. — С. 37-41

Русанов Петр Михайлович. Разновидности tours en l’air / П. М. Русанов. — С. 42-46

Надиров Л. Н. В Академии Русского балета им. А. Я. Вагановой впервые открывается аспирантура / Л. Н. Надиров, В. М. Исаков. — С. 49-58

Фомкин Алексей Викторович. Хореографическое образование на стыке тысячелетий / А. В. Фомкин. - С. 59-68

Зозулина Наталия Николаевна. «Сильвия» / Н. Н. Зозулина. — С. 69-76

Федорченко Ольга Анатольевна. Директор императорских театров А. М. Гедеонов на страже финансовых интересов России / О. А. Федорченко. — С. 77-87

Жукова Татьяна Игоревна. Чудо-балет Леонида Якобсона / Т. И. Жукова. — С. 88-98

Дунаева Наталия Лазаревна. Финский хореограф — воспитанник Петербургского театрального училища / Н. Л. Дунаева. — С. 101-114

Горина Татьяна Николаевна. «В Петербурге мы сойдемся снова» / Т. Н. Горина. — С. 117-122

Линникова Нина Яковлевна. «Город больной, неласковый город любимый, ты меня мучишь, как сон…» / Н. Я. Линникова. — С. 123-134

Байгузина Елена Николаевна. Петербургские адреса Л. С. Бакста / Е. Н. Байгузина. — С. 135-142

Линникова Нина Яковлевна. Навсегда в альма-матер / Н. Я. Линникова. — С. 143-147

Пирютко Юрий Минаевич. По поводу одного памятного знака / Ю. М. Пирютко. — С. 148-150

Студенческая научная конференция, посвященная 185-летию со дня рождения Мариуса Петипа. — С. 153

Кадырматова Неля Рустемовна. Балет Мариуса Петипа «Голубая георгина» (1860) / Н. Р. Кадырматова. — С. 154-165

Смирнова Наталия Владимировна. «Бабочка» (1874) / Н. В. Смирнова. — С. 166-175

Особенности образовательного и воспитательного процессов в Академии Русского балета им. А. Я. Вагановой : конференция. — С. 176

Надиров Л. Н. Вступительное слово / Л. Н. Надиров. — С. 177

Васильева Марина Александровна. Проблемы профессиональной подготовки кадров / М. А. Васильева. - С. 178

Головина Татьяна Ильинична. Концепция воспитания в Академии Русского балета / Т. И. Головина. - С. 178-179

Илларионов Борис Александрович. Театральная и балетная жизнь Петербурга. Формирование кругозора и художественного вкуса в условиях открытого культурно-информационного пространства / Б. А. Илларионов. — С. 180-181

Погребная Наталья Васильевна. Балет и информационные технологии / Н. В. Погребная. — С. 182-183

Грибанова Мария Александровна. Сценическая практика и ее роль в профессиональном становлении артиста балета / М. А. Грибанова. — С. 184

Котова Наталья Александровна. «И, взвившись, занавес шумит» / Н. А. Котова. — С. 187-192

Головина Татьяна Ильинична. Константин Васильевич Шатилов / Т. И. Головина. — С. 195-197

Головина Татьяна Ильинична. Елизавета Ивановна Чеснокова / Т. И. Головина. — С. 198

Соколов-Каминский, Аркадий Андреевич. Отзвуки былого / А. А. Соколов-Каминский. — С. 201-204

Горина Татьяна Николаевна. Эккерман Баланчина / Т. Н. Горина. — С. 205-210

Ступников Игорь Васильевич. В лондонских книжных магазинах / И. В. Ступников. — С. 211-216

Список выпускников исполнительского факультета Академии Русского балета 2003 года. — С. 219-221

Список выпускников педагогического факультета Академии Русского балета 2003 года. — С. 222-223

Спектакли и концертные выступления студентов Академии Русского балета. — С. 224-228

Выставки и мероприятия в музее Академии Русского балета. — С. 229-231

Курсы повышения квалификации педагогов классического танца средних и старших классов. — С. 232-236

Информация о присвоении ученых званий педагогам Академии Русского балета. — С. 237

20.   Воронцовы — два века в истории России : международная конференция : Санкт-Петербург, 24-26 марта 1993 г. : к 250-летию Е. Р. Дашковой : тезисы докладов российских участников / Рос. акад. наук, С.-Петерб. науч. центр ; ред. М. М. Сафонов. — Санкт-Петербург : Б. и., 1993. — 50 с. — Библиогр.: с. 37-50 (125 назв.). — 500 экз.

21.   Выдающиеся ученые за 220 лет (1773-1993) : [сборник статей] / Гос. ком. Рос. Федерации по высш. образованию, Санкт-Петерб. гос. горный институт им. Г. В. Плеханова (Техн. ун-т). — Санкт-Петербург : Б. и., 1993. — 162 с. : ил., портр. - Библиогр. в конце ст. — 3000 экз.

Есть автограф: Текст: Уважаемому Юрию Минаевичу от главного редактора и одного из авторов, 11. 10.19.

22.   Государственный музей городской скульптуры : краткий путеводитель / [сост.: Ю. М. Пирютко]. - Санкт-Петербург : ЭГО, 2002. — 35, [1] с. : цв. ил. — (Сокровища мировой культуры ; вып. 3).

23.   Дары Эрмитажу : каталог выставки / Гос. Эрмитаж ; [отв. ред.: В. А. Суслов ; предисл.: Б. Б. Пиотровский]. — Ленинград : Государственный Эрмитаж, 1989. — 114, [3] с. : ил., цв. ил., портр. — Индекс дарителей: с. 8-12. — На обл.: Государственному Эрмитажу 225 лет. — 10000 экз.

24.   200 лет семье Бенуа в России : юбилейный сборник / С.-Петерб. о-во «Дом Бенуа», Гос. музей истории Санкт-Петербурга ; [ред.-сост. В. А. Фролов]. — Санкт-Петербург : [б. и.], 1994. — 30, [1] с. : ил., портр. — 3000 экз.

25.   «Дело» митрополита Вениамина (Петроград, 1922 г.) / [предисл. И. Авдиева]. — Москва : Студия «ТРИТЭ» : Российский архив, 1991. — 94, [1] с. : портр. — Библиогр. в примеч.: с. 90-93. — 100000 экз.

26.   Дивин Василий Афанасьевич. В. М. Головнин / В. А. Дивин. — Санкт-Петербург : [б. и.], 2011. — 58 с. : цв. ил., карты, портр., факс. — Библиогр. в подстроч. примеч. - Репр. изд.: Географгиз, 1951.

Есть автограф: Экз. 1164886 : Текст: Уважаемому Юрию Минаевичу с наилучшими пожеланиями от И. А. Головнина. 21.03.2011

27.   Ермонская Вера Васильевна. Советская мемориальная скульптура : к истории становления и развития русского советского художественного надгробия / В. В. Ермонская. - Москва : Советский художник, 1979. — 213, [1] с. : ил. — Библиогр. в примеч.: с. 203-210. — Список ил.: с. 211-214. — 10000 экз.

28.   В. А. Жуковский и русская культура его времени : сборник научных статей. - Санкт-Петербург : Всероссийский музей А. С. Пушкина, 2005. — 207 с. : ил., портр. — Библиогр. в конце ст.

Содержание:

Янушкевич Александр Сергеевич. Итоги и проблемы издания Полного собрания сочинений и писем В. А. Жуковского / А. С. Янушкевич. — С. 6-17

Ветшева Н. Ж. В творческой лаборатории В. А. Жуковского : замысел поэмы «Весна» / Н. Ж. Ветшева. — С. 18-27

Кощиенко И. В. Эпиграф в творчестве В. А. Жуковского / И. В. Кощиенко. — С. 28-31

Вулих Н. В. «Пэан 12-го года» — «Певец во стане русских воинов» / Н. В. Вулих. — С. 32-39

Будко Анатолий Андреевич. Лечение и исход ранения князя П. И. Багратиона : (современный взгляд) / А. А. Будко, Л. Д. Иванова. — С. 40-43

Березкина Светлана Вениаминовна. Антиблудовская эпиграмма Пушкина / С. В. Березкина. — С. 44-46

Матяш С. А. Переносы (enjambements) в поэмах Пушкина и Жуковского / С. А. Матяш. — С. 47-60

Ильин, Павел Владимирович. К истории взаимоотношений В. А. Жуковского и декабристов : новые свидетельства и интерпретации / П. В. Ильин. — С. 61-77

Седова Галина Михайловна. План последней квартиры Пушкина, выполненнный В. А. Жуковским, и его новые копии / Г. М. Седова. — С. 78-88

Айзикова Ирина Александровна. Круг религиозно-философского чтения В. А. Жуковского в 1840-е годы / И. А. Айзикова. — С. 89-100

Иезуитов А. Н. Жуковский о «душе» природы как предмете искусства / А. Н. Иезуитов. - С. 101-107

Шор Т. Архив и библиотека Зейдлицев в Историческом архиве Эстонии / Т. Шор. — С. 108-118

Введенская Е. А. Портреты В. А. Жуковского в фонде живописи / Е. А. Введенская. — С. 119

Пролет Е. В. Портреты В. А. Жуковского в фонде оригинальной графики / Е. В. Пролет. — С. 120

Иванова Е. Н. Материалы Жуковского в фонде печатной графики / Е. Н. Иванова. — С. 121-125

Флерова Г. В. Скульптурные портреты В. А. Жуковского / Г. В. Флерова. — С. 126

Марченко Н. А. К вопросу об иконографии Жуковского / Н. А. Марченко. — С. 127-130

Мисаилиди Л. Акварели Жуковского в собрании Литературного музея Пушкинского Дома / Л. Мисаилиди. — С. 131-137

Коршунова М. Ф. Гуаши Жуковского в собрании Государственного Эрмитажа / М. Ф. Коршунова. — С. 138-142

Толстова А. Контурный рисунок в творчестве В. А. Жуковского как художественно-эстетический феномен / А. Толстова. — С. 143-150

Карпова E. В. Жуковский и русские скульпторы его времени / E. В. Карпова. — С. 151-160

Старк Вадим Петрович. Кабинет В. А. Жуковского, или Групповой портрет в интерьере / В. П. Старк. — С. 161-167

Агамалян Лариса Георгиевна. Цареучительство как феномен русской культуры эпохи Просвещения / Л. Г. Агамалян. — С. 168-174

Иезуитова Раиса Владимировна. «Вот как русский поэт говорит с царем…» / Р. В. Иезуитова. — С. 175-180

Локотникова Инна Георгиевна. В. А. Жуковский и царское семейство в Собственном Его Императорского Величества дворце : (по материалам Камер-фурьерских журналов за 1826-1841 гг.) / И. Г. Локотникова. — С. 181-186

Добровольская Е. Б. «Это педагогическая поэма». Жуковский — воспитатель своих детей / Е. Б. Добровольская. — С. 187-196

Алексеев А. А. Мемориал Жуковского в Александро-Невской лавре : новые материалы / А. А. Алексеев. — С. 197-201

Ефремова Н. Н. Произведения монументальной скульптуры в Санкт-Петербурге, посвященные В. А. Жуковскому / Н. Н. Ефремова. — С. 202-205

29.   За гранью стиля: оригинальное в искусстве : материалы научной конференции / [общ. подгот. изд.: А. Н. Спищанский]. — Санкт-Петербург : Принт-лайн, 2007. — 139, [2] с. : ил. — Библиогр. в конце ст. — 500 экз.

Содержание:

Акимова А. И. К истории ансамбля Воронцовского дворца : усадьба, «замок мальтийских рыцарей», военно-учебное заведение / А. И. Акимова. — С. 3-17

Бахарева Юлия Юрьевна. «Воплощенная Утопия» : (усадьба Грузино как «Идеальный город») / Ю. Ю. Бахарева. — С. 18-29

Ибрагимзаде К. Нетрадиционная застройка турецкого города Карса конца XIX — начала XX в. / К. Ибрагимзаде. — С. 30-39

Никитина А. Б. Об «Объявлении» Н. А. Львова в Санкт-Петербургских ведомостях № 82 : (вторник октября дня 1791 г.) / А. Б. Никитина. — С. 40-47

Петрова О. В. «Причудливый вкус» Павла I в проектной графике конца XVIII века из собрания Гатчинского дворца / О. В. Петрова. — С. 48-66

Сафонов М. М. «Памятник удачного выстрела» или? : (опыт масонской интерпретации павильона Орла в Гатчинском парке) / М. М. Сафонов. — С. 67-103

Спащанский А. Н. Прототипы Гатчинского дворца / А. Н. Спащанский. — С. 83-103

Спащанский А. Н. «Турецкий стиль» в русском искусстве второй половины XVIII века / А. Н. Спащанский. — С. 104-117

Федорова В. В. Березовый домик — пастораль Гатчинского парка / В. В. Федорова. — С. 118-127

Хмелева Е. Н. Две скульптуры Белого зала / Е. Н. Хмелева. — С. 128-139

30.    «Одним дыханьем с Ленинградом» : сборник научных статей / Гос. музей гор. скульптуры. — Санкт-Петербург : Союз-Дизайн, 2005. — 202, [1] с. : ил., портр., факс. — Библиогр. в конце ст. — 200 экз.

Содержание:

Ефремова Надежда Николаевна. Государственный музей городской скульптуры в годы Великой Отечественной войны : (по материалам архива ГМГС) / Н. Н. Ефремова. — С. 8-32

Ефремова Надежда Николаевна. «Монументальная пропаганда» в блокадном Ленинграде / Н. Н. Ефремова. — С. 33-46

Пирютко Юрий Минаевич. Музей городской скульптуры в годы блокады : (по материалам ЦГАЛИ Санкт-Петербурга) / Ю. М. Пирютко. — С. 47-66

Канина Л. В. Николай Викторович Успенский — создатель и первый хранитель музейного некрополя / Л. В. Канина. — С. 67-74

Лермонтова Ирина Михайловна. Блокадный город в графических произведениях : (из собрания ГМГС) / И. М. Лермонтова. — С. 75-88

Рытикова Вера Валентиновна. Скульптура В. В. Исаевой на выставке, посвященной 60-летию Победы в Великой Отечественной войне / В. В. Рытикова. — С. 89-93

Рытикова Вера Валентиновна. Об утраченной скульптуре Адмиралтейства и о намерениях ее воссоздания / В. В. Рытикова. — С. 97-106

Рытикова Вера Валентиновна. История проектирования памятника Д. И. Менделееву на Менделеевской линии в Ленинграде / В. В. Рытикова. — С. 107-116

Рытикова Вера Валентиновна. От замысла до воплощения — полстолетия / В. В. Рытикова. — С. 117-122

Евсеева Рита Самуиловна. К истории создания памятника Александру Невскому в Петербурге / Р. C. Евсеева. — С. 123-136

Алексеев Александр Анатольевич. Мемориал В. А. Жуковского / А. А. Алексеев. — С. 137-146

Алексеев Александр Анатольевич. «Музыкальная скрижаль» / А. А. Алексеев. — С. 147-154

Алексеев Александр Анатольевич. «Пушкинская» коллекция в музейном некрополе / А. А. Алексеев. — С. 155-162

Столярова Ирина Александровна. На волне памяти / И. А. Столярова. — С. 163-168

Столярова Ирина Александровна. Лавра в годы войны / И. А. Столярова. — С. 169-176

Столярова Ирина Александровна. Волковские кладбища в мемуарной и художественной литературе / И. А. Столярова. — С. 177-186

Столярова Ирина Александровна. «Одним дыханьем с Ленинградом…» : экскурсия по одноименной выставке / И. А. Столярова. — С. 187-199

Образ Ф. М. Достоевского в монументальной пластике Петербурга [Текст] / Гос. музей гор. скульптуры ; сост.: А. А. Алексеев, И. М. Лермонтова, Ю. М. Пирютко. - Санкт-Петербург : Государственный музей городской скульптуры, 2011. — 48 с. : ил., цв. ил.

31.   Заболотская Надежда Сергеевна. Картинная галерея. Живопись Голландии и Фландрии / [Надежда Сеогеевга Заболотская]. — Санкт-Петербург : Государственный Эрмитаж, 2002. - 29, [1] с. : цв. ил., портр. — (Шедевры искусства в залах Нового Эрмитажа). - На обл.: 150 лет Новому Эрмитажу.

32.   Заповедная зона Ленинграда: вчера, сегодня, завтра : материалы научно-практической конференции / Гос. музей истории Ленинграда, Ленингр. отд-ние Сов. фонда культуры ; [редкол.: А. Д. Марголис (отв ред.) и др.]. — Ленинград : [б. и.], 1989. — 91 с. — Библиогр.: с. 90-91. — 700 экз.

33.   Интерконтакты : из истории международных художественных связей Ленинграда / Петербурга последней четверти XX столетия : сборник статей и материалов : сборник подготовлен по материалам выставки «Альтернативный музей: художественные связи Петербурга с Западом в 80-90-е годы в Государственном Русском музее. / Центр. гос. арх. Санкт-Петербурга [и др.]. — Санкт-Петербург : ГРМ, 2000. — 72 с. : ил., портр., факс. — Библиогр. в примеч. в конце ст.

Содержание:

Туркина Олеся. Джон Кейдж в Петербурге / О. Туркина. — С. 7-19

Андреева Екатерина. История подарков Энди Уорхола ленинградским художника / Е. Андреева. — С. 21-25

Хлобыстин Андрей. Контакты художников Ленинграда-Петербурга и США. Конец 1980-х — начало 90-х годов / А. Хлобыстин. — С. 27-41

Потапов Игорь. Петербургские художники / И. Потапов, А. Корзухин. — С. 43-49

Мазин Виктор. Далекие близкие свидания в кабинете / В. Мазин. — С. 50-65

Новиков Тимур. Международные отношения Новой Академии Всяческих Искусств 1985 по 1990 гг. / Т. Новиков. — С. 67-68

Потапов Игорь. «Туризм» Тимура Новикова / И. Потапов. — С. 69-72

34.   Исторический музей как зеркало перемен, 1991-2011 : материалы Международной научно-практической конференции, 5-6 октября 2011 г. / Рос. Федерация, М-во культуры, Гос. музей полит. истории России ; [отв. ред. А. М. Кулегин]. — Санкт-Петербург : ГМПИР : Норма, 2012. — 150, [8] с., [8] л. цв. ил. — Библиогр. в примеч. в конце ст. — 500 экз.

Содержание:

Куренышев Андрей Александрович. История повседневности : историографические и музейно-экспозиционные проблемы / А. А. Куренышев. — С. 10-14

Кулегин Алексей Михайлович. Использование метода исторических аналогий в экспозиционном показе переломных периодов отечественной истории : (из опыта экспозиционной деятельности ГМПИР) / А. М. Кулегин. — С. 15-23

Калмыков Александр Георгиевич. Музейный предмет и музейная коммуникация в инсталляционном пространстве новой экспозиции ГМПИР / А. Г. Калмыков. — С. 24-32

Смирнов, Александр Павлович. Интерпретация исторического прошлого в музейном пространстве : границы возможного и допустимого / А. П. Смирнов. — С. 33-42

Кондратьева Ирина Николаевна. Исторические музеи и новые технологии / И. Н. Кондратьева. — С. 43-48

Бочкарева Ольга Владимировна. Соловецкий музей и тема «Сталинские репрессии в СССР» / О. В. Бочкарева. — С. 49-54

Гданец Кордула. Выставка «Июнь 1941 года: на изломе» : роль и значение биографий в сохранении исторической памяти народа / К. Гданец. — С. 55-63

Брыляева Татьяна Михайловна. Историческая среда в мемориальной экспозиции : опыт и перспективы взаимодействия Дома-музея В. И. Ленина с образовательными учреждениями / Т. М. Брыляева. — С. 64-71

Горелов Владимир Витальевич. Историографический фундамент экспозиций Государственного музея «Смольный» : прошлое и будущее / В. В. Горелов. — С. 72-78

Федоренко Тамара Григорьевна. От музея В. И. Ленина до «Разночинного Петербурга» / Т. Г. Федоренко, И. В. Осипова. — С. 79-82

Макубаева Динара Сайлаувна. Музеи как центры изучения и пропаганды роли личности в истории : (на примере Музея Первого Президента Республики Казахстан) / Д. С. Макубаева. — С. 83-88

Александрова, Светлана Сергеевна. Музей истории профсоюзного движения : опыт создания и перспективы развития / С. С. Александрова. — С. 89-97

Ходаковская Светлана Андреевна. Традиции и инновации научно-фондовой и учетно-хранительской деятельности Музея политической истории России в переходный период (1991-2011 гг.) / С. А. Ходаковская. — С. 98-104

Бойко Алексей Алексеевич. Музейная интерпретация образа вождей в выставочном проекте и формирование коллекции современного искусства ГМПИР / А. А. Бойко. — С. 105-111

Баранова Наталья Петровна. Интерактивные программы в музейно-педагогическом пространстве Детского исторического музея / Н. П. Баранова, Д. Б. Иоффе. — С. 112-116

Лысенко Елена Анатольевна. Особенности политической культуры старших школьников Санкт-Петербурга : (из опыта проведения музейной ролевой игры «Мы выбираем — нас выбирают». 2006-2011 гг.) / Е. А. Лысенко, М. А. Сенина. — С. 117-128

Чекоданова Ксения Константиновна. Развитие форм музейной коммуникации : опыт ГМПИР / К. К. Чекоданова — С. 129-134

Трубкин Михаил Яковлевич. История Отечества учит, воспитывает, развивает личность : (из опыта работы ГМПИР с учащимися гимназий и лицеев по программе «Политическая история России XIX-XX вв.») / М. Я. Трубкин. — С. 135-141

Музыченко Василиса Алексеевна. Институт кураторства: куратор, общество, выставка / В. А. Музыченко. — С. 142-148.

35.   Санкт-Петербургская епархия — 2009 : справочник / [Моск. Патриархат, С.-Петерб. епархия ; под ред. прот. Александра Сорокина]. — 2-е изд., испр. и доп. — Санкт-Петербург : Ладан, 2008. — 416 с., [18] л. карт : ил. — (Епархии России ; вып. 1, т. 1). - Поисковые указ.: с. 295-361.

36.   История дореволюционной России в дневниках и воспоминаниях : аннотированный указатель книг и публикаций в журналах / науч. рук., ред. и введ. П. А. Зайончковского ; Гос. б-ка СССР им. В. И. Ленина [и др.]. — Москва : Книга.

Т. 1 : XV-XVIII века / [науч. ред.: А. Зайончковский ; сост.: Г. А. Главатских и др.]. — 1976. — 300, [1] с. — Указатели: с. 237-293. — 7000 экз.

37.   Казанский кафедральный собор, 1811-2011 / [гл. ред. Н. П. Феофанова]. — Санкт-Петербург : Арт Деко, 2011. - 39, [8] с. : ил., цв. ил., портр.

38.   Казанское кладбище в Царском Селе / Ист.-лит. музей г. Пушкина ; [сост.: А. Ю. Егоров, Н. А. Давыдова]. - Царское Село : Пушкинский муниципальный совет, 2003. — 126, [2] с. : ил., портр. — (Петербургский некрополь). — Библиогр. в конце ст. — 998 экз.

39.   Католическая Церковь в Санкт-Петербурге и Ленинградской области: краткие исторические очерки / [сост. С. Г. Козлов-Струтинский]. — Санкт-Петербург : [б. и.], 2009. — 35 с., [26] л. цв. ил., портр., факс. : ил.

40.   Коган Регина Михайловна. Картинная галерея. Живопись Италии и Испании / [Регина Михайловна Коган]. — Санкт-Петербург : Государственный Эрмитаж, 2002. — 21, [4] с. : цв. ил., портр. — (Шедевры искусства в залах Нового Эрмитажа). — На обл.: 150 лет Новому Эрмитажу.

41.   Красовская Вера Михайловна. Агриппина Яковлевна Ваганова / В. Красовская. — Ленинград : Искусство. Ленинградское отделение, 1989. — 221, [2] с. ; [17] л. ил. : портр. — (Жизнь в искусстве). — 50000 экз.

42.   Крылья Петербурга / [авт. текста: Ю. М. Пирютко, Н. Синдаловский, О. Котельников]. — Санкт-Петербург : Новая Академия, [2002?]. — 23 с., [3] л. ил. : ил.

43.   Государственный Эрмитаж (Ленинград). Культура и искусство античного мира : путеводитель по залам Государственного Эрмитажа / Гос. Эрмитаж ; [под ред. А. А. Передольской ; сост.: Г. Д. Белов и др.]. — Ленинград : Издательство Государственного Эрмитажа, 1963. — 198, [1] с. : ил. — Список ил.: с. 195-198. — 5000 экз.

44.   Леец Георг Александрович. Абрам Петрович Ганнибал : биографическое исследование / Георг Леец. — 2-е изд. — Таллин : Ээсти раамат, 1984. — 190, [2] с., [8] л. ил., портр., факс. — Библиогр. в подстроч. примеч. — 50000 экз.

45.   Лурье Феликс Моисеевич. Хранители прошлого : журнал «Былое»: история, редакторы, издатели / Ф. М. Лурье. — Ленинград : Лениздат, 1990. — 253, [2] с. : ил., портр., факс. — (Голоса революции). — Библиогр. в примеч.: с. 163-169. - 30000 экз.

46.   Львова Алла Петровна. Род Львовых / А. П. Львова, И. А. Бочкарева. — Торжок : ВИЭМ, 2003. — 303, [2] с. : ил., портр. + 1 отд. л. ил. — (Новоторжский родословец ; вып. 1). — 1000 экз.

47.   Марголис Юрий Давидович. Отечеству на пользу, а россиянам во славу : из истории университетского образования в Петербурге в XVIII — начале XIX в. / Ю. Д. Марголис, Г. А. Тишкин ; Ленингр. гос. ун-т им. А. А. Жданова. — Ленинград : Издательство Ленинградского университета, 1988. — 230, [2] с. : ил., портр., факс. — Библиогр. в подстроч. примеч. — Указ. имен: с. 226-231. — 8069 экз.

48.   Меерович Григорий Ильич. Музей А. В. Суворова : историко-краеведческий очерк / Г. И. Меерович. — Ленинград : Лениздат, 1981. — 150, [2] с. : ил. — Библиогр.: с. 150-151. — 25000 экз.

49.   Мезенин Николай Александрович. Лауреаты Демидовских премий Петербургской Академии наук / Н. А. Мезенин ; отв. ред.: Н. И. Невская ; Акад. наук СССР. — Ленинград : Наука. Ленинградское отделение, 1987. — 201, [2] с. — (Страницы истории нашей Родины). — Библиогр.: с. 183-186 (97 назв.). — О Демидов. премиях: с. 187 (13 назв.). — Имен. указ.: с. 195-202. — 20000 экз.

50.   Меланко Валдемар. Три статьи о Санкт-Петербурге и Хельсинки / В. Меланко. — Хельсинки : Институт России и Восточной Европы, 2002. — 73 с. : ил., портр., факс. - Библиогр.: с. 72-73.

Содержание:

Санкт-Петербург - метрополия на границах. — С. 1-30

Карл Людвик Энгель — зодчий центрального ансамбля города Хельсинки и его рукопись «О методах строительства и строительных материалах в Петербурге». — С. 31-58

Обелиск императрице. — С. 59-71

51.   Местр Жозеф де. Санкт-Петербургские вечера : монография / Жозеф де Местр ; пер. с фр. и примеч. А. А. Васильева ; под ред. А. Г. Терехова. — Санкт-Петербург : Алетейя, 1998. — 732 с.

52.   Мещерский Владимир Петрович (1839-1914). Воспоминания : мемуары / князь Мещерский. - Москва : Захаров, 2001. — 687 с. — Имен. указ.: с. 670-675. — 3000 экз.

53.   Минцкабинет в Новом Эрмитаже / Гос. Эрмитаж ; [сост. Е. В. Лепехина]. — Санкт-Петербург : Государственный Эрмитаж, 2002. — 20, [1] с. : ил., цв. ил. — (Шедевры искусства в залах Нового Эрмитажа). На обл.: 150 лет Новому Эрмитажу

54.   Миролюбова Галина Алексеевна. Премудрость Астреи = The wisdom of Astraea : памятники масонства XVIII — первой трети XIX века в собрании Эрмитажа / Г. А. Миролюбова, И. Н. Уханова ; Гос. Эрмитаж. — Санкт-Петербург : Издательство Государственного Эрмитажа, 2013. — 35 с. : ил., цв. ил. — Библиогр.: с. 35. — На авантит.: Эрмитаж — 250. — Доп. тираж 1000 экз.

55.   Морской некрополь : [справочник] / Н. Л. Маркина [и др.] ; С.-Петерб. Администрация, Санкт-Петербург, Ком. по гос. контролю, использованию и охране памятников истории и культуры. — Санкт-Петербург : Белое и черное, 2000. — 99, [1] с. : ил. — Библиогр.: с. 87. — 500 экз.

56.   Музей в ансамбле Александро-Невской лавры : сборник научных статей / Гос. музей гор. скульптуры. — Санкт-Петербург : ГМГС, 1997. — 115 с. : ил. — Библиогр. в примеч.: с. 105-113. — 130 экз.

Содержание:

Ефремова Н. Н. О создании государственного историко-мемориального и художественного музея-заповедника «Национальный пантеон России» — Музей монументальной скульптуры Санкт-Петербурга / Н. Н. Ефремова. — С. 7-15

Пирютко Юрий Минаевич. Материалы к 200-летнему юбилею наименования Лаврой Александро-Невского монастыря / Ю. М. Пирютко. — С. 16-24

Алексеев А. А. Древлехранилище Александро-Невской лавры : история создания и экспозиция / А. А. Алексеев. — С. 25-45

Пирютко Юрий Минаевич. Сохранение и реорганизация музея Александро-Невской Лавры в первые послевоенные годы / Ю. М. Пирютко. — С. 46-65

Ефремова Н. Н. Музеефикация Некрополей и создание Музея Городской Скульптуры (1920-1930-е годы) / Н. Н. Ефремова. — С. 66-70

Пирютко Юрий Минаевич. Крестный ход 30 августа как традиция православной жизни С.-Петербурга / Ю. М. Пирютко. — С. 71-82

Алексеев А. А. Надвратная церковь Александро-Невской Лавры во имя иконы Божией Матери «Всех Скорбящих Радости» / А. А. Алексеев. — С. 83-89

Линникова, Н. Я. Воскресенская церковь в Музее-Некрополе «Литераторские мостки» / Н. Я. Линникова. — С. 90-95

Горина Т. Н. Некрополь на Расстанной / Т. Н. Горина. — С. 96-99

Столярова И. А. Александро-Невская Лавра в мемуарной и художественной литературе / И. А. Столярова. — С. 100-104

57.   Мурашев Аркадий Анатольевич. Николай Николаевич. Барон Врангель / Аркадий Мурашев. - Улан-Удэ : Верхнеудинский острог, 2012. — 124 с. : ил. — Библиогр. в подстроч. примеч. — U.-U. d’Ensky — псевд. Аркадия Анатольевича Мурашева. — 191 экз.

58.   Никифорова Людмила Ростиславовна. Родина русского фарфора : [о Д. И. Виноградове] / Л. Р. Никифорова. — Ленинград : Лениздат, 1979. — 100, [2] с., [20] л. ил., цв. ил., факс. — 50000 экз.

59.   Новиков Тимур Петрович (1958-2002). Лекции / Т. П. Новиков. — Санкт-Петербург : Новая Академия Изящных Искусств : Галерея Д137, 2003. — 191 с. : ил., портр. — Список ил.: с. 187.

60.   Образ Петра Великого в монументальной скульптуре Петербурга / Гос. музей гор. скульптуры ; сост.: А. А. Алексеев, Ю. М. Пирютко ; дизайн : Ю. В. Загороднева. — Санкт-Петербург : [б. и.], 2012. — 26, [4] с. : цв. ил.

61.    Павлов В. Е. Дворец Юсуповых на набережной реки Фонтанки / В. Е. Павлов ; Федер. гос. бюджет. образоват. учреждение высш. проф. образования «Петерб. гос. ун-т путей сообщ. Имп. Александра I». — Санкт-Петербург : Капли дождя, 2004. - 77, [2] с., [4] л. ил., портр. — Имен. указ.: с. 54-76. — Библиогр.: с. 77-78. — 500 экз.

62.   Панов Виктор Анатольевич. Царскосельский некрополь. Казанское кладбище / Виктор Панов. — Санкт-Петербург : Царскосельская библиотека, 2005. — 63, [1] с. : ил. + 2 отд. л. ил. — 300 экз.

63.   Мариус Петипа : материалы, воспоминания, статьи / [Ленингр. театр. музей ; сост., авт. примеч.: А. Нехендзи ; предисл.: Ю. Слонимский]. — Ленинград : Искусство. Ленинградское отделение, 1971. — 445, [1] с., [20] л. ил., портр. : факс. — Кн., ст., интервью М. И. Петипа, и лит. о нем / сост.: Л. Парамонова, Г. Томсон: с. 389-419. — Библиогр. в примеч.: с. 350-373. — Постановки М. Петипа в России: с. 377-388. — Указ. имен.: с. 420-444. — 40000 экз.

64.   Петров Всеволод Николаевич. Очерки и исследования : избранные статьи о русском искусстве XVIII-XX веков / В. Н. Петров ; [вступ. ст.: Д. В. Сарабьянов]. - Москва : Советский художник, 1978. — 300, [3] с., [44] л. ил., цв. ил., портр. : портр. — (Библиотека искусствознания). — Список основных науч. и крит. работ В. Н. Петрова, 1941-1976: с. 292-294. — Список ил.: с. 295-296. — Имен. указ.: с. 297-301.- Библиогр. в подстроч. примеч. — 10000 экз.

65.   Кузьма Сергеевич Петров-Водкин, 1878-1939 : каталог выставки / Гос. Рус. музей ; [сост.: Н. А. Барабанова, Е. Н. Селизарова ; авт. вступ. ст.: Е. Н. Селизарова]. — Ленинград ; Москва : Советский художник, 1966. — 47, [20] с., [1] л. портр. : ил., портр. - Библиогр. в подстроч. примеч. — 20000 экз.

66.   Петроградская сторона. История и архитектура : тезисы докладов краеведческой конференции (27-28 сентября 1988 г. ) / Ленингр. отд-ние Сов. фонда культуры, Гос. музей истории Ленинграда, ЛенНИИпроект ; сост.: Л. Я. Лурье, А. В. Кобак. — Ленинград : [б. и.], 1988. — 57 с. — Нет. тит. л., описано по обл. — 300 экз.

67.   Пирожков Геннадий Васильевич. Смоленское Лютеранское кладбище в Санкт-Петербурге / Г. В. Пирожков, Е. Г. Пирожков. — Санкт-Петербург : Сириус, 1996. — 55, [1] с., [4] л. ил. : ил.

68.   Промышленные династии тульского происхождения : сборник статей / [Тульский обл. краевед. музей ; сост. и науч. ред. И. Н. Юркин]. — Тула : Рарус, 1993. — 81, [1] с. - (Тульский металл в истории российской промышленности и предпринимательства ; вып. 2). — Библиогр. в примеч. в конце ст. — 530 экз.

Содержание:

Кусова И. Г. А. Р. Баташев и его потомки на Рязанской земле / И. Г. Кусова. — С. 7-14

Пирютко Юрий Минаевич. Демидовы и Баташевы в Лазаревском некрополе Александро-Невской лавры в Петербурге / Ю. М. Пирютко. — С. 15-20

Юркин Игорь Николаевич. Материалы для биографии Григория Никитича Демидова (?-1728) / И. Н. Юркин. — С. 21-39

Онучин А. Н. Изучение истории и генеалогии рода Демидовых в дореволюционной России / А. Н. Онучин. — С. 40-45

Краснова Е. И. Некоторые добавления и уточнения к родословию Демидовых / Е. И. Краснова. — С. 46-53

Суровцева Н. Г. Торговля российской медью в 40-х гг. XIX века / Н. Г. Суровцева. — С. 54-65

Юркин И. Н. Тульские металлозаводчики XVIII века : (дополнения к словарю) / И. Н. Юркин. - С. 66-80

69.   Прыжов Иван Гаврилович (1827-1885). История кабаков в России в связи с историей русского народа / И. Г. Прыжов. — Репр. воспр. изд. 1991 года. — Москва : Бук Чембэр Интернэшнл, 1991. — 270 с. — (Историческая библиотека : (материалы для истории общественного и народного быта в России)). — Библиогр. в подстроч. примеч. и в тексте. — 70000 экз.

70.   Пушкинский Музеум : альманах / науч. ред. Р. В. Иезуитова; отв. ред. С. М. Некрасов; Всерос. музей А. С. Пушкина. — СПб. : Дорн, 1999 — .

Вып. 1. — 1999. - 334 с. : 16 л. ил.

Содержание:

Гранин Даниил Александрович. Вблизи престола / Д. А. Гранин. — С. 7-11

Битов Андрей Георгиевич. Пушкин и Дюма : (Пушкин во Франции) / А. Г. Битов. — С. 12-14

Гордин Я. М. Человек против хаоса : (Пушкин и мы) / Я. М. Гордин. — С. 15-26

Кураев М. Н. «Заветов грядущего вестник…» / М. Н. Кураев. — С. 27-27

Петров А. М. «Весь мой дальнейший путь связан с этим именем…» / А. М. Петров. - С. 29

Некрасов С. М. Творческая биография писателя как основа литературно-монографической экспозиции / С. М. Некрасов. — С. 30-36

Александрова Т. Г. Из рукописно-документального собрания Всероссийского музея А. С. Пушкина / Т. Г. Александрова. — С. 37-42

Павлова С. В. Новое о лицейских материалах / С. В. Павлова. — С. 43-50

Пролет Е. В. Рисунки В. А. Жуковского из фонда оригинальной графики Всероссийского музея А. С. Пушкина / Е. В. Пролет. — С. 51-53

Карпова Е. В. Новая атрибуция скульптурного портрета А. Х. Востокова / Е. В. Карпова. — С. 54-58

Епатко Ю. Г. Неизвестная фотография декабриста С. И. Кривцова : (По материалам фотофонда Всероссийского музея А. С. Пушкина) / Ю. Г. Епатко. — С. 59-65

Монахова Е. Н. «Старинная петровская песня» : Иллюстрация Н. К. Рериха к стихотворению Пушкина «Пир Петра Первого» в собрании Всероссийского музея А. С. Пушкина / Е. Н. Монахова. — С. 66-68

Мазур Т. Р. Комнатные растения в жилом интерьере XIX в. / Т. Р. Мазур. — С. 69-74

Санасарян Т. К. Литературная экспозиция Всесоюзного музея А. С. Пушкина : (Итоги и перспективы. Анализ образно-семантической структуры. Тематическое обоснование и маршрут новой экспозиции в доме Волконских) / Т. К. Санасарян. — С. 75-82

Седова Г. М. Неизвестный портрет виконта д’Аршиака и другие новые материалы его биографии / Г. М. Седова. — С. 83-89

Михайлова Л. Б. «Вчера свершился первый подвиг мой — открытие Лицея…» : (История одной архивной находки) / Л. Б. Михайлова. — С. 90-96

Марков А. Н. «Любимец моды легкокрылой…» : (О. А. Кипренский в Царском Селе в 1813 г.) / А. Н. Марков. — С. 97-103

Березкина С. В. Об эпитимийце Пушкине / С. В. Березкина. — С. 104-106

Уварова Н. И. Еще раз «О мнимом портрете Александра Иванова» / Н. И. Уварова. — С. 107-110

Яковлева М. А. «С послушной куклою…» / М. А. Яковлева. — С. 111-117

Варфоломеев А. П. Пущин, Иван Иванович : (К истории создания и датировке фотопортретов) / А. П. Варфоломеев. — С. 118-129

Волохонская Т. П. «И славен буду я…» / Т. П. Волохонская : 130-136

Иезуитова Р. В. «Зачем ты, грозный аквилон. ..» : (О судьбе одного болдинского автографа) / Р. В. Иезуитова. — С. 137-143

Назарова Г. И. Адресат стихотворения Пушкина «Новоселье» / Г. И. Назарова. — С. 144-150

Татаринов А. В. «Слышано от Н. Свечина» : («Подъезжая к Торжку» / А. В. Татаринов. — С. 151-158

Лузинова И. В. «Душой исполненный полет…» / И. В. Лузинова. — С. 159-166

Телетова Н. К. Забытые родственные связи А. С. Пушкина — С. А. Неелов / Н. К. Телетова. — С. 167-172

Золотова О. Н. Павел Лукьянович Яковлев — литератор пушкинской эпохи / О. Н. Золотова. — С. 173-180

Солдатова Л. М. Поэт и толпа : (Карикатуры на Пушкина) / Л. М. Солдатова. — С. 181-190

Михайлов, М. И. «И что чума?.» / М. И. Михайлов. — С. 191-193

Галкина Т. И. Высочайший двор в Царском Селе летом 1831 г. / Т. И. Галкина. — С. 194-202

Зигерн-Корн, Ю. А. «И побратался с ним не для здешнего мира…» : (К истории взаимоотношений А. С. Пушкина и В. И. Даля) / Ю. А. Зигерн-Корн. — С. 203-212

Старк Вадим Петрович. Записка Пушкина к барону Геккерну / В. П. Старк. — С. 212-217

Вильк Е. А. «Трагическое» в творчестве Пушкина и некоторые проблемы философской критики Серебряного века / Е. А. Вильк. — С. 218-228

Грязнова А. Ю. К. К. Случевский и празднование столетнего юбилея А. С. Пушкина в Святых Горах / А. Ю. Грязнова. — С. 229-240

Кублицкая М. А. Пушкинский юбилей 1899 г. в провинции : (По материалам научно-вспомогательного фонда Всероссийского музея А. С. Пушкина / М. А. Кублицкая. — С. 241-251

Старк Вадим Петрович. Пушкинские отражения в сборнике В. Сирина (В. В. Набокова) «Горний путь» / В. П. Старк. — С. 251-257

Буковская Т. С. Последний спор / Т. С. Буковская. — С. 258-260

Кудрицкая Л. Пушкиниана Николая Стрижака / Л. Кудрицкая. — С. 261-268

Добровольская Е. Б. «Души прекрасные порывы…» : ( О традициях Лицейского фестиваля «Царскосельская Осень») / Е. Б. Добровольская. — С. 269-283

Некрасов С. М. Сын поэта / С. М. Некрасов. — С. 284

Пушкин Н. А. Генерал от кавалерии Александр Александрович Пушкин (1833-1914) / Н. А. Пушкин. — С. 285-293

Бокариус М. В. Редкий экземпляр «Тарантаса» В. А. Соллогуба : Из собрания С. Л. Маркова) / М. В. Бокариус. — С. 294-295

Марков С. Л. «Тарантас» В. А. Соллогуба / С. Л. Марков. — С. 296-302

Белинский А. И. Культурная работа школ города Опочки в 20-х гг. XX в. / А. И. Белинский. — С. 303-309

71.   Пушкинский Музеум : альманах / [науч. ред. Р. В. Иезуитова ; отв ред. С. М. Некрасов] ; Всерос. музей А. С. Пушкина. — Санкт-Петербург : Дорн, 1999 — .

Вып. 2. — 2000. - 319 c., [4] л. ил., портр. — 1000 экз.

72.   Россия — Франция. Век просвещения : русско-французские культурные связи в 18 столетии : каталог выставки, [12-14 мая 1987 г., Ленинград] / М-во культуры СССР, Гос. Эрмитаж ; [авт.-сост.: Л. Л. Альбина и др.]. — Ленинград : Государственный Эрмитаж, 1987. — 301, [2] с. : ил., цв. ил., портр., факс. — Библиогр. в примеч.: с. 292-295. — Указ. имен: с. 297-302. — 10000 экз.

73.   Яков Иванович Ростовцев: портрет реформатора / [авт. текста А. А. Алексеев]. — Санкт-Петербург : Лига Плюс, 2001. — 88, [1] с. : портр. — Библиогр. в подстроч. примеч. — 100 экз.

74. Русские писатели, 1800-1917 : биографический словарь / гл. ред. П. А. Николаев. — М. : Советская энциклопедия, 1989 — . — (Русские писатели, 11-20 вв. : серия биографических словарей).

Т. 1 : А — Г. - 1989. — 671, [1] с. : ил., портр.

75. Русские писатели, 1800-1917 : биографический словарь / гл. ред. П. А. Николаев. - Москва : Большая Российская Энциклопедия, 1989 — . — (Русские писатели, 11-20 вв. : серия биографических словарей).

Т. 2 : Г — К. — : Фианит, 1992. — 621 с. : портр.

76. Русские писатели, 1800-1917 : биографический словарь / гл. ред. П. А. Николаев. - Москва : Большая Российская Энциклопедия, 1989 — . — (Русские писатели XI-XX вв.) (Серия биографических словарей).

Т. 3 : К — М : словарь. — 1994. — 592 с. : ил.

77. Русские писатели, 1800-1917 : биографический словарь / гл. ред. П. А. Николаев. - Москва : Большая Российская Энциклопедия, 1989 — . — (Русские писатели XI-XX вв.) (Серия биографических словарей).

Т. 4 : М — П : словарь. — 1999. — 703 с. : ил.

78. Рыцарский зал / Гос. Эрмитаж. — Санкт-Петербург : Государственный Эрмитаж, 2002. — 21, [1] с. : цв. ил. — (Шедевры искусства в залах Нового Эрмитажа). — На обл.: 150 лет Новому Эрмитажу.

79. Сазанов Александр Петрович (1952- ). Похоронное дело в России: история и современность / Александр Сазанов. — Санкт-Петербург : Роза мира, 2001. — 93, [2] с., [8] л. ил. : ил. — 5000 экз.

80. Сборник материалов конференции «300 лет Свято-Троицкой Александро-Невской лавры» / под ред. М. В. Шкаровского. — Санкт-Петербург : Типография НП-Принт, 2013. — 351 с. : ил., цв. ил., портр., факс. — Библиогр. в подстроч. примеч. — 800 экз.

Содержание:

Коняев Николай Михайлович. Александр Невский и его Лавра : (посмертные деяния святого) / Н. М. Коняев. — С. 11-20

Уколова Виктория Ивановна. Александр Невский в историческом контексте / В. И. Уколова. — С. 21-27

Григоренко Анатолий Юрьевич. Святой князь Александр Невский и образ идеального правителя в Древней Руси / А. Ю. Григоренко. — С. 28-39

Савин Сергей Дмитриевич. Актуализация воззрений святого князя Александра Невского в политико-социологической мысли конца XIX — начала XX века / С. Д. Савин. — С. 40-47

Августин (Никитин Д. Е. ; 1946- ) Александро-Невский монастырь в эпоху Петра I / архим. Августин (Никитин). — С. 48-67

Паничкин Александр Филиппович. Священноархимандрит Александро-Невского монастыря, архиепископ Санкт-Петербургский и Шлиссельбургский, член Святейшего Синода Сильвестр (Кулябка, 1750-1761 годы) / А. Ф. Паничкин. — С. 69-76

Кашеваров Анатолий Николаевич. Попытка захвата большевиками Александро-Невской Лавры в январе 1918 года / А. Н. Кашеваров. — С. 77-88

Соколова Лидия Ивановна. Новые документы из следственного дела священномученика митрополита Вениамина / Л. И. Соколова. — С. 89-95

Сорокин Владимир. Библейская основа Лаврских новомучеников / прот. Владимир Сорокин. — С. 96

Сорокин Александр. Александро-Невское братство. 1918-1932 годы / прот. Александр Сорокин. — С. 97-103

Шкаровский Михаил Витальевич. Свято-Троицкая Александро-Невская Лавра в 1922-1927 годах / М. В. Шкаровский. — С. 104-144

Александрова-Чукова Лидия Константиновна. Свято-Троицкая Александро-Невская Лавра в судьбе митрополита Григория (Чукова) / Л. К. Александрова-Чукова. — С. 145-192

Иванов Владимир Георгиевич. Александро-Невская Лавра в системе современных государственно-церковных отношений Санкт-Петербурга / В. Г. Иванов. — С. 193-195

Исакова Елена Валентиновна. Роль Александро-Невского монастыря в духовном окормлении Российского флота в первой половине XVIII века / Е. В. Исакова. — С. 197-204

Катаев Роман Сергеевич. Святитель Филарет, митрополит Московский, святитель Феофан Затворник и святой праведный Иоанн Кронштадтский в Александро-Невской Лавре / Р. С. Катаев. — С. 205-211

Андреева Наталья Сергеевна. Немецкие профессора Духовной академии — преподаватели Санкт-Петербургского университета (первая половина XIX века) / Н. С. Андреева. — С. 212-217

Карпук Дмитрий Сергеевич. Александро-Невская Лавра — центр ученого монашества в начале XX века / Д. С. Карпук. — С. 218-227

Талалай Михаил Григорьевич. Опека Александро-Невской Лавры над русскими приходами в Италии / М. Г. Талалай. — С. 228-231

Савинова, Екатерина Андреевна. История строительства Троицкого собора Александро-Невской Лавры в моделях и архитектурной графике / Е. А. Савинова. — С. 233-243

Ходаковская, Ольга Ивановна. К истории Митрополичьего корпуса Александро-Невской Лавры. 1755-1917 годы / О. И. Ходаковская. — С. 244-255

Логунова Марина Олеговна. Вторичные похороны императора Петра III : мифы и реальность / М. О. Логунова. — С. 256-267

Берташ Александр Витальевич. Троицкий собор Киновии Александро-Невской Лавры: жертвователь Ф. Ф. Набилков и архитектор Г. И. Карпов / свящ. Александр Берташ. — С. 268-285

Богданова Татьяна Александровна. Собрание рукописей Александро-Невской Лавры в отделе рукописей Российской национальной библиотеки / Т. А. Богданова. — С. 286-305

Крылов Никита Сергеевич. Из истории архива Свято-Троицкой Александро-Невской Лавры / Н. С. Крылов. — С. 306-320

Пирютко Юрий Минаевич. Формирование музейных экспозиций на территории лаврских кладбищ в 1920-1930-х годах / Ю. М. Пирютко. — С. 321-335

Коршунова, Наталья Геннадьевна. Конный памятник святому князю Александру Невскому в Санкт-Петербурге / Н. Г. Коршунова. — С. 336-345

Макаров Александр Игоревич. Реставрация ансамбля Александро-Невской Лавры в преддверии трехсотлетия обители / А. И. Макаров. — С. 346-351

81. Сборник работ аспирантов кафедры истории русского и советского искусства / Акад. художеств СССР, Ин-т живописи, скульптуры и архитектуры им. И. Е. Репина, Фак. теории и истории искусства ; [науч. ред.: А. Л. Каганович]. — Ленинград : [б. и.], 1969. — 111, [2] с. — Библиогр. в конце ст. — 500 экз.

82. Северюхин Дмитрий Яковлевич. Золотой век художественных объединений в России и СССР, 1820-1932 : справочник / Д. Я. Северюхин, О. Л. Лейкинд. — Петербург : Издательство Чернышева, 1992. — 400 с. — (Справочники по русскому искусству). - Библиогр. в конце ст. — Алф. указ.: с. 346-357. — Имен. указ.: с. 358-398. - Топогр. указ.: с. 399-400. — 5000 экз.

83. Семочкин Александр Александрович. Господин Верхний Оредеж / А. А. Семочкин. - Санкт-Петербург : Летопись, 2011. — 120, [2] с., [8] л. цв. ил., портр. : ил., портр. — Библиогр.: с. 342. — 1000 экз.

84. 770 лет Никольскому мужскому монастырю с. Старая Ладога / [ред. Е. Герасимова]. — Санкт-Петербург : Площадь искусств, 2009. — 63 с. : ил., цв. ил., портр.

85. Скульптура в музее : сборник материалов научной конференции, [сент. 1993 г., Саранск] / Рос. Федерация, М-во культуры, Рос. акад. художеств, Гос. Русский музей, Морд. респ. музей изобраз. искусств ; [под общ. ред. Н. В. Мальцева]. — Москва : Российская академия художеств, 1996. — 91, [1] с. — (Художественные коллекции России ; вып. 1). — Библиогр. в подстроч. примеч. — 100 экз.

Содержание:

Шапошникова Л. П. Выставки скульптуры в Русском музее / Л. П. Шапошникова. — С. 7-9

Мальцев, Никандр Викторович. Регионы художественной культуры / Н. В. Мальцев. — С. 10-16

Бирюкова С. В. Царь-колокол — первый памятник профессиональной русской скульптуры / С. В. Бирюкова. — С. 17-22

Елисеева Т. В. Монументальная скульптура Мордовии / Т. В. Елисеева. — С. 23-25

Лебедева Т. А. К биографии С. Д. Эрьзи : ранние годы / Т. А. Лебедева. — С. 26-31

Бутрова Е. В. К проблеме скульптурных автопортретов С. Д. Нефедова-Эрьзи / Е. В. Бутрова. — С. 32-35

Пуцко В. Г. Проблемы индексации русского художественного литья малых форм / В. Г. Пуцко. - С. 36-38

Губкин Олег Петрович. Золотой век каслинского художественного литья : мифы и реальность / О. П. Губкин. — С. 39-48

Бязрова, Л. В. Осетинская монументальная скульптура / Л. В. Бязрова. — С. 49-51

Серова И. А. Концепция парка-музея скульптуры / И. А. Серова. — С. 52-54

Пирютко Юрий Минаевич. Формирование музейной экспозиции некрополя Александро-Невской лавры / Ю. М. Пирютко. — С. 55-59

Васильева Т. Г. К вопросу о сохранении памятников монументальной и декоративной скульптуры Петербурга / Т. Г. Васильева. — С. 60-63

Титова Р. В. Реставрация и атрибуция скульптуры «Голова крестьянина» / Р. В. Титова. — С. 64-67

Турицына А. М. Камеи А. С. Голубкиной / А. М. Турицына. — С. 68-69

Крауц Т. И. К 20-летию со дня открытия музея-мастерской С. Т. Коненкова / Т. И. Крауц. — С. 70-73

Устьянцева Е. М. К вопросу эволюции творческого стиля А. П. Кудрявцева / Е. М. Устьянцева. — С. 74-79

Кадикина Л. И. Творчество первого чувашского скульптора-профессионала Ю. И. Ксенофонтова (1939-1978) / Л. И. Кадикина. — С. 80-83

Мордвинова А. И. Судьба памятников, описанных А. И. Некрасовым : (древнерусская скульптура) / А. И. Мордвинова. — С. 84-87

Астанкова Л. А. Дидактическая выставка «Форма и объем» / Л. А. Астанкова. — С. 88-90

86. Словарь русских писателей XVIII века / Ин-т рус. лит. (Пушкин. Дом) АН СССР. — Ленинград : Наука, 1988 — .

Вып. 1 : А — И. - 1988. — 356, [1] с. — 20000 экз.

87. Словарь русских писателей XVIII века / Институт русской литературы (Пушкин. Дом) РАН ; отв. ред. А. М. Панченко. — Санкт-Петербург : Наука, 1988 — .

Вып. 2 : К — П : словарь. — 1999. — 508 с.

88. Соколова Татьяна Михайловна. Очерки по истории художественной мебели XV-XIX веков / Т. Соколова. — Ленинград : Советский художник, 1967. — 163, [1] с. : ил., цв. ил. — Библиогр. в подстроч. примеч. — 7500 экз.

89. Страницы истории западноевропейской скульптуры : памяти Ж. А. Мацулевич (1890-1973) : сборник научных статей / Гос. Эрмитаж ; [науч. ред.: С. О. Андросов]. - Санкт-Петербург : 89. Государственный Эрмитаж, 1993. — 221, [4] с. : ил., портр. — Библиогр. в примеч. в конце ст. — 500 экз.

Содержание:

Андросов Сергей Олегович. Жанетта Андреевна Мацулевич (1890-1973) / С. О. Андросов. — С. 7-14

Каган, Юлия Освальдовна. «Как слово наше отзовется…» : (о судьбе одной публикации Ж. А. Мацулевич) / Ю. О. Каган. — С. 15-28

Мацулевич Ж. А. Декоративная скульптура в Гатчине / Ж. А. Мацулевич. — С. 29-42

Головин В. П. Статуя на колонне: от монумента Траяна до Александрийского столпа / В. П. Головин. — С. 43-61

Лейвин Ирвин. Боццетти и модели : заметки и скульптурном процессе от Раннего Возрождения до Бернини / И. Лейвин. — С. 62-81

Косарева Н. К. Два терракотовых фрагмента из собрания Фарсетти / Н. К. Косарева. — С. 82-91

Липгарт Э. К. Бронзовая статуэтка «Вакха» работы Франсуа Дюкенуа в Эрмитаже / Э. К. Липгарт. — С. 92-105

Андросов Сергей Олегович. Новые атрибуции итальянских терракот XVII-XVIII вв. / С. О. Андросов. — С. 106-121

Монтегю Дженнифер. Первый рельеф Фоджини в мраморе / Д. Монтегю. — С. 122-135

Неверов Олег Яковлевич. Скульптурные циклы в декоре Летнего сада / О. Я. Неверов. — С. 136-163

Далле Фузине К. О портретах Саввы Владиславича-Рагузинского / К. Далле Фузине, С. О. Андросов. - С. 164-172

Королев Е. В. Скульптор Жозеф Камберлен (1756-1821) / Е. В. Королев. — С. 173-207

Карчева Е. И. О «Данаиде» Х. Д. Рауха / Е. И. Карчева. — С. 208-214

Вяткин Л. М. О «Портрете неизвестного» работы Бартоломео Карло Растрелли / Л. М. Вяткин. — С. 215-221

90. Суворовские чтения : материалы конференции / Санкт-Петербург, Ком. по культуре, Гос. мемор. музей А. В. Суворова. — Санкт-Петербург : Контрфорс, 1999. — 135 с. — Библиогр. в примеч. в конце докл. — Библиогр.: с. 135. — 1000 экз.

Содержание:

Фураева Т. В. К истории установки памятника русским воинам у Чертова моста / Т. В. Фураева. - С. 4-13

Оточкин В. В. В. И. Суворов и П. И. Шувалов : (история создания шуваловской «секретной гаубицы») / В. В. Оточкин. — С. 14-24

Лукирский Александр Николаевич. К вопросу о церемониале похорон А. В. Суворова / А. Н. Лукирский. - С. 25-31

Столярова И. А. Похороны и надгробие А. В. Суворова в Благовещенской усыпальнице / И. А. Столярова. — С. 32-35

Козюренок К. Л. «История о светлости» : эпизод из отношений Павла I и А. В. Суворова / К. Л. Козюренок. — С. 36-43

Пирютко Юрий Минаевич. Благовещенская усыпальница — первый пантеон России / Ю. М. Пирютко. - С. 44-48

Богданов А. Б. Александр Суворов — мещанский стрелок городов Богемии / А. Б. Богданов. — С. 49-56

Гуляев Ю. Н. Рядом с Суворовым : (о совместной службе А. В. Суворова и М. И. Кутузова) / Ю. Н. Гуляев. — С. 57-64

Кудрявцев Дмитрий Владимирович. Память о Суворове в деятельности русской эмиграции / Д. В. Кудрявцев. — С. 65-72

Игнатьева Т. Н. Английские политические карикатуры конца XVIII века на А. В. Суворова в собрании ГММ А. В. Суворова / Т. Н. Игнатьева. — С. 73-80

Рогулин Николай Георгиевич. Использование А. В. Суворовым прусского пехотного устава 1743 года при разработке «Полкового учреждения» / Н. Г. Рогулин. — С. 81-90

Будко Анатолий Андреевич. А. В. Суворов и военная медицина / А. А. Будко. — С. 91-97

Спиридонова Л. И. А. В. Суворов в Финляндии / Л. И. Спиридонова. — С. 98-105

Васильева Г. И. Суворов на Новгородской земле / Г. И. Васильева. — С. 106-114

Введенский Георгий Эдишерович. Гипотеза о происхождении названия корабля / Г. Э. Введенский. — С. 115-120

Дряннов К. А. Суворовские принципы в действиях танкистов в период Московской битвы / К. А. Дряннов. — С. 121-129

Абрамов А. Г. Воспоминания Ивана Никитича Григоровича как исторический источник об Итало-Швейцарском походе А. В. Суворова / А. Г. Абрамов. — С. 130-135

91. Суворовский музей : 100 лет в истории России, 1904-2004 : материалы международной научной конференции и юбилейных торжеств, 24-26 ноября 2004 г. : [сборник / изд. подгот.: Л. В. Елескина, Б. В. Галенко, А. Н. Лукирский]. — Санкт-Петербург : Государственный мемориальный музей А. В. Суворова, 2007. — 192, [2] с., [8] л. цв. ил., портр., факс. : ил., портр., факс. — Библиогр. в конце ст. — 1000 экз.

Содержание:

Елескина Лариса Владимировна. Державный орел на башне Суворовского музея / Л. В. Елескина. — С. 12-15

Соколов И. А. Из воспоминаний сына художника / И. А. Соколов. — С. 16-18

Цамутали Алексей Николаевич. Суворов и суворовское наследие в русской военно-исторической литературе конца XIX — начала XX вв. / А. Н. Цамутали. — С. 19-29

Зелов Н. С. Документы Государственного Архива РФ о Суворовском музее / Н. С. Зелов. — С. 30-34

Пономарев И. А. Первый начальник Суворовского музея / И. А. Пономарев. — С. 35-52

Литке Ф. Н. Директора Суворовского музея : (личные воспоминания) / Ф. Н. Литке. — С. 53-57

Лукин В. А. За «кулисами» суворовских торжеств : ведомственные и частные интересы во время празднования 100-летнего юбилея генералиссимуса А. В. Суворова в 1900 году / В. А. Лукин. — С. 58-75

Лукирский Александр Николаевич. Попытки сохранить фамилию: наследование титула князей Италийских, графов Суворовых-Рымникских / А. Н. Лукирский. — С. 76-81

Егоров А. Ю. История семьи Хитрово / А. Ю. Егоров. — С. 82-95

Догель Валентин Александрович. Догели — потомки фельдмаршала Александра Васильевича Суворова / В. А. Догель. — С. 96-105

Галенко Б. В. Иконография А. А. Суворова, сына полководца / Б. В. Галенко. — С. 106-109

Данилова Н. М. Петербург XVIII века в литографиях «Исторического описания одежды и вооружения российских войск» / Н. М. Данилова. — С. 110-126

Юркевич Евгений Иванович. «…Наша армия обязана ему весьма многим…»: Павел I и военные реформы / Е. И. Юркевич. — С. 127-137

Абрамов Евгений Петрович. Суворов и морская пехота / Е. П. Абрамов. — С. 138-150

Будко Анатолий Андреевич. Вклад А. В. Суворова в становление основ международного гуманитарного права, применяемого в условиях войн / А. А. Будко, Е. Ф. Селиванов. — С. 151-154

Гурковский В. А. А. В. Суворов и кадетские корпуса Российской Империи / В. А. Гурковский. — С. 155-166

Перовский E. П. Карельский этап жизни военного гения / E. П. Перовский. — С. 167-173

Белов Юрий Васильевич. Суворовский «поход из Ундола в Кистошь» / Ю. В. Белов. - С. 174-180

Ананьин А. В. Полковой музей 11-го гренадерского Фанагорийского полка / А. В. Ананьин. — С. 181-187

Панкова О. П. О коллекции турецкой керамики из собрания Измаильского исторического музея А. В. Суворова / О. П. Панкова. — С. 188-192

92. Талалай Михаил Григорьевич (1956- ). Да упокоит тебя чужая земля… : российский некрополь в Южном Тироле / М. Г. Талалай. — Москва : Старая Басманная, 2012. — 141, [2] с. : ил., цв. ил. — Текст рус., нем., итал. — Библиогр. в подстроч. примеч. — 250 экз.

93. Teatrum machinarum, или Три эпохи искусства резьбы по кости в Санкт-Петербурге : к 300-летию со дня рождения А. К. Нартова : каталог / Гос. Эрмитаж и [др. ; науч. ред.: В. Ю. Матвеев]. — Санкт-Петербург : Петрополь, 1993. — 287 с. : цв. ил., портр. — Библиогр. в тексте. — 5000 экз.

94. Телетова Н. К. Об экспедиции на родину А. П. Ганибала / Н. К. Телетова. — С. 310-311

95. Тестаччо : некатолическое кладбище для иностранцев в Риме : алфавитный список русских захоронений / В. Гасперович [и др.]. - Санкт-Петербург : ВИРД, 2000. — 156, [2] с. : ил., карты. — (Российский некрополь / под общ. ред. А. А. Шумкова ; вып. 6). — Библиогр.: с. 131-156 и в подстроч. примеч. — 500 экз.

96. Тришина Алена Александровна. Павел I. Гатчинский сюжет / А. А. Тришина ; худож. Ю. Прохорова. — Гатчина : ПИЯФ, 2006. — 101, [1] с. : ил.

На тит. л.: 210-летию г. Гатчины посвящается

97. Фейерверки и иллюминации в графике XVIII века : каталог выставки / Гос. Русский музей ; [авт. вступ. ст. и сост.: М. А. Алексеева]. — Ленинград : Государственный Русский Музей, 1978. — 96, [1] с. : ил., факс. — Библиогр.: с. 96 и в подстроч. примеч. — 2000 экз.

98. Французская художественная бронза XVIII века в собрании Эрмитажа : каталог выставки / Гос. Эрмитаж ; [авт. вступ. ст. и сост.: Н. К. Косарева]. - Ленинград : Искусство, 1988. — 39, [1] с., [16] л. ил. — Библиогр.: с. 7-8. - 3000 экз.

99. Хаас Андрей Владимирович. Корпорация счастья : история российского рейва / Андрей Хаас. - Санкт-Петербург : Амфора, 2006. — 764 с. : ил., портр. — (Читать [модно]). - 5000 экз.

100. Художники «Газа-Невской культуры» : [альбом / авт. ст.: Е. Ю. Андреева]. - Ленинград : Художник РСФСР, 1990. — 12, [74] с. : ил., цв. ил. — (Современный ленинградский авангард). — 15000 экз.

101. Шлиман Е. П. Не привози с собою Гомера… : письма Е. П. Шлиман Генриху Шлиману / Е. П. Шлиман. — Санкт-Петербург : Дмитрий Буланин, 1998. — 226 с. — 2000 экз.

102. Эльяш Николай Иосифович. Авдотья Истомина / Николай Эльяш. — Ленинград : Искусство. Ленинградское отделение, 1971. — 187, [2] с., [16] л. ил., портр. — (Корифеи русской и зарубежной сцены). — 50000 экз.


«Для всех открыты наши фонды и наши знания»

Ирина Татарникова, главный библиограф Ефремовской центральной районной библиотеки, стала лауреатом Премии имени А.В. Луначарского в номинации «Библиотекарь». Премия ежегодно присуждается работникам музеев, театров, библиотек и других учреждений культуры в рамках Санкт-Петербургского международного культурного форума, который в этом году пройдет с 15 по 17 ноября. О том, популярно ли сегодня чтение и как привлекать читателей, она рассказала порталу «Культура.РФ»

Вечер поэзии и романса «Я стихи посвящаю тебе» в Ефремовской центральной районной библиотеке

— Ирина Александровна, есть мнение, что если уж пришел человек в библиотеку, то остается на много лет. К вам это утверждение применимо?

— Вы знаете, да. Я сама по специальности педагог. Окончила Елецкий педагогический институт. В библиотеку пришла в 1997 году практически случайно. Но мне здесь так понравилось, что я прижилась и работаю вот уже больше 20 лет. А наша центральная районная библиотека в следующем году отметит свое 120-летие. У нас есть свои традиции, свои люди, которых мы ценим и о которых помним.

— В чем заключается ваша работа?

— Мы проводим много интересной массовой работы в рамках культурно-досуговой деятельности, чтобы привлекать в библиотеку читателей всех возрастов, молодежь. Сами разрабатываем и пишем сценарии, проводим творческие вечера, презентации книг, литературно-театрализованные постановки, литературно-музыкальные фестивали. Приветствуются новые креативные формы работы, ведь библиотечная деятельность, как и любая другая, не стоит на месте. Поэтому у нас с удовольствием принимаются читателями такие формы, как литературные батлы и звездопады, экологические самолеты и квесты, журфиксы и круизы… Более десяти лет я вела в библиотеке литературно-музыкальный салон «Лада», который перерос в литературное кафе. А в ноябре у нас заработает антикафе.

Большое внимание уделяется информационной работе — сейчас нас окружают просто потоки информации, мы стараемся выбрать главное и нужное и донести это до своих читателей. Более 20 лет я вела краеведческие чтения и лектории для учащихся профессиональных училищ и видела, как эти знания нужны молодежи.

Профессиональной особенностью и, можно сказать, традицией нашей библиотеки является то, что мы фокусируем внимание на вопросах краеведения. Город у нас небольшой, провинциальный, запросов по краеведению выполняется много, в том числе довольно сложных.

Квест «Экологическое Красивомечье» в Ефремовской центральной районной библиотеке

— Вы пришли в библиотеку в 90-е — годы, которые не слишком располагали к библиотечному досугу. Изменения, которые произошли с тех пор, значительны?

— Да, конечно! Во-первых, раньше все было более традиционно с точки зрения обмена информацией. А во-вторых, я ведь начинала библиотекарем отдела обслуживания и замечаю, как меняется читательский поток. Если раньше шли люди среднего и старшего возраста, то сейчас все больше молодежи приходит в наши стены, чтобы взять книгу для души, а не только то, что задали по учебной программе. Вот это очень приятно видеть. Я это связываю с тем, что появилось много интересных авторов, в том числе тех, кто пишет именно для молодежи — фэнтези, приключения, фантастику, детективы, молодежную прозу. И берут и с удовольствием читают. Ну и кроме того, вся деятельность нашей библиотеки этому развитию способствует — понятно, что в библиотеке изначально должно быть что-то интересное, чтобы туда захотелось прийти. В современной библиотеке должно быть комфортно, увлекательно, творчески наполнено, тогда непременно туда пойдут люди.

Так стараемся работать и мы — заинтересовать, тогда читатели сами спрашивают: «Какие у вас культурно-досуговые мероприятия готовятся? Что можно прийти посмотреть, где поучаствовать?» Я даже в последнее время отмечаю про себя увеличение творческой молодежи, которые сами хотят себя как-то проявить. Всех их нужно поддержать, быть с ними в одной связке. Молодежь всегда ждет от нас движения, творчества, новшеств и простого человеческого внимания.

— А какие проекты вы сейчас реализуете, кроме ежедневной работы с читателями?

— Их много. Могу выделить два основных направления: патриотическое (краеведческое) и духовно-нравственное. Сейчас идет работа над проектом «Культура малой Родины» — он пройдет в рамках конкурса «PRОдвижение чтения» в феврале 2019 года. Каждый год у нас проходят конкурсы профессионального мастерства по разным темам. Сейчас я с коллегами разрабатываю тему «Библиотека и молодежь: к творческому сотрудничеству и креативу».

Читайте также:

Работу мы свою ведем целенаправленно и планомерно, поэтому то или иное мероприятие выходит за рамки обычного мероприятия и вливается в тот или иной проект. Это и литературно-художественные вернисажи, где кроме литературы читатели могут проявить свои художественные способности, и литературные прогулки по улицам города. Многим известно, что по нашим улицам прохаживались Бунин, Паустовский, Лермонтов…

Здесь буквально каждый уголок пропитан историей. В прошлом году мы провели юбилейный Цветаевский фестиваль и вышли на улицы, в городскую рощу, чтобы читать стихи великого поэта, снять свой видеофильм «Разговор с гением». В этом году исполняется 200 лет нашему классику Ивану Сергеевичу Тургеневу, имя которого тоже тесно связано с нашим краем.

На творческой встрече с поэтессой Ольгой Виор в Ефремовской центральной районной библиотеке

В апреле наша библиотека приняла участие в ежегодной всероссийской акции в поддержку чтения и провела «Библиосумерки» в литературном ретрокафе «Библиоогонек» под названием «В гостях у Тургенева». В продолжение темы в ноябре пройдут литературные экскурсии по городу «На тургеневской ротонде», а к концу декабря готовим для молодежи «Новогодний бал у Тургенева», неизменно помня о том, что книга всегда должна быть во главе всего, что присутствует в библиотеке.

Я и мои коллеги стараемся привлекать в библиотеку больше творческих людей, не прерывать связь поколений, знакомить молодые дарования с творчеством опытных наставников, таких как поэт, журналист Николай Титов, педагоги-поэты Вячеслав Мальцев и Сергей Жигалин, прозаик из Воронежа Татьяна Соколова, журналист из Тулы Сергей Ефанов, чтец, почетный гражданин нашего города Александр Ерохин. И этот список можно было бы продолжать и продолжать. Активно сотрудничаем с творческим коллективом Тульского областного дома-музея В.В. Вересаева, вошли в традицию литературно-музыкальные вечера-портреты, организуемые совместно с детской музыкальной школой имени К.К. Иванова.

Долгая творческая связь у нас с Комплексным центром социального обслуживания, где находятся дети без попечения родителей или оказавшиеся в трудных жизненных ситуациях. Эти дети стремятся к самореализации, к общению, им интересны встречи со сверстниками, и к нам в библиотеку они приходят не только поучаствовать в мероприятии, но и пообщаться, побыть в уютной атмосфере книг и чтения. Именно с этими подростками мы сняли ролик к одному из наших проектов. Они у нас играют в сценках, читают стихи… Все наши проекты охватить просто невозможно. Это и участие в областном проекте «Кремлевское подворье», и в общегородских — «К Буниным в Ефремов в Троицын день» и «Литературные улочки приветствуют вас». К проектам можно отнести и ежегодные «Осенние вернисажи в Ефремове», в котором наша библиотека принимает самое непосредственное участие.

В этом году в рамках вернисажа мы встречаем известных поэтов из Тульского областного литературного объединения «Пегас» — Марка Дубинского, Николая Жукова, Эдуарда Георгиевского; в прошлом году наслаждались творчеством известной российской поэтессы-песенника Ольги Виор, а еще ранее организовывали творческую встречу с московским поэтом и актером Сергеем Таратутой. Проводим ежегодные акции — опросы о пользе и необходимости чтения.

Поэт Сергей Таратута в родных краях

— Что показывают эти опросы, какие тенденции выявляют?

— Очень любопытное получилось общение. Например, что касается извечного уже спора о печатных и электронных книгах. Тут мнения разделились примерно пополам. Подростки больше ратовали за электронные книги — сказали, что удобнее читать и дома, и в пути. Кто-то их покупает, кто-то в интернете скачивает. А вот молодые люди старше 30 лет уже более понимают пользу и благотворное влияние именно печатной книги. Многие с удовольствием читают поэзию — Пушкина, Есенина, Цветаеву, Рубальскую, Евтушенко, Ахмадулину и других. Из читаемых авторов сейчас такое многообразие по возрастам: Прилепин, Водолазкин, Улицкая, Перумов, Головачев, Прозоров, Метлицкая, Рой, Мазин… Сейчас молодые люди увлеченно читают зарубежных авторов: Коэльо, Берджесса, Гейл Форман, Ли Виксен, Маркуса Зузака, Габриэля Гарсиа Маркеса. Бессмертна и наша классика. Одно из лидирующих мест по-прежнему занимает «Мастер и Маргарита» Булгакова.

— Данные соцопроса могут подтолкнуть вас увеличить фонды за счет электронных книг?

— Мы пытаемся, конечно, пополнять фонд электронными книгами, изыскивать на это средства. Но основное внимание все-таки уделяем печатной книге, стараемся приобретать то, что пользуется наибольшим спросом у читателей, идти в ногу со временем, обновлять фонд. Наш директор, Тамара Викторовна Кузнецова, большое ей спасибо за это, отлично понимает, что без постоянного, хотя бы небольшого обновления книжного фонда, без улавливания читательского вкуса библиотека теряет свои позиции. Решить вопрос нам помогает городская администрация, Тульская областная библиотека, спонсоры. Наша задача в будущем — активнее пополнять новой литературой и фонды сельских библиотек.

На «Пушкинских днях» в Ефремовской центральной районной библиотеке

— Сколько сельских библиотек сейчас входит в вашу Централизованную библиотечную систему?

— Сейчас в нашей библиотечной системе 17 сельских библиотек. Наша центральная библиотечная система была основана в 1978 году, с тех пор она претерпевала некоторые изменения, но работаем мы вместе и цели у нас одни: прививать интерес к чтению, к хорошей литературе, ненавязчиво, профессионально воспитывать в юном поколении уважение к книге.

— Разница между городской и сельской библиотекой сильно ощущается?

— Вы удивитесь, но сейчас в сельские библиотеки приходит работать много молодых сотрудников со своими идеями, амбициями. К услугам молодых библиотекарей — книжный фонд, некоторые библиотеки могут похвастаться современным библиотечным ремонтом, оборудованием. Всем им мы даем знания в «Школе начинающего библиотекаря», а их задача — воплотить профессиональные и творческие мечты в реальность. Как вы верно отметили, библиотечные сотрудники своей профессии, как правило, очень преданы, работают много лет. Да, конечно, у нас, как и везде, есть свои проблемы: не хватает новых книг, новой техники, новой периодики, — но когда есть желание работать, думать, как сделать свою деятельность лучше, то и работать интереснее, и результат не заставляет себя ждать, а все вопросы решаются постепенно. Но в сельских библиотеках, так же как и в городских, реализуются библиотечные проекты, мы все работаем сообща, как единое целое, в современной обстановке иначе нельзя. У них есть свои акценты, которые можно реализовать только на селе.

Конкурс профессионального мастерства «Библиотека — территория творчества» в Ефремовской центральной районной библиотеке

— Какие же?

— Ну вот взять хотя бы приусадебное хозяйство — неотъемлемую часть быта сельчан. Коллеги в сельских библиотеках этот фактор умело используют. Особенно здорово это на детских мероприятиях работает — дети в восторге, когда могут принести своих щенков, кошек, комнатные растения, или даже угостить всех выпечкой. Все это естественно связывается с литературой — произведениями Сутеева, Успенского, Бианки, Чуковского. Тематические выставки и рисунки, чтения и презентации, интерактивное общение, а как результат — интересное полезное мероприятие, и поучительное, и развлекательное. Сельские библиотекари активно сотрудничают со школами, местной администрацией, клубами, где свои возможности: литературный вечер, обзор выставки, потом, например, молодежная дискотека с конкурсами, викторинами и призами. В общем, комбинаций много, всегда можно собраться и нечто такое интересное закрутить.

Ну и, кроме того, сельские библиотекари еще и между собой объединяются, друг к другу ездят, обмениваются опытом. Я вообще хочу им, сельским библиотекарям, сказать особое спасибо за то, что они, работая в непростых современных условиях, стараются подходить к делу с энтузиазмом; многое делать для того, чтобы жизнь сельчан была радостнее, ярче, полнокровнее.

— А происходит ли общение между библиотеками на уровне городов и областей?

— Конечно. У нас происходит большое творческое общение и обмен опытом с Тульской областной универсальной научной библиотекой — это и круглые столы по различным темам, и мастер-классы, и различные юбилейные мероприятия. В прошлом году выступали со своей исследовательской работой «Константин Паустовский и Ефремовский край». Это было событийное мероприятие, посвященное 125-летию Паустовского, на котором собрались коллеги, изучающие творчество писателя. Наше выступление понравилось и получило личную благодарность старейшего тульского краеведа и поэта Вячеслава Ботя. Совсем недавно состоялась деловая поездка нашего молодого сотрудника в Белгородскую областную библиотеку. На форуме можно было принять участие в стратегической дискуссии, тренинг-сессии, поработать в команде, проявить себя в проекте «Библиотеки будущего».

Ежегодно наши библиотекари принимают участие во Всероссийском слете библиотекарей в Туапсе, где выступают со своей программой, обмениваются опытом с коллегами со всей страны. Наши сотрудники по обмену опытом побывали в библиотеках Твери, Ярославля, в Российской государственной детской библиотеке, Российской государственной библиотеке для молодежи. В следующем году с одной из московских библиотек мы планируем организовать видеомост по творчеству И.А. Бунина и приурочить это к 150-летию со дня рождения писателя, которое будет отмечаться в 2020 году.

Поэтический фестиваль «Мы связаны рифмами слов» в Ефремовской центральной районной библиотеке

— У вас недавно прошла презентация «Ефремовской энциклопедии». Судя по фотографиям в соцсетях, людей на мероприятие пришло много. То есть интерес к истории края выходит за рамки обязательного?

— Да, вы абсолютно правы. Действительно, уже много лет краеведение является обязательным компонентом школьного образования. И дети приходят в библиотеку и ищут информацию по различным темам: история края, славные земляки и династии, наш город в годы Великой Отечественной войны, «Ефремов спортивный», «Ефремов театральный», «Русские писатели и Ефремовский край» и многое другое. Но одновременно с этим существуют и такие проекты, как «Ефремовская энциклопедия». Есть такой человек, он живет в Туле — Валерий Иванович Ксенофонтов, издатель, общественный деятель, почетный гражданин нашего города. Он пишет уже не первую книгу о наших земляках. Это ценные краеведческие биографические справочники. Это целый биографический проект, состоящий из изданий «Золотая книга Ефремова», «Красивомечье: века и люди», «Гордость земли Ефремовской», «Туляки в Москве». А летом этого года вышло совершенно новое уникальное, расширенное и дополненное издание «Ефремовская энциклопедия». Кроме статей об известных земляках, там собраны справочные материалы о наших селах, урочищах, географических объектах — и все это более чем на 500 страницах.

Наша библиотека тоже приняла непосредственное участие в создании этой книги. И что самое отрадное, именно молодежь по собственному желанию помогала в составлении книги — делали фото, предоставляли информацию о земляках. Вы упомянули социальные сети — их развитие также способствует повышению популярности чтения и библиотек среди населения. Нам часто пишут и на наш библиотечный сайт, на общедоступные сайты — кто-то спрашивает о предстоящих мероприятиях, кто-то ищет нужную книгу или информацию, а кто-то разыскивает данные о своих предках, кто-то желает уточнить тот или иной факт. Для всех открыты наши фонды и наши знания. Видите, информационная деятельность, библиография и краеведение очень тесно связаны. Это большая творческая работа, которая мало того что очень интересная, так еще и позволяет помочь людям.

Фотографии предоставлены сотрудниками Ефремовской центральной районной библиотеки

Беседовала Елена Антонова

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Комплексообразование человеческими белками репарации ДНК Rad51B и Rad51C и их активность in vitro — Страница 7 из 43

Следующий текст был автоматически извлечен из изображения на этой странице с помощью программного обеспечения для оптического распознавания символов:

                                 

39 000 об/мин в течение 1 часа. Осветленный супернатант диализовали 2 раза против 4 л буфера спермидина
(20 мМ Трис-ацетат, рН 7.5, 7 мМ спермидин-NaOH и 0,1 мМ DTT) в общей сложности 10
часов. Осадок извлекали центрифугированием при 12000 об/мин в течение 30 мин и повторно растворяли в 40 мл Р-буфера (0,1 М Kh3PO4, pH 6,8, 0,1 М KCl, 0,5 мМ ДТТ и 10% глицерина) при медленном перемешивании
в течение примерно 2 ч до осадок в значительной степени растворился. Нерастворимый материал удаляли
центрифугированием в роторе Beckman 70Ti при 39000 об/мин в течение 30 мин. Осветленный супернатант
наносили непосредственно на колонку с гидроксиапатитом (20 мл, Bio-Rad), предварительно уравновешенную буфером P.После загрузки колонку промывали 10 колоночными объемами буфера Р-
, затем элюировали линейным градиентом 0,1-0,8 М Х3РО4 в Р-буфере. Элюат был собран в виде
фракций по 2 мл. Аликвоту (10 мкл) каждой фракции анализировали с помощью SDS-PAGE и
пиковых фракций, содержащих Rad5IC, которые элюировались при прибл. 0,2-0,3 М фосфата, объединяли
и подвергали диализу против Т-буфера в течение по меньшей мере 4 часов. Затем образец пропускали через колонку Q-Sepharose
(10 мл, Pharmacia), предварительно уравновешенную Т-буфером, и промывали 5 объемами колонки
Т-буфера.Связанные белки элюировали линейным градиентом 0-0,8 М KCl в Т-буфере и собирали
фракций по 1,2 мл. Фракции, содержащие большую часть Rad51C, объединяли (
) и наносили на аффинную колонку с гепарином (5 мл, Pharmacia), которую предварительно уравновешивали
Т-буфером. Затем колонку промывали 5 объемами колонки буфера Т
и элюировали линейным градиентом 0-0,8 М KCl в Т буфере. Основной пик элюировался при
0,3 М KCl. Соответствующие фракции объединяли и наносили на колонку MonoQ HR 5/5
(Pharmacia), предварительно уравновешенную Т-буфером.Затем колонку промывали 5 колонками
объемов Т-буфера и элюировали белок Rad51C с острым пиком при 0,2 М KCl. Наконец, очищенный Rad51C
подвергали диализу против буфера для хранения и хранили в аликвотах, как упоминалось ранее для
.

7

Новый ландшафт ядерных субстратов CDK2 человека, обнаруженный путем фосфорилирования in situ.

%PDF-1.7 % 1 0 объект > /Метаданные 2 0 R /Контуры 3 0 R /Страницы 4 0 Р /StructTreeRoot 5 0 R /Тип /Каталог /ViewerPreferences > >> эндообъект 6 0 объект > эндообъект 2 0 объект > поток application/pdf

  • Yong Chi, John H Carter, Jherek Swanger, Alexander V Mazin, Robert L Moritz и Bruce E Clurman
  • Новый ландшафт ядерных субстратов CDK2 человека, обнаруженный путем фосфорилирования in situ.
  • Prince 12.5 (www.princexml.com)AppendPDF Pro 6.3 Linux 64-разрядная версия 30 августа 2019 г. Библиотека 15.0.4Appligent pdfHarmony 2.02020-07-29T14:24:15-07:002020-07-29T14:24:15-07:002020-07 -29T14:24:15-07:001uuid:31a86124-aefb-11b2-0a00-908e9f010000uuid:31a8953f-aefb-11b2-0a00-70b7e0cbfd7fpdfHarmony 2.0 Linux Kernel 2.6 64-битная библиотека 13 марта 9.0.2012 конечный поток эндообъект 3 0 объект > эндообъект 4 0 объект > эндообъект 5 0 объект > эндообъект 7 0 объект > эндообъект 8 0 объект >> эндообъект 9 0 объект > эндообъект 10 0 объект > эндообъект 11 0 объект > эндообъект 12 0 объект > эндообъект 13 0 объект > эндообъект 14 0 объект > эндообъект 15 0 объект > эндообъект 16 0 объект > эндообъект 17 0 объект > эндообъект 18 0 объект > эндообъект 19 0 объект > эндообъект 20 0 объект > эндообъект 21 0 объект > эндообъект 22 0 объект > эндообъект 23 0 объект > эндообъект 24 0 объект > эндообъект 25 0 объект > эндообъект 26 0 объект > /MediaBox [0 0 612 792] /Родитель 9 0 Р /Ресурсы > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст /ImageC] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /StructParents 0 /Вкладки /S /Тип /Страница >> эндообъект 27 0 объект > эндообъект 28 0 объект > эндообъект 29 0 объект > эндообъект 30 0 объект > /MediaBox [0 0 612 792] /Родитель 9 0 Р /Ресурсы > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст] >> /Повернуть 0 /StructParents 1 /Вкладки /S /Тип /Страница >> эндообъект 31 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 104 0 R /Обрезка [0.0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 32 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст /ImageC] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 109 0 R /TrimBox [0,0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 33 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст /ImageC] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 116 0 R /Обрезка [0.0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 34 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст /ImageC /ImageI] /Свойства > /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 131 0 R /TrimBox [0,0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 35 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст /ImageC] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 134 0 R /Обрезка [0.0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 36 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст /ImageC] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 137 0 R /TrimBox [0,0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 37 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 139 0 R /Обрезка [0.0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 38 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 141 0 R /TrimBox [0,0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 39 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 147 0 R /Обрезка [0.0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 40 0 объект /Последнее изменение /количество страниц 1 /Исходный идентификатор документа /PageUIDList > /PageWidthList > >> >> /Ресурсы > /ExtGState > /Шрифт > /ProcSet [/PDF /текст] /XОбъект > >> /Повернуть 0 /Большой палец 151 0 R /TrimBox [0,0 0,0 594,0 756,0] /Тип /Страница >> эндообъект 41 0 объект > эндообъект 42 0 объект > эндообъект 43 0 объект > эндообъект 44 0 объект > эндообъект 45 0 объект > эндообъект 46 0 объект > эндообъект 47 0 объект > эндообъект 48 0 объект > эндообъект 49 0 объект > эндообъект 50 0 объект > эндообъект 51 0 объект > эндообъект 52 0 объект > эндообъект 53 0 объект > эндообъект 54 0 объект > эндообъект 55 0 объект > эндообъект 56 0 объект > эндообъект 57 0 объект > эндообъект 58 0 объект > эндообъект 59 0 объект > эндообъект 60 0 объект > эндообъект 61 0 объект > эндообъект 62 0 объект > эндообъект 63 0 объект > эндообъект 64 0 объект > эндообъект 65 0 объект > эндообъект 66 0 объект > /Граница [0 0 0] /Содержание /Прямо [72.0 650,625 407,7188 669,375] /StructParent 2 /Подтип /Ссылка /Тип /Аннот >> эндообъект 67 0 объект > /Граница [0 0 0] /Содержание () /Rect [72,0 612,5547 225,5273 625,4453] /StructParent 3 /Подтип /Ссылка /Тип /Аннот >> эндообъект 68 0 объект > /Граница [0 0 0] /Содержание /Rect [230,8867 246,6227 454,2656 258,3414] /StructParent 4 /Подтип /Ссылка /Тип /Аннот >> эндообъект 69 0 объект > /Граница [0 0 0] /Contents (Genetics and Genomics Commons) /Rect [137.2383 225.7906 291.3008 237.5094] /StructParent 5 /Подтип /Ссылка /Тип /Аннот >> эндообъект 70 0 объект > /Граница [0 0 0] /Содержание /Прямо [72.B)l+jガ6gkK:dTspoke>#`5 ‘[email protected]#JhƋi:$ zgQ/

    Научные протоколы. Анализ стабильности D-петли в реакциях гомологичной рекомбинации, управляемых DMC1 и RAD51.

      Авторы: Дмитрий Бугреев, Роберто Пецца, Ольга Мазина, Олег Волошин, Р. Даниэль Камерини-Отеро и Александр Мазин
      

    Аннотация

    Начальные этапы гомологичной рекомбинации (HR) включают процессинг концов ДНК экзонуклеазами с образованием хвостов 3’-оцДНК (1–5). Затем белок семейства RecA (вездесущий Rad51 и специфичный для мейоза Dmc1) связывается с этой одноцепочечной ДНК и способствует инвазии концов ДНК в гомологичную дуплексную ДНК (6,7).В результате образуются совместные молекулы (D-петли). В настоящее время считается, что совместные молекулы продолжают движение по одному из двух путей. D-петли, предназначенные для процессинга по пути DSBR (репарация двухцепочечных разрывов), должны сопротивляться диссоциации для создания кроссинговеров, а те, которые предназначены для пути SDSA (синтез-зависимый отжиг нитей), должны диссоциировать с образованием некроссоверов. Механизм, который направляет интермедиаты рекомбинации в эти пути HR, неизвестен. Мы продемонстрировали, что D-петли, генерируемые DMC1, значительно более устойчивы к диссоциации белками миграции ветвей RAD54 и геликазой синдрома Блума (BLM), чем петли, образованные RAD51.Мы предполагаем, что внутренняя резистентность интермедиатов рекомбинации, генерируемых DMC1, помогает обеспечить образование кроссинговера, необходимого для верной сегрегации гомологичных хромосом в мейозе. Здесь мы описываем протоколы анализа стабильности D-петли с использованием очищенных белков HR человека.

    Реагенты

    1. Очищенные человеческие, Rad51, DMC1, Rad54, BLM, мышиные белки HOP2/MND1
    2. Суперспиральная дцДНК pUC19
    3. Олигонуклеотиды (IDT ДНК)
    4. [γ-32P]АТФ (PerkinElmer Life Science)
    5. Полинуклеотидкиназа T4, эндонуклеазы рестрикции SspI и NdeI (New England Biolabs)
    6. Колонка
    7. Micro-BioSpin 6 (Bio-Rad).
    8. 12% полиакриламидный гель (19:1) с 8 М мочевиной
    9. Система секвенирования SequaGel (Национальная диагностика)
    10. 1% агарозный гель
    11. 1xTAE буфер (40 мМ Трис-ацетат, рН 8,3 и 1 мМ ЭДТА)
    12. 1X буфер TBE (89 мМ трис-бората, pH 8,3 и 1 мМ EDTA
    13. Бумага для хроматографии DE81 (ватман)
    14. Протеиназа К (Рош)
    15. Набор для извлечения геля QIAEX II (Qiagen)
    16. Перманганат калия, пирролидин (Aldrich)
    17. Стоп-раствор (95% формамид, 20 мМ ЭДТА, 0.05% бромфеноловый синий и 0,05% ксилолцианол ФФ, USB)

    Оборудование

    1. Термостат
    2. Аппарат для электрофореза
    3. Блок питания
    4. Осушитель геля
    5. Storm 840 PhosphorImager (GE Healthcare)
    6. Сканер FujiFilm FLA-9000 (GE Healthcare)

    Процедура

    Выбор стратегии для анализа стабильности D-петли in vitro

    В этом анализе использовали очищенные белки RAD51, DMC1, RAD54, BLM и мыши HOP2/MND1

    человека.Rad51 и DMC1 необходимы для образования совместных молекул (D-петлей). Активность этих белков стимулируется либо Ca2+, либо гетеродимером HOP2/MND1 (8-11). Белки Rad54 и BLM необходимы для диссоциации D-петлей посредством их активности по миграции ветвей ДНК (9,12). В то время как Ca2+ стимулирует образование D-петли с помощью RAD51 или DMC1, он ингибирует диссоциацию D-петли, катализируемую Rad54 или BLM. Следовательно, перед стадией разрушения D-петли из реакционной смеси необходимо удалить Ca2+ путем добавления эквимолярного количества EGTA.Анализ защиты синаптических комплексов (13,14) используется как независимый подход для подтверждения большей устойчивости нуклеопротеиновых комплексов DMC1 к диссоциации с помощью RAD54. Кроме того, химический след с перманганатом калия используется для оценки длины комплексов нуклеопротеидов DMC1 и RAD51 и выявления различий в структуре этих комплексов.

    Дизайн ДНК-субстратов для анализа образования D-петли

    1. Используйте хвостатую двухцепочечную ДНК, которая имитирует один конец сломанной хромосомы, обработанной специфическими экзонуклеазами (рис.2a в Bugreev et al., 2010) для образования филаментов RAD51 или DMC1 в анализе D-петли.
    2. Пометьте 100-мерный олигонуклеотид № 209 (таблица 1 в Bugreev et al, 2010) с помощью [γ-32P] АТФ и полинуклеотидкиназы T4, а затем очистите его с помощью колонки Micro-BioSpin 6 (Bio-Rad).
    3. Отжигают меченый олигонуклеотид (№ 209) с 36-мерным олигонуклеотидом (№ 199) (таблица 1 в Bugreev et al, 2010) для создания хвостатого субстрата двухцепочечной ДНК. Одноцепочечная часть двуцепочечной ДНК с хвостом (63 нуклеотида) комплементарна участку суперскрученной (sc) двухцепочечной ДНК pUC19, которая представляет собой гомологичную матрицу ДНК.Ожидается, что 3′-конец хвостатой ДНК вторгнется в ссДНК, образуя D-петлю (Fig. 2b и 2d в Bugreev et al, 2010). Двухцепочечная часть хвостовой ДНК (36 п.н.) не комплементарна ДНК pUC19.

    Дизайн ДНК-субстратов для анализа защиты синаптических комплексов и химического следа с перманганатом калия .

    Одноцепочечный олигонуклеотид (# SspI) предназначен для комплементарности области суперскрученной двухцепочечной ДНК pUC19, охватывающей уникальный сайт эндонуклеазы рестрикции SspI посередине.Этот олигонуклеотид инкубируют с RAD51 или DMC1 с образованием нуклеопротеиновой нити. Затем эти нуклеопротеиновые филаменты используются для формирования синаптических комплексов, защищающих плазмидную ДНК от расщепления SspI, сайт которого перекрывается с комплексами, но не NdeI, сайт которого находится вне синаптического комплекса (см. рис. 3а в Bugreev et al.). др., 2010).

    1. Используйте оцДНК (#PP-100), хвостовую ДНК (#PP-100/#PP-35L) и оцДНК (#PP-0), хвостовую ДНК (#PP-0/#PP-35L) (Таблица 1 в приложении в Bugreev et al, 2010) для оценки длины и выявления структуры синаптических комплексов соответственно в следах KMnO4.
    2. Пометьте олигонуклеотиды #PP-100 и #PP-0 с помощью [γ-32P] АТФ и полинуклеотидкиназы T4, а затем очистите их с помощью колонки Micro-BioSpin 6 (Bio-Rad).
    3. Отжиг меченого 100-мерного олигонуклеотида (#PP-100) или 70-мерного олигонуклеотида (#PP-0) с 35-мерным олигонуклеотидом (#PP-35L) для создания хвостовых ДНК.

    Получение нативных D-петель в присутствии Ca2+ и их диссоциация с помощью RAD54 .

    1. Приготовьте исходную смесь из следующих ингредиентов, чтобы их конечная концентрация составляла 25 мМ трис-ацетата, pH 7.5, 1 мМ АТФ, 1 мМ ацетат магния, 2 мМ хлорид кальция, 2 мМ ДТТ, БСА (100 мкг/мл), 20 мМ фосфокреатин, креатинфосфокиназа (30 единиц/мл) и хвостовая ДНК, меченная 32P (#209). */#199; 30 нМ, молекул) в 10 мкл от общего реакционного объема.
    2. Добавьте 1 мкл 10 мкМ белков DMC1 или 10 мкМ RAD51 (до конечной концентрации 1 мкМ) в исходную смесь (8 мкл), чтобы инициировать формирование филаментов. Инкубируйте в течение 15 мин при 37 ° C.
    3. Добавьте 1 мкл 500 мкМ (нуклеотидов) pUC19 scDNA (до конечной концентрации 50 мкМ нуклеотидов), чтобы инициировать образование D-петли.Инкубируйте в течение 15 мин при 37 ° C. Общий объем реакции составляет 10 мкл.
    4. Добавить 1 мкл 20 мМ EGTA pH 8,0 (до конечной концентрации 2 мМ) для истощения Ca2+ в случае, когда за образованием D-петли следует диссоциация D-петли. Инкубировать 5 мин при 37 °C
    5. Добавьте 1 мкл 2,4 мкМ RAD54 (до конечной концентрации 200 нМ) и инкубируйте в течение указанных периодов времени при 37 °C для диссоциации D-петли.
    6. Добавьте 6 мкл стоп-буфера (3 мг/мл протеиназы К, 1,5 % SDS, 18 % глицерина и 0,03 % бромфенолового синего).Инкубируйте в течение 10 мин при 37 ° C, чтобы депротинизировать продукты диссоциации D-петли.
    7. Образцы анализируют электрофорезом в 1 % агарозных гелях в 1х ТАЕ-буфере при постоянном напряжении 5 В/см.
    8. Сухие гели на бумаге DEAE. Визуализируйте и оцените их количество с помощью Storm 840 PhosphorImager (GE Healthcare)

    Получение и диссоциация нативных недепротеинизированных D-петлей в присутствии HOP2/MND1 .

    1. Смешайте следующие ингредиенты, чтобы получить конечную концентрацию 25 мМ трис-ацетата, pH 7.5, 25 мМ NaCl, 1 мМ АТФ, 2,5 мМ ацетата магния, 2 мМ ДТТ, 100 мкг/мл БСА, 20 мМ фосфокреатина, 30 ЕД/мл креатинфосфокиназы и 32P-меченой хвостовой ДНК (#209*/#199; 14,3). нМ, молекул) в 10 мкл от общего реакционного объема.
    2. Добавьте 1 мкл 10 мкМ белков DMC1 или 10 мкМ RAD51 (до конечной концентрации 1 мкМ) в реакционную смесь (7 мкл), чтобы инициировать образование филаментов. Инкубировать в течение 10 мин при 37 ° C.
    3. Добавьте 1 мкл 2 мкМ HOP2/MND1 (до конечной концентрации 0,2 мкМ) и инкубируйте еще 10 мин при 37°C
    4. Добавьте 1 мкл 180 мкМ (нуклеотидов) scDNA pUC19 (до конечной концентрации 18 мкМ нуклеотидов), чтобы инициировать образование D-петли.Инкубировать в течение 10 мин при 37 ° C. Общий объем реакции составляет 10 мкл.
    5. Добавьте 1 мкл 2,2 мкМ RAD54 (до конечной концентрации 200 нМ) или 1 мкл 1,1 мкМ BLM (до конечной концентрации 100 нМ) и инкубируйте в течение указанных периодов времени при 37 °C в течение Диссоциация D-петли.
    6. Депротеинизируйте и проанализируйте продукты диссоциации D-петли, как описано выше.
      • ВАЖНЫЙ ЭТАП: Эффективность образования D-петли зависит от суперспиральности плазмидной ДНК и от длины нуклеопротеиновых филаментов, образованных на оцДНК или хвостовой ДНК.Для амплификации плазмиды pUC19 мы рекомендуем использовать штаммы E. coli, не имеющие мутации в гене ДНК-гиразы, например, HB101 (Promega). Кроме того, не используйте субстраты одноцепочечной ДНК длиной менее 90 нуклеотидов для хвостовой двухцепочечной ДНК длиной менее 36 п.н./64 нуклеотида.

    Анализ защиты синаптического комплекса .

    1. Приготовьте исходную смесь из следующих ингредиентов, чтобы получить их конечную концентрацию: 20 мМ трис-HCl, pH 7,4, 70 мМ NaCl, 2 мМ АТФ, 2,5 мМ MgCl2, 1 мМ DTT, 7.5 мМ креатинфосфата, 30 единиц/мл креатинкиназы и одноцепочечной ДНК (# Sspl, 4M нуклеотидов) в 10 мкл общего реакционного объема.
    2. Добавьте 1 мкл 28 мкМ белков DMC1 или 28 мкМ RAD51 (до конечной концентрации 2,8 мкМ) в исходную смесь (7 мкл), чтобы инициировать формирование филаментов. Инкубируйте в течение 5 мин при 37 ° C.
    3. Добавьте 1 мкл 15 мкМ HOP2/MND1 (до конечной концентрации 1,5 мкМ) по показаниям и инкубируйте еще 5 мин при 37°C
    4. Добавьте 1 мкл 600 мкМ (нуклеотидов) scDNA pUC19 (до конечной концентрации 60 мкМ нуклеотидов), чтобы инициировать образование D-петли.Инкубировать в течение 10 мин при 37 ° C. Общий объем реакции составляет 10 мкл.
    5. Добавьте 1 мкл 2,2 мкМ RAD54 (до конечной концентрации 200 нМ) и инкубируйте в течение 7 мин при 37 °C для диссоциации D-петли.
    6. Добавьте 1 мкл эндонуклеазы рестрикции SspI (0,8 ед.) или NdeI (5 ед.), чтобы инициировать расщепление ДНК. Инкубировать 10 мин при 37°С.
    7. Образцы анализируют электрофорезом в 1 % агарозных гелях в 1х ТАЕ-буфере при постоянном напряжении 5 В/см.
    8. Окрашивайте гели бромистым этидием (2 мкг/мл в воде) в течение 1 часа, обесцвечивайте в течение 1 часа в большом объеме воды, а затем анализируйте на станции документирования гелей Chemilmager 5500 (Alpha Innotech) с использованием программного обеспечения Alpha EaseFC для количественной оценки данных. .

    Оценка длины синаптического комплекса по следу KMnO4 .

    1. Приготовьте исходную смесь, объединив следующие ингредиенты, чтобы получить их конечную концентрацию: 28,5 мМ Трис-ацетат, рН 7,4, 20 мМ KCl, 2 мМ АТФ, 2 мМ CaCl2, 0,025 мМ ДТТ, 2% глицерина, 0,01 мМ ЭДТА и 5′. -32P-меченая оцДНК (#PP-100, 6 мкМ нт) или 32P-меченая хвостовая ДНК (#PP-100*/#PP-35L, 6 мкМ нт) в 100 мкл от общего реакционного объема.
    2. Добавьте 1 мкл 30 мкМ белков DMC1 или 30 мкМ RAD51 (до конечной концентрации 3 мкМ) в исходную смесь (98 мкл), чтобы инициировать формирование филаментов.Инкубируйте в течение 15 мин при 37 ° C.
    3. Добавьте 1 мкл 300 мкМ (нуклеотидов) scDNA pUC19 (до конечной концентрации 30 мкМ нуклеотидов), чтобы инициировать образование синаптического комплекса. Инкубируйте в течение 15 мин при 37 ° C. Общий объем реакции составляет 100 мкл.
    4. Добавить в реакцию 2 мкл 12,5 мМ KMnO4 (до конечной концентрации 0,25 мМ). Инкубируйте в течение 2 ½ мин при 30°C для модификации ДНК.
    5. Добавьте 10 мкл 14,3 М β-меркаптоэтанола, чтобы остановить реакцию.
    6. Добавьте 20 мкл буфера для загрузки геля (50 мМ ЭДТА, 5 % SDS, 25 % глицерина и 0.03% бромфенолового синего) до прекращения реакции.
    7. Проанализируйте образцы с помощью электрофореза в 1 % агарозных гелях в 1x ТАЕ-буфере, содержащем 3 мМ MgCl2 в геле и подвижном буфере. Запустите гели в холодной комнате при 3 В/см в течение 30 мин.
    8. После электрофореза вырезают 5′-32P-меченый PP-100, мигрирующий в положения суперскрученной pUC19 и свободного олигонуклеотида.
    9. Извлеките ДНК из геля с помощью набора для извлечения из геля QIAEX II (Qiagen).
    10. После осаждения этанолом растворите каждый сухой осадок в 100 мкл 1 М пирролидина и 1 мМ ЭДТА.Инкубируйте в течение 20 мин при 90°C для химической деградации модифицированной ДНК.
    11. Испарите раствор с помощью концентратора SpeedVac (SpeedVac)
    12. Растворите каждую таблетку в 100 мкл воды и высушите гранулы в SpeedVac.
    13. Подсчитайте радиоактивность образцов в сцинтилляционном счетчике по методу черенковского счета и растворите продукты химической деградации в стоп-растворе (95% формамид, 20 мМ ЭДТА, 0,05% бромфеноловый синий и 0,05% ксиленцианол ФФ) до получения 5000 импульсов в минуту/мкл. .
    14. Нанести по 2 мкл образца на лунку 12 % (19:1) полиакриламидного геля SequaGel (34×20×0,04 см), содержащего 8 М мочевины в 1x буфере TBE. Запустите гель при постоянной мощности 40 Вт, пока бромфеноловый синий не достигнет дна.
    15. Поместите гели на фотопластинки FujiFilm BAS-IP MS 2040 без предварительной сушки и отсканируйте их с помощью сканера FujiFilm FLA-9000. Обрабатывайте изображения с помощью программного обеспечения FujiFilm Multi Gauge V3.0.
    16. Субъект 5’-32P-меченого олигонуклеотида PP-100 подвергается аналогичной процедуре без добавления RAD51 или DMC1 и используется в качестве контроля.

    Анализ структуры нуклеопротеиновых филаментов, образованных RAD51 и DMC1, с помощью футпринтинга KMnO4 .

    1. Приготовьте исходную смесь, объединив следующие ингредиенты, чтобы получить их конечную концентрацию: 28,5 мМ Трис-ацетат, pH 7,4, 20 мМ KCl, 2 мМ АТФ, 2 мМ MgCl2, 0,025 мМ ДТТ, 2 % (об./об.) глицерина, 0,01 мМ ЭДТА и 5′-32P-меченая оцДНК (#PP-0, 1 мкМ нт) или меченая 32P хвостовая ДНК (#PP-0*/#PP-35L, 1,5 мкМ нт) в 10 мкл от общего реакционного объема .
    2. Добавьте 1 мкл 30 мкМ белков DMC1 или 30 мкМ RAD51 (до конечной концентрации 3 мкМ) к 9 мкл исходной смеси, чтобы инициировать формирование филаментов.Инкубируйте в течение 30 мин при 37 ° C. Общий объем реакции составляет 10 мкл.
    3. Добавить в реакцию 1 мкл 1 мМ KMnO4 (до конечной концентрации 0,1 мМ) и инкубировать 1 мин при 20°C для модификации ДНК.
    4. Добавьте 200 мкл стоп-раствора (375 мМ ацетата натрия, pH 5,0, 250 мМ β-меркаптоэтанола и 25 мкг/мл ДНК спермы лосося, чтобы остановить реакцию.
    5. Добавить 633 мкл (3 объема) 95% этанола для осаждения продуктов модификации KMnO4.
    6. Инкубируйте на сухом льду в течение 10 минут, а затем вращайте пробирки Eppendorf при 16 000 g в течение 30 минут.
    7. Осадок промыть 70 % этанолом, высушить и ресуспендировать в 100 мкл 1 М пирролидина и 1 мМ ЭДТА. Инкубируйте в течение 20 мин при 90°C для химической деградации модифицированной ДНК.
    8. Испарите раствор с помощью концентратора SpeedVac (SpeedVac)
    9. Растворите каждую таблетку в 100 мкл воды и высушите гранулы в SpeedVac.
    10. Подсчитайте радиоактивность образцов в сцинтилляционном счетчике по методике черенковского счета и растворите продукты химической деградации в стоп-растворе (95% формамид, 20 мМ ЭДТА, 0.05% бромфенолового синего и 0,05% ксилолцианола FF) для получения 5000 циклов в минуту/мкл.
    11. Нанести по 2 мкл образца на лунку 12 % (19:1) полиакриламидного геля SequaGel (34×20×0,04 см), содержащего 8 М мочевины в 1x буфере TBE. Запустите гель при постоянной мощности 40 Вт, пока бромфеноловый синий не достигнет дна.
    12. Поместите гели на фотопластинки FujiFilm BAS-IP MS 2040 без предварительной сушки и отсканируйте их с помощью сканера FujiFilm FLA-9000. Обрабатывайте изображения с помощью FujiFilm Multi Gauge V3.0 софт.
    13. Субъект 5′-32P-меченой оцДНК (#PP-0 , 1 мкМ нуклеотидов) или ДНК с хвостом (#PP-0 /#PP-35L, 1,5 мкМ нуклеотидов) к аналогичной процедуре без добавления RAD51 или DMC1 и использовать в качестве элементов управления.
      • ВАЖНЫЙ ЭТАП: На результаты модификации перманганатом калия может сильно повлиять состав реакционного буфера, особенно присутствие различных количеств восстанавливающего агента. Чтобы убедиться, что футпринтинг выполняется в точно таких же условиях, диализируйте RAD51 и DMC1 против одной и той же партии буфера для диализа (35 мМ трис-ацетат, pH 7.4, 200 мМ KCl, 20% глицерина, 0,1 мМ ЭДТА, 0,25 мМ ДТТ). Используйте один и тот же буфер для разбавления обоих белков до одинаковой концентрации до образования комплекса и добавьте одинаковый объем буфера для диализа в реакционную смесь в экспериментах с имитацией «без белка».

    Ожидаемые результаты

    Описанный здесь протокол был разработан для проверки стабильности D-петлей, образованных DMC1 и RAD51. Формирование D-петлей отмечает важную точку бифуркации в ЧСС; их дальнейший процессинг по пути DSBR или SDSA может привести либо к перекрестным, либо к неперекрестным рекомбинантам.Важным вопросом является то, как осуществляется выбор между этими механизмами. Возможное очевидное различие заключается в том, что D-петли, предназначенные для обработки SDSA, должны диссоциировать, а те, которые предназначены для DSBR, должны быть устойчивы к диссоциации. Используя представленный здесь протокол, мы продемонстрировали, что действительно D-петли, образованные человеческим DMC1, но не RAD51, сопротивляются разрушению белками миграции ветвей. Эта разница в стабильности может отражать различия в структуре пресинаптических филаментов DMC1 и RAD51.Насколько нам известно, наши результаты являются первыми, показавшими, что промежуточные продукты рекомбинации, катализируемые RAD51 и DMC1, биохимически различимы.

    Ссылки

    1. Pâques, F. & Haber, J.E. Множественные пути рекомбинации, индуцированные двухцепочечными разрывами у Saccharomyces cerevisiae. Microbiology and Molecular Biology Reviews 63, 349-404 (1999).
    2. Нил, М.Дж. и Кини, С. Разъяснение механики обмена цепями ДНК при мейотической рекомбинации. Природа 442, 153-8 (2006).
    3. Мимиту, Э.П. и Симингтон, Л.С. Sae2, Exo1 и Sgs1 сотрудничают в процессинге двухцепочечных разрывов ДНК. Природа 455, 770-4 (2008).
    4. Zhu, Z., Chung, W.H., Shim, E.Y., Lee, S.E. & Ira, G. Хеликаза Sgs1 и две нуклеазы Dna2 и Exo1 вырезают концы двухцепочечного разрыва ДНК. Cell 134, 981-94 (2008).
    5. Gravel, S., Chapman, J.R., Magill, C. & Jackson, S.P. ДНК-геликазы Sgs1 и BLM способствуют резекции двухцепочечных разрывов ДНК. Genes Dev 22, 2767-72 (2008).
    6. Бьянко, П. Р., Трейси, Р. Б. и Ковальчиковски, С. С. Белки с заменой цепи ДНК: биохимическое и физическое сравнение. Front Biosci 3, D570-603 (1998).
    7. Сунг П., Крейчи Л., Ван Комен С. и Сехорн М.Г. Рекомбиназа Rad51 и медиаторы рекомбинации. J Biol Chem 278, 42729-32 (2003).
    8. Бугреев Д.В. & Мазин, А.В. Ca2+ активирует человеческий гомологичный рекомбинационный белок Rad51, модулируя его АТФазную активность. Proc Natl Acad Sci USA 101, 9988-93 (2004).
    9. Бугреев Д.В., Голуб Е.И., Стасяк А.З., Стасяк А., Мазин А.В. Активация рекомбиназы Dmc1, специфичной для мейоза человека, с помощью Ca2+. J Biol Chem 280, 26886-95 (2005).
    10. Петухова Г.В. и другие. Белки Hop2 и Mnd1 действуют совместно с Rad51 и Dmc1 в мейотической рекомбинации. Nat Struct Mol Biol 12, 449-53 (2005).
    11. Пецца Р.Дж., Петухова Г.В., Гирландо Р. и Камерини-Отеро Р.D. Молекулярная активность специфичных для мейоза белков Hop2, Mnd1 и комплекса Hop2-Mnd1. J Biol Chem 281, 18426-34 (2006).
    12. Бугреев Д.В., Ханаока Ф., Мазин А.В. Rad54 диссоциирует гомологичные промежуточные продукты рекомбинации путем миграции ветвей. Nat Struct Mol Biol 14, 746-753 (2007).
    13. Hsieh, P., Camerini-Otero, C.S. & Camerini-Otero, RD. Событие синапса в гомологичном спаривании ДНК: RecA распознает и спаривает менее одного спирального повтора ДНК. Proc Natl Acad Sci USA 89, 6492-6 (1992).
    14. Пецца, Р.Дж., Волошин, О.Н., Ваневски, Ф. и Камерини-Отеро, Р.Д. Hop2/Mnd1 действует на двух критических этапах гомологичного спаривания, стимулируемого Dmc1. Genes Dev 21, 1758-66 (2007).

    Благодарности

    Мы благодарим P. Sung (Yale U.) и W. Holloman (Cornell U.) за векторы экспрессии RAD51 и BLM. Мы благодарим сотрудников лабораторий Camerini-Otero и Mazin за комментарии и обсуждения. Мы благодарим М. Лихтен (NCI) и П.Hsieh (NIH) за критическое прочтение этой рукописи. Эта работа была поддержана грантами NIH CA100839, MH084119, премией Общества лейкемии и лимфомы 1054-09 (для AVM) и программой внутренних исследований Национального института диабета, болезней органов пищеварения и почек (для RDC-O).

    Ассоциированные публикации

    Устойчивость D-петлей DMC1 к диссоциации может объяснять потребность в DMC1 в мейозе . Дмитрий В. Бугреев, Роберто Дж. Пецца, Ольга М. Мазина, Олег Н. Волошин, Р. Даниэль Камерини-Отеро и Александр В. Мазин. Природа Структурная и молекулярная биология 18 (1) 56–60 12/12/2010 doi:10.1038/nsmb.1946

    Информация об авторе

    Дмитрий Бугреев, Ольга Мазина и Александр Мазин , Кафедра биохимии и молекулярной биологии, Медицинский колледж Дрексельского университета, Филадельфия, Пенсильвания 19102-1192, США

    Роберто Пецца , Фонд медицинских исследований Оклахомы, Оклахома-Сити, Оклахома 73104, США

    Олег Волошин и Р.Daniel Camerini-Otero , Отделение генетики и биохимии, Национальный институт диабета, болезней органов пищеварения и почек (NIDDK), Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд 20892, США

    Адрес для переписки: Р. Даниэль Камерини-Отеро ([email protected]), Александр Мазин ([email защищен])

    Источник: Protocol Exchange (2011) doi:10.1038/protex.2011.208. Первоначально опубликовано в сети 3 февраля 2011 г. .

    HOP2-MND1 модулирует связывание RAD51 с нуклеотидами и ДНК

    HOP2-MND1 не влияет на накопление RAD51-ADP

    Ранее было обнаружено, что гидролиз АТФ нуклеопротеиновой нитью RAD51 человека (hRAD51) в присутствии Mg приводит к быстрому накоплению комплексов hRAD51-ADP-ssDNA, что сопровождается потерей активности обмена цепями ДНК 39 .С др. стороны, Ca 2+ путем ингибирования АТФазы hRAD51 сохраняет филамент в АТФ-связанной форме, которая активна в обмене цепей ДНК 39 . Здесь мы исследовали, может ли HOP2-MND1, который стимулирует активность замены цепи ДНК hRAD51 в присутствии Mg 2+ , также подавлять накопление комплексов hRAD51-ADP-оцДНК.

    Чтобы проверить влияние HOP2-MND1 на накопление комплексов hRAD51-ADP, филаменты hRAD51-оцДНК инкубировали с мышиным HOP2-MND1 (mHOP2-MND1) или без него в присутствии Ca 2+ или Mg 2 + и [α- 32 P]АТФ.Филаменты выделяли на фильтрах Nytran и анализировали их нуклеотидный состав методом ТСХ 39,40 . Результаты не показали значительного влияния mHOP2-MND1 на накопление фракции hRAD51-ADP в присутствии Ca 2+ или различных концентраций Mg 2+ (рис. 1a–c), хотя mHOP2-MND1 небольшой ингибирующий эффект hRAD51 на гидролиз АТФ (дополнительная рис. 1).

    Рисунок 1: HOP2-MND1 не препятствует накоплению комплексов RAD51-ADP, но стабилизирует филамент в активной форме.

    ( a ) hRAD51 (10 мкМ) добавляли к оцДНК (#186, 30 мкМ) или к смеси оцДНК с mHOP2-MND1 (1 мкМ) в присутствии [α- 32 P]АТФ и указанные ионы металлов. Нуклеопротеиновые комплексы hRAD51 выделяли на фильтрах Nytran и анализировали содержание АТФ/АДФ с помощью ТСХ 39 . ( b ) Графическое представление данных из ( a ). ( c ) Влияние концентраций Mg 2+ на накопление hRAD51-ADP измеряли, как в ( a ).Концентрации Mg 2+ и Ca 2+ составляли 1 мМ каждая или 50 мкМ (когда указано). ( d ) Влияние mHOP2-MND1 на флуоресценцию комплексов hRAD51 с одноцепочечной ДНК etheno M13 в отсутствие (обозначается как «нет h3M1») или в присутствии mHOP2-MND1 (0,2 мкМ) (обозначается как «h3M1»). Опыты повторяли не менее трех раз; планки погрешностей указывают на с.э.м.

    Известно, что образование активного филамента hRAD51-оцДНК в присутствии АТФ вызывает растяжение оцДНК.Используя этено-оцДНК, флуоресцентное производное оцДНК, это изменение в структуре оцДНК можно визуализировать по увеличению флуоресценции. Ранее мы показали, что накопление АДФ hRAD51-оцДНК в присутствии Mg 2+ вызывает постепенное снижение флуоресценции этено-оцДНК 39 . Это снижение, однако, может быть предотвращено ингибированием гидролиза АТФ в присутствии Ca 2+ . Здесь мы проверили влияние mHOP2-MND1 на флуоресценцию нуклеопротеиновых комплексов hRAD51, образованных в присутствии mHOP2-MND1 и Mg 2+ .Мы обнаружили, что mHOP2-MND1 почти полностью предотвращает снижение флуоресценции, что указывает на сохранение активного состояния hRAD51-ssDNA.

    Таким образом, в отличие от Ca 2+ , mHOP2-MND1 не подавляет накопление АДФ в нуклеопротеиновом филаменте hRAD51. Однако, несмотря на накопление АДФ, mHOP2-MND1 был способен поддерживать филамент hRAD51-ssDNA в «высокоаффинном» активном состоянии, способном к обмену цепей ДНК. Тем не менее, присутствие трифосфатных нуклеозидов было необходимо для стимуляции mHOP2-MND1 обмена цепями ДНК с помощью hRAD51, поскольку ни АДФ, ни АМФ не поддерживали реакцию (дополнительная рис.2).

    HOP2-MND1 стимулирует обмен цепей ДНК RAD51 при низкой Mg

    2+

    Мы заметили, что независимо от mHOP2-MND1 доля комплексов hRAD51–ADP снижалась при низкой Mg 2+ (≤0,1 мМ) и оставалась неизменной. ниже 30% от общего количества комплексов hRAD51-ATP/ADP (Fig. 1a (дорожки 1 и 5)), уровень, который не ингибирует обмен нити ДНК 39 . Это уменьшение количества комплексов hRAD51-АДФ при низкой концентрации Mg 2+ согласуется с уменьшением аффинности связывания hRAD51 с АДФ при низкой концентрации Mg 2+ (ссылка.41). Здесь мы исследовали, стимулируют ли низкие концентрации Mg 2+ также спаривание ДНК с помощью hRAD51. Используя анализ D-петли, который измеряет инвазию одноцепочечной ДНК в суперскрученную двуцепочечную ДНК (рис. 2а), мы обнаружили, что в отсутствие mHOP2-MND1 Mg 2+ в низких концентрациях (0,05–0,5  мМ) показал лишь небольшую стимуляцию hRAD51. Обмен цепями ДНК (рис. 2б, в). Добавление mHOP2-MND1 вызывало сильную стимуляцию образования D-петли с максимальным выходом, наблюдаемым при 0,025–0,1  мМ Mg 2+ (рис.2б,в). Поскольку эксперименты, описанные выше, были выполнены с RAD51 человека и HOP2-MND1 мыши, мы хотели подтвердить наши выводы о RAD51 мыши (mRAD51), который отличается от hRAD51 четырьмя аминокислотными заменами. Действительно, используя mRAD51, мы наблюдали ту же зависимость моделирования образования D-петли с помощью mHOP2-MND1 от концентраций Mg 2+ , что и для hRAD51 (дополнительная рис. 3). Таким образом, mHOP2-MND1 в сочетании с низкими концентрациями Mg 2+ показал наиболее сильную стимуляцию обмена цепей ДНК RAD51.

    Рисунок 2: HOP2-MND1 сильно стимулирует образование D-петли при низкой концентрации Mg 2+ .

    ( a ) Схема формирования D-петли. Звездочка указывает на этикетку 32 P. ( b ) Влияние mHOP2-MND1 (0,1 мкМ) на образование D-петли с помощью hRAD51 (1 мкМ) с пДНК pUC19 (50 мкМ) и оцДНК (# 186, 3 мкМ) в буфере, содержащем Mg 2+ при указанные концентрации. Образование D-петли анализировали электрофорезом в 1% агарозном геле. Маркеры молекулярного размера: D-петли (pUC19; 2686 нуклеотидов) и оцДНК (№ 186; 120 нуклеотидов) указаны стрелками.( c ) Данные из ( b ) показаны в виде графика. Опыты повторяли не менее трех раз; планки погрешностей указывают на с.э.м.

    HOP2-MND1 обходит требование RAD51 для Me

    2+

    Во время обмена цепями ДНК ионы двухвалентных металлов (Me 2+ ) необходимы в основном для образования комплексов с молекулами АТФ, что облегчает их связывание с RAD51 (ref 42). Поэтому мы предположили, что mHOP2-MND1 может заменить Me 2+ , например, за счет усиления взаимодействия hRAD51 с АТФ.Мы проверили это предложение, полностью исключив Me 2+ из реакции. Для устранения возможных следов Me 2+ в реакции добавляли ЭДТА (0,5  мМ). Мы обнаружили, что действительно mHOP2-MND1 может индуцировать образование D-петли с помощью hRAD51 в отсутствие Me 2+ (Fig. 3a,b). Важно отметить, что для реакции требовались повышенные концентрации АТФ (> 3 мМ; с максимумом при 10 мМ), что указывает на то, что связывание АТФ было ограниченным этапом во время обмена цепями ДНК в отсутствие Me 2+ .Напротив, hRAD51 сам по себе не способствовал обмену цепей ДНК в отсутствие Me 2+ при любой тестируемой концентрации АТФ (фиг. 3). Точно так же mHOP2-MND1 стимулировал образование D-петли с помощью mRAD51 в отсутствие Me 2+ (дополнительная рис. 4). Мы пришли к выводу, что mHOP2-MND1 может заменить Me 2+ , способствуя связыванию АТФ с RAD51.

    Рис. 3: HOP2-MND1 обеспечивает обмен цепями ДНК RAD51 в отсутствие ионов двухвалентных металлов.

    ( a ) Эффект mHOP2-MND1 (0.1 мкМ) на образование D-петли с помощью hRAD51 (1 мкМ) с оцДНК (# 186, 3 мкМ) и пцДНК pUC19 (50 мкМ) в присутствии АТФ в указанных концентрациях. Образование D-петли анализировали электрофорезом в 1% агарозном геле. ( b ) Данные из ( a ) показаны в виде графика. Опыты повторяли не менее трех раз.

    HOP2-MND1 активирует RAD51 K133A, усиливая его связывание с АТФ

    Мутация K133A в hRAD51 сильно подавляет связывание с АТФ, тем самым инактивируя обмен цепями ДНК in vitro 43,44 .Поскольку hRAD51 K133A хорошо взаимодействует с mHOP2-MND1 (ссылка 37), мы проверили, может ли mHOP2-MND1 восстановить активность замены цепи ДНК hRAD51 K133A путем стимуляции его связывания с АТФ.

    Активность замены цепи ДНК hRAD51 K133A измеряли с помощью анализа D-петли (рис. 2а). Хотя, как и ожидалось, в отсутствие mHOP2-MND1 не наблюдалось обмена цепями ДНК (рис. 4а, дорожки 1–4), добавление mHOP2-MND1 активировало активность обмена цепями ДНК hRAD51 K133A (рис. 4а, дорожки 5–4). 8).Стимулирующий эффект был даже сильнее, чем у hRAD51 дикого типа, вероятно, из-за того, что, в отличие от hRAD51 дикого типа, hRAD51 K133A не накапливает АДФ внутри филамента. Для реакции требовались повышенные концентрации Mg 2+ (>0,5 мМ). В отличие от hRAD51 дикого типа, обмен цепей ДНК, стимулируемый hRAD51 K133A, не поддерживался Ca 2+ (рис. 4b).

    Рисунок 4: HOP2-MND1 стимулирует активность обмена цепями ДНК RAD51 K133A.

    ( a ) hRAD51 K133A (1 мкМ) смешивали с оцДНК (#90, 3 мкМ) в отсутствие (дорожки 1–4) или в присутствии mHOP2-MND1 (0.1 мкМ) (дорожки 5–8) и указанные концентрации Mg 2+ . Реакции инициировали добавлением ссДНК pUC19 (50 мкМ). Анализ образования D-петли с помощью электрофореза в 1% агарозном геле и графическое представление данных показаны на левой и правой панелях соответственно. ( b ) mHOP2-MND1 стимулирует активность замены цепи ДНК hRAD51K133A в присутствии Mg 2+ (2 мМ), но не Ca 2+ (2 мМ). ( c ) mHOP2-MND1 стимулирует связывание АТФ филаментом hRAD51K133A-оцДНК в присутствии Mg 2+ .Эффективность связывания [α- 32 P]АТФ с помощью hRAD51 K133A анализировали путем связывания с фильтром. mHOP2-MND1 (1 мкМ), hRAD51 K133A (10 мкМ) или mHOP2-MND1, а затем hRAD51 K133A инкубировали с оцДНК (#90, 30 мкМ) в присутствии [α- 32 P]АТФ и Mg 2 + (2 мМ) или Ca 2+ (2 мМ) с последующей фильтрацией через нитрановую мембрану. Опыты повторяли не менее трех раз.

    Затем мы непосредственно оценили влияние mHOP2-MND1 на связывание АТФ с помощью hRAD51 K133A, используя связывание с фильтром (рис.4в) 39,40 . В соответствии с предыдущими сообщениями 43,44 , связывание АТФ одним hRAD51 K133A было неэффективным, поскольку комплексы [α- 32 P]ATP-hRAD51 K133A почти не задерживались на фильтрах. В контрольных экспериментах мы показали, что комплексы hRAD51K133A-ssDNA эффективно удерживались на фильтрах (дополнительная рис. 5). Добавление mHOP2-MND1 существенно стимулировало связывание АТФ с помощью hRAD51 K133A. Важно отметить, что связывание АТФ и обмен цепями ДНК показали одинаковые требования для Me 2+ , это поддерживалось Mg 2+ , но не Ca 2+ (рис.4б,в).

    Эти результаты показывают, что mHOP2-MND1 активирует активность обмена цепями ДНК hRAD51 K133A, стимулируя его взаимодействие с АТФ. Наблюдаемая активация hRAD51 K133A с помощью mHOP2-MND1 может обеспечить, по крайней мере, одно возможное объяснение предыдущего вывода о том, что hRAD51 K133A проявляет определенную функциональность в репарации DSB в клетках человека, несмотря на отсутствие активности обмена цепями ДНК in vitro 44 .

    HOP2-MND1 изменяет предпочтения RAD51 в отношении нуклеотидов

    Во время гидролиза АТФ RAD51 связывает АТФ в конформации основного состояния.Затем при нуклеофильной атаке молекулой воды АТФ принимает конформацию переходного состояния. Здесь мы проанализировали, какая из этих двух конформаций комплекса hRAD51-ATP восприимчива к активации с помощью mHOP2-MND1. Мы использовали два нуклеотидных кофактора, ADP-BeF 3 и ADP-AlF 4 , которые в подавляющем большинстве исследованных белковых комплексов имитировали основное и переходное состояния молекулы АТФ соответственно 45,46 . В отсутствие mHOP2-MND1 только ADP-AlF 4 , но не ADP-BeF 3 , поддерживал обмен цепей ДНК в тестируемых условиях, что указывает на важную роль переходного состояния АТФ для активации активности обмена цепями ДНК. hRAD51 (фиг.5а; полосы 1 и 2). Однако в присутствии mHOP2-MND1 как ADP-AlF 4 , так и ADP-BeF 3 эффективно поддерживали обмен цепями ДНК (рис. 5а; дорожки 3 и 4).

    Рисунок 5: HOP2-MND1 стимулирует активность обмена цепями ДНК RAD51 в присутствии ADP-BeF 3 , аналога АТФ в основном состоянии.

    ( a ) hRAD51 (1 мкМ) инкубировали с оцДНК (#90, 3 мкМ) с или без mHOP2-MND1 (0,2 мкМ) в реакционной смеси, содержащей либо ADP-BeF 3 , либо ADP-AlF 4 .Образование D-петли инициировали добавлением ссДНК pUC19. Маркеры молекулярного размера: D-петли (pUC19; 2686, п.н.) и одноцепочечная ДНК (#90; 90 nt) указаны стрелками. ( b ) Связывание [α- 14 C]ADP-AlF 4 и [α- 14 C]ADP-BeF 3 с помощью hRAD51 (10  мкМ) в отсутствие или в присутствии mHOP2- MND1 (1  мкМ) анализировали путем связывания с фильтром. mHOP2-MND1, hRAD51 или mHOP2-MND1, а затем hRAD51 инкубировали с одноцепочечной ДНК (#71, 30  мкМ) в присутствии Mg 2+ (0.1 мМ) с последующей фильтрацией через нитрановую мембрану. Опыты повторяли не менее трех раз.

    Мы рассмотрели две неисключительные гипотезы: mHOP2-MND1 может специфически усиливать связывание ADP-BeF 3 с hRAD51 или может переводить комплекс hRAD51–ADP–BeF 3 в активную конформацию для замены цепи ДНК. Используя анализ связывания с фильтром и 14 C-меченый ADP, мы обнаружили, что ADP-AlF 4 и ADP-BeF 3 связываются с hRAD51 с одинаковой эффективностью и что mHOP2-MND1 действительно стимулирует связывание нуклеотидов с помощью hRAD51 (рис.5б). Однако стимуляция была примерно одинаковой (~ 2,0 раза) для ADP-AlF 4 и ADP-BeF 3 и, следовательно, сама по себе не могла объяснить специфичность стимуляции обмена цепями ДНК с помощью mHOP2-MND1 в присутствии АДП-БеФ 3 .

    Мы пришли к выводу, что mHOP2-MND1 увеличивает сродство hRAD51 к нуклеотидным кофакторам и способствует превращению филамента hRAD51-нуклеопротеина в активную конформацию замены цепи ДНК. Этот конформационный переход, по-видимому, является ключевым этапом в стимуляции активности обмена цепями ДНК hRAD51 с помощью mHOP2-MND1.

    HOP2-MND1 повышает предпочтение связывания RAD51 с одноцепочечной ДНК

    В отличие от RecA, который предпочтительно связывает одноцепочечную ДНК, RAD51 (человека или дрожжей) проявляет схожее сродство к одноцепочечной и двухцепочечной ДНК в нормальных условиях 47 . Следовательно, могут потребоваться вспомогательные факторы для инициации обмена цепями ДНК in vivo , где присутствуют как одноцепочечная, так и двуцепочечная ДНК. Было показано, что BRCA2 может специфически нагружать hRAD51 на ssDNA 47,48 . Мы предполагаем, что mHOP2-MND1 путем модулирования взаимодействий hRAD51 с нуклеотидными кофакторами может также влиять на его ДНК-связывающую специфичность, т.к. нуклеотидные кофакторы являются хорошо известными регуляторами связывания ДНК hRAD51 39,49 .Прямая связь между связыванием нуклеотидов и ДНК ранее была продемонстрирована для белка RecA, ортолога hRAD51 E. coli (ссылки 50, 51). Здесь мы исследовали влияние mHOP2-MND1 на специфичность связывания ДНК с помощью hRAD51 (рис. 6а).

    Рисунок 6: Влияние порядка добавления ДНК-субстратов на обмен цепей ДНК, стимулируемый RAD51, в присутствии или в отсутствие HOP2-MND1.

    ( a ) Экспериментальная схема. ( b ) Нуклеопротеиновые филаменты собирали путем добавления hRAD51 и mHOP2-MND1, когда указано, к оцДНК (I), оцДНК (II) или смеси оц- и оцДНК (III) в присутствии Ca 2+ (0.85 мМ) или Mg 2+ (0,5 мМ). Реакции I и II запускали добавлением оцДНК или оцДНК соответственно. Образование D-петли анализировали электрофорезом в 1% агарозных гелях. Маркеры молекулярного размера: D-петли (pUC19; 2686, п.н.) и одноцепочечная ДНК (#90; 90 nt) указаны стрелками. ( c ) Графическое представление данных из ( b ). Опыты повторяли не менее трех раз; с.э.м. был в пределах 10%.

    Мы обнаружили, что mHOP2-MND1 стимулирует обмен цепей ДНК, когда hRAD51 добавляли к смеси субстратов оцДНК (3 мкМ) и pUC19 суперскрученной двухцепочечной ДНК (скДНК) (50 мкМ) (реакция III) в присутствии либо Mg 2+ или Ca 2+ (рис.6б,в; дорожки 7 и 13). Эффективность этой реакции была аналогична «обычной» реакции, которую инициировали путем предварительной инкубации hRAD51 с одноцепочечной ДНК (реакция I) (рис. 6b, c; дорожки 3 и 9). Напротив, предварительная инкубация как hRAD51, так и mHOP2-MND1 с ссДНК pUC19 (реакция II) не давала D-петлей, что указывает на то, что mHOP2-MND1 и hRAD51 в отсутствие оцДНК могут образовывать стабильные комплексы с двухцепочечной ДНК, которые непродуктивны. при обмене цепей ДНК (рис. 6b, c; дорожки 5 и 11). Эксперименты с mRAD51 дали аналогичные результаты (дополнительный рис.6). В совокупности наши текущие данные показывают, что mHOP2-MND1 может специфически помогать RAD51 формировать филамент на одноцепочечной ДНК даже в присутствии большого избытка двухцепочечной ДНК.

    HOP2-MND1 предотвращает ингибирование RAD51 негомологичной одноцепочечной ДНК

    Ранее было показано, что негомологичная одноцепочечная ДНК ингибирует обмен цепей ДНК, стимулируемый RecA, конкурируя с двухцепочечной ДНК за вторичный сайт связывания RecA во время поиска гомологии 16,17 . Здесь мы исследовали, вызывает ли оцДНК аналогичное ингибирование обмена цепями ДНК, стимулируемого hRAD51, и как mHOP2-MND1 повлияет на это ингибирование (рис.7а).

    Рисунок 7: HOP2-MND1 ослабляет ингибирование RAD51 негомологичной оцДНК.

    ( a ) Схема реакции. Звездочка указывает метку 32 P на одноцепочечной ДНК. ( b ) Анализ D-петлей в агарозных гелях. Нуклеопротеиновые филаменты формировали путем инкубации hRAD51 (1 мкМ) с 32 P-оцДНК (#90, 3 мкМ) в стандартном буфере, содержащем 1 мМ АТФ и 0,85 мМ Ca 2+ с или без mHOP2-MND1 (200 нМ). ). Реакции инициировали добавлением ссДНК pUC19, предварительно смешанной с негомологичным ингибитором оцДНК (#71) (в указанных концентрациях).Маркеры молекулярного размера: D-петли (pUC19; 2686 нуклеотидов) и одноцепочечная ДНК (№ 90; 90 нуклеотидов) указаны стрелками. ( c ) Данные из ( b ) показаны в виде графика. Опыты повторяли не менее трех раз; планки погрешностей указывают на с.э.м.

    Результаты показывают, что добавление негомологичной оцДНК вместе с оцДНК pUC19 к филаменту hRAD51-оцДНК сильно ингибирует образование D-петли (рис. 7b (дорожки 2). Это ингибирование было устранено с помощью RPA, когда ее добавляли после одноцепочечной ДНК). , что указывает на то, что ингибирование действительно было вызвано связыванием оцДНК со вторичным сайтом hRAD51, а не перемещением hRAD51 на ингибитор оцДНК (дополнительная фиг.7). Затем мы проверили влияние mHOP2-MND1 на ингибирование обмена цепями ДНК, вызванного одноцепочечной ДНК. Ингибирование полностью отменялось в присутствии mHOP2-MND1 (рис. 7b (дорожки 10) независимо от того, добавлялся ли mHOP2-MND1 к филаменту hRAD51 до или после негомологичной оцДНК (дополнительная рис. 8; дорожки 3 и 5). Маловероятно, что mHOP2-MND1 проявляет свой эффект, захватывая избыток ssDNA-ингибитора, потому что количество ssDNA значительно превышает способность связывания mHOP2-MND1 (см. Обсуждение).Напротив, добавление гомологичной (комплементарной) оцДНК к филаменту hRAD51-оцДНК ингибировало обмен цепями ДНК даже в присутствии mHOP2-MND1, скорее всего, из-за его отжига с оцДНК, находящейся в первичном сайте hRAD51, и образования двухцепочечной ДНК, которая неактивна в Обмен цепями ДНК с pUC19 scDNA (дополнительная рис. 8; дорожки 2, 4 и 6). Этот результат согласуется с известной активностью hRAD51 и mHOP2-MND1 по отжигу оцДНК (ссылки 34, 52) и указывает на то, что mHOP2-MND1 не ухудшает доступность филамента hRAD51-оцДНК для оцДНК.

    Таким образом, текущие результаты демонстрируют сильное влияние mHOP2-MND1 на специфичность связывания ДНК филамента hRAD51-ssDNA. mHOP2-MND1 специфически способствует связыванию hRAD51 с двухцепочечной ДНК во время поиска гомологии, делая ее устойчивой к ингибированию негомологичной одноцепочечной ДНК.

    HOP2-MND1 влияет на конформацию RAD51

    Чтобы рационализировать влияние mHOP2-MND1 на различные активности RAD51, наблюдаемые в нашем исследовании, мы предположили, что mHOP2-MND1, действуя через физическое взаимодействие 33,34,36 , может вызвать сдвиг в RAD51 сворачивается в сторону конформации, которая способствует образованию активного нуклеопротеинового филамента.Мы проверили влияние mHOP2-MND1 на конформацию hRAD51, проанализировав характер расщепления hRAD51 протеазами в присутствии и в отсутствие mHOP2-MND1. Известно, что даже небольшие изменения в фолдинге белков могут вызвать значительные изменения в этом паттерне 53 . Здесь мы проанализировали изменения в структуре фрагментов hRAD51, продуцируемых трипсином в присутствии mHOP2-MND1, оцДНК и АТФ, с помощью вестерн-блоттинга с использованием антител, специфичных для His-метки на N-конце hRAD51.

    Мы обнаружили, что сам по себе hRAD51 очень чувствителен к трипсину (рис. 8а; дорожка 2). Однако оцДНК оказывала защитное действие на переваривание hRAD51, о чем свидетельствует тот факт, что после переваривания оставалось в 13,5 раз больше полноразмерного белка (рис. 8, дорожка 3). Защитный эффект оцДНК был особенно сильным (22,5-кратная защита) в сочетании с АТФ, условиями, поддерживающими образование филамента hRAD51-оцДНК. Гетеродимер mHOP2-MND1 также защищал hRAD51 от расщепления трипсином в отсутствие ДНК при добавлении отдельно (тройная защита) или в присутствии АТФ (двойная защита).

    Рисунок 8: HOP2-MND1 вызывает конформационные изменения при взаимодействии с RAD51.

    ( a ) His-hRAD51 (5 мкМ) расщепляли трипсином (19 мкг мл -1 ) в отсутствие (дорожки 2–5) или в присутствии mHOP2-MND1 (0,5 мкМ; дорожки 6–9 ). Там, где указано, реакция содержала оцДНК ϕX174 (15 мкМ, нуклеотиды) (дорожки 3, 5, 7 и 9) и/или АТФ (1 мМ) (дорожки 4, 5, 8 и 9). Фрагменты hRAD51 разделяли в 12% геле NuPAGE Bis-Tris (Life Technologies) в буфере MES и визуализировали вестерн-блоттингом с использованием моноклонального антитела против HIS-метки (Abgent).Цифры слева указывают приблизительный размер фрагментов (кДа), определенный по положениям His-меченых маркеров BenchMark. Область геля, соответствующая определенной части hRAD51, претерпевающей конформационные изменения при добавлении кофакторов ДНК и/или нуклеотидов, выделена как усиленная на вставке. Фрагменты, имеющие отношение к обсуждению в тексте, отмечены римскими цифрами I, II и III. Необработанный hRAD51 (38 кДа) показан на дорожке 1. Маркеры BenchMark с меткой His (Invitrogen) обозначены буквой «M».( b ) Относительная интенсивность каждого фрагмента, показанного на вставке, представлена ​​как доля суммы интенсивностей фрагментов I–III. Паттерны переваривания были воспроизведены в четырех (для трипсинового переваривания в отсутствие mHOP2-MND1) или трех (переваривание в присутствии комплекса HOP2-MND1) независимых экспериментов. Столбики погрешностей представляют собой sd.

    Кроме того, мы определили, какие триптические фрагменты hRAD51 демонстрируют особенно сильную зависимость от взаимодействующих с RAD51 кофакторов/партнеров (рис.8а, вставка). В отсутствие АТФ или одноцепочечной ДНК в этой области под действием трипсина генерировалось очень мало N-концевых фрагментов hRAD51 (рис. 8а; вставка, дорожка 2). Добавление оцДНК приводило к пропорциональному увеличению интенсивности фрагментов I–III, причем наиболее интенсивным был фрагмент III (рис. 8а (вставка, дорожка 3)). Обработка hRAD51 в присутствии АТФ продуцировала преимущественно фрагмент II (68% по отношению к сумме интенсивностей фрагментов I, II и III) (рис. 8а (вставка, дорожка 4)), тогда как обработка в присутствии обеих оцДНК и АТФ (комплекс hRAD51–оцДНК–АТФ) сильно усиливали фрагменты II и III (41 и 52% соответственно).Добавление mHOP2-MND1 к hRAD51 в отсутствие оцДНК и АТФ привело к очень отчетливой картине трипсина, причем фрагмент II был наиболее заметным (более 50%), что напоминало картину расщепления hRAD51, произведенного без mHOP2-MND1 в присутствии АТФ. (Рис. 8b, количественная оценка дорожек 4 и 6). Интересно, что расщепление hRAD51 в присутствии как АТФ, так и mHOP2-MND1 еще больше увеличивало относительный выход фрагмента II (84%) (рис. 8а (дорожка 8)).

    Таким образом, mHOP2-MND1 оказывает значительное влияние на характер триптического переваривания hRAD51, что может отражать конформационные изменения, генерируемые в hRAD51 под действием mHOP2-MND1.Более того, изменения в паттерне протеолиза hRAD51, индуцированные mHOP2-MND1, аналогичны изменениям, индуцированным АТФ, что указывает на сходство в конформационных изменениях, индуцированных в hRAD51 нуклеотидным кофактором и дополнительным белком.

    Мазин Эльсадиг — биография, возраст, рост, вики, факты и семья

    Мазин Эльсадиг О

    [✎]

    Мазин Эльсадиг () родился 2 сентября 1987 г. (34 года) в Чикаго, Иллинойс, США . Он знаменитый актер.Он присоединился к фильмам и телешоу под названием Деграсси: Следующее поколение (2001–2015), Топили (2009–2013), Закон Муки (2008), Четыре утра (2016) и Прыжок! (2007). Рост Мазина Эльсадига составляет 5 футов 8 дюймов.

    Мазин Эльсадиг Биография

    [✎]

    Актер американского происхождения, сыгравший Дамиана Хейса в сериале «Деграсси: Следующее поколение» и в фильме 2010 года «Униформа».

    Он родился в Чикаго, штат Иллинойс.

    В начале своей карьеры он снялся в телефильме «Рои», который вышел в эфир в 2005 году.

    Он обучался в Американской академии драматического искусства в Нью-Йорке. Затем он снялся в фильме «Идеальный мужчина».

    Мазин Эльсадиг — Чистая стоимость

    [✎]

    Информация о собственном капитале Мазина Эльсадига в 2021 году как можно скорее обновляется infofamouspeople.com. Вы также можете нажать «Изменить», чтобы сообщить нам, каков собственный капитал Мазина Эльсадига.

    Мазин Эльсадиг все еще жив?
    [✎]

    Мазин Эльсадиг жив и здоров и является знаменитым актером.

    В возрасте 34 лет, Рост Мазина Эльсадига 5 футов 8 дюймов.

    Он и другой американский актер Стейси Мистисин оба появились в канадском телесериале « Деграсси: Следующее поколение» .

    Дома, автомобили и люксовые бренды
    [✎]

    Дом, автомобиль и бренд класса люкс Mazin Elsadig в 2021 году как можно скорее обновляются in4fp.com. Вы также можете нажать «Изменить», чтобы сообщить нам об этой информации.

    Структура нити hdmc1-оцДНК раскрывает принципы ее архитектуры

    Abstract

    У эукариот мейотическая рекомбинация является основным источником генетического разнообразия, но ее дефекты у человека приводят к аномалиям, таким как синдромы Дауна, Клайнфельтера и другие.Dmc1 человека (hDmc1), гомолог RecA/Rad51, представляет собой рекомбиназу, которая играет решающую роль в правильном расхождении хромосом во время мейоза. Начальный этап гомологичной рекомбинации происходит, когда hDmc1 образует филамент на одноцепочечной (ss) ДНК. Однако структура этого пресинаптического сложного филамента для hDmc1 остается неизвестной. Чтобы сравнить комплексы hDmc1-оцДНК с комплексами, известными для семейства RecA/Rad51, мы получили структуры нуклеопротеиновых филаментов hDmc1-оцДНК с помощью электронной микроскопии (ЭМ) с использованием метода отдельных частиц.Карты ЭМ анализировали путем стыковки кристаллических структур Dmc1, Rad51, RadA, RecA и ДНК. Чтобы полностью охарактеризовать комплексы hDmc1-ДНК, мы проанализировали их организацию в присутствии Ca 2+ , Mg 2+ , АТФ, AMP-PNP, оцДНК и двухцепочечной ДНК. Трехмерные ЭМ-структуры филаментов hDmc1-ssDNA позволили нам выяснить принципы их внутренней архитектуры. Подобно семейству RecA/Rad51, hDmc1 образует спиральные филаменты на одноцепочечной ДНК в двух состояниях: растянутом (активном) и сжатом (неактивном).Однако, в отличие от семейства RecA/Rad51 и недавно опубликованной структуры нуклеопротеиновых филаментов двухцепочечной (дц) ДНК hDmc1, расширенное (активное) состояние филамента hDmc1, образованного на одноцепочечной ДНК, имеет девять протомеров на спиральный виток, а не обычные шесть, в результате чего один протомер покрывает два нуклеотида вместо трех. Контрольная реконструкция филамента hDmc1-dsDNA выявила 6,4 белковых субъединицы на спиральный виток, что указывает на то, что организация филамента варьируется в зависимости от матриц ДНК.Наш структурный анализ также показал, что N-концевой домен hDmc1 выполняет свою важную роль в комплексообразовании за счет обмена доменами между соседними протомерами, тем самым обеспечивая механистическую основу для скоординированного действия протомеров hDmc1 во время мейотической рекомбинации.

    Образец цитирования: Окороков А.Л., Чабан Ю.Л., Бугреев Д.В., Ходжкинсон Дж., Мазин А.В., Орлова Е.В. (2010) Структура филамента hDmc1-оцДНК раскрывает принципы его архитектуры. ПЛОС ОДИН 5(1): е8586.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586

    Редактор: Jörg Langowski, Немецкий центр исследования рака, Германия

    Получено: 24 июня 2009 г.; Принято: 8 декабря 2009 г .; Опубликовано: 6 января 2010 г.

    Copyright: © 2010 Okorokov et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Финансирование: AVM поддерживается Наградой ученых Общества лейкемии и лимфомы 1054-09. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    У эукариот гомологичная рекомбинация (HR) необходима для точного разделения гомологичных хромосом во время мейоза [1]–[3] и для репарации двухцепочечных разрывов ДНК (DSB) [4]–[6] .Мутации, нарушающие мейотическую рекомбинацию, вызывают нерасхождение хромосом, приводящее к аномалиям, таким как синдромы Дауна, Клайнфельтера и др. [7]. Кроме того, во время мейоза HR осуществляет генетические обмены между гомологичными хромосомами, создавая основной источник генетического разнообразия [1]–[3].

    Мейотическая HR инициируется DSB ДНК, введенной в хромосомы специализированным ферментом Spo11 [8]. Концы DSB затем подвергаются процессингу экзонуклеазой(ами) с получением 3′-выступающих хвостов одноцепочечной ДНК [3].Члены семейства Rad51/RadA/RecA представляют собой белки с обменом цепями ДНК, которые связываются с этими хвостами, ищут гомологичные последовательности ДНК и способствуют обмену цепей ДНК с образованием совместных молекул. У большинства эукариот, включая человека, этот процесс катализируют белки Dmc1 и Rad51, которые являются структурными и функциональными гомологами бактериальных и архейных рекомбиназ RecA и RadA [3], [9], [10].

    В отличие от рекомбиназы Rad51, которая функционирует как в мейозе, так и в соматическом клеточном цикле во время репарации DSB, семейство белков Dmc1 действует специфически во время мейотической рекомбинации [11]–[14].У S. cerevisiae мутант dmc1 показывает почти полное отсутствие мейотической рекомбинации [11], [15], [16]. Было показано, что у мышей нокауты DMC1 -/- являются стерильными, в то время как гипоморфная мышь DMC1 mei11 аллель (A272P) вызывает специфическую для самцов стерильность [12], [13], [17].

    Накоплен огромный объем структурных данных для белков RecA, RadA и Rad51, которые, как было показано, образуют как кольца, так и филаменты без ДНК [18]–[25].С помощью трехмерной электронной микроскопии исследованы спиральные филаменты рекомбиназ, связанные с оцДНК, и было показано, что они находятся в двух основных состояниях: растянутом и сжатом, которые представляют активную и неактивную формы нуклеопротеиновых комплексов соответственно [26], [27].

    Dmc1 человека представляет собой белок из 340 аминокислотных остатков, который содержит N-концевой (1–81) и коровый АТФазный домен (82–340). Оба домена способны связываться с ДНК [18], [22], [28]. Было показано, что рекомбинантный hDmc1, продуцируемый бактериями, образует комплексы hDmc1-дцДНК, состоящие из уложенных друг на друга октамерных колец, при сборке в присутствии Mg 2+ и АТФ [14], [18], [22], [29].Нуклеотидный кофактор АТФ необходим для образования спирального нуклеопротеинового филамента hDmc1 на одноцепочечной ДНК, что впоследствии способствует обмену цепей ДНК [30]. Недавние исследования также показали, что Ca 2+ является важным фактором в стимуляции образования спиральных филаментов на одноцепочечной ДНК как для Dmc1 человека, так и для дрожжей, что приводит к значительному увеличению активности обмена цепями ДНК в hDmc1 [31]–[33]. ].

    Коровой домен белка hDmc1 был кристаллизован в свободной от ДНК форме, демонстрируя структуру, сходную со структурой белков Rad51 человека и архей, и предоставляя информацию о структурных элементах, участвующих в связывании ДНК [22].В другом недавнем сообщении описана ЭМ структура филамента hDmc1-dsDNA, показавшая, что его параметры очень близки к параметрам нуклеопротеиновых филаментов, образованных другими членами семейства RecA [34]. Однако структурная организация комплексов hDmc1-ssDNA остается неизвестной. Для сравнения комплексов hDmc1-оцДНК, образующихся в присутствии АТФ и Ca 2+ , с нуклеопротеиновыми филаментами семейства RecA/RadA/Rad51 мы использовали электронную микроскопию и анализ одиночных частиц. Чтобы полностью охарактеризовать комплексы hDmc1-ДНК, мы проанализировали их организацию в различных условиях, т.е.грамм. в присутствии Ca 2+ , Mg 2+ , АТФ, AMP-PNP, оцДНК и двухцепочечной ДНК. Полученные 3D-ЭМ-карты нуклеопротеиновых филаментов оцДНК-hDmc1 в сочетании с подгонкой атомных структур доменов hDmc1 позволяют нам впервые наметить принципы внутренней архитектуры нуклеопротеинового филамента hdmc1-оцДНК, наиболее релевантные для образование пресинаптических комплексов в процессе рекомбинации.

    Результаты

    Электронная микроскопия и трехмерная реконструкция филамента hDmc1-ssDNA

    Рекомбинантный hDmc1 был экспрессирован и очищен до гомогенности из E.coli и проанализированы на его активность (рис. S1). Изогнутые нити hDmc1-ssDNA, наблюдаемые с помощью электронной микроскопии (ЭМ), побудили нас использовать подход с одной частицей (рис. 1А). Изображения сегментов филамента hDmc1-ssDNA, содержащих ∼2 спиральных витка, были отобраны вручную, и анализ изображений был выполнен с использованием IMAGIC-5 [35] (методы). Статистический анализ изображений выявил два основных состояния нитей hDmc1-ssDNA, которые различаются по диаметру (рис. 1B, C, верхние панели). Изображения, соответствующие каждому состоянию, обрабатывались как отдельные группы, при этом изображения искаженных нитей исключались из реконструкции.Приблизительно 70% собранных сегментов имели меньший диаметр, представляя растянутое состояние спирального филамента, в то время как другие ∼25% сегментов имели больший диаметр и представляли сжатое состояние нуклеопротеинового комплекса hDmc1-оцДНК. Небольшие кольцеобразные частицы были отобраны для статистического анализа, чтобы определить, могут ли они представлять концы коротких нитей hDmc1-ssDNA (рис. 1A, желтые кружки). Полученные собственные изображения (см. Методы) показывают круговой градиент плотности на собственных изображениях 3 и 4, что подтверждает спиральный характер частиц (рис. 1D).В качестве контроля анализировали изображения, полученные из образца hDmc1 в присутствии АТФ и Са 2+ , но в отсутствие оцДНК. В этих условиях hDmc1 присутствовал в виде колец, однако ни филаментов, ни стопок колец не наблюдалось. Аналогичной процедуре подверглись изображения колец hDmc1. Эти собственные изображения разительно отличались от изображений, полученных для образца hDmc-ssDNA, и типичны для колец с 8-кратной симметрией (рис. 1E, верхний ряд) [36]. Собственные изображения торцевых изображений hDmc1-ssDNA позволили нам сделать первую оценку углов между протомерами, а шаг был оценен по изображениям филамента (рис. 1D).Параметры спирали были уточнены путем минимизации ошибок между изображениями и проекциями реконструкции (см. методы). Трехмерные карты обоих типов филаментов одноцепочечной ДНК были получены с разрешением 16 Å при пороге 0,5 корреляционной функции оболочки Фурье (Методы). В растянутом состоянии нить имеет шаг ~110Å и диаметр ~116Å. Сжатое состояние филамента hDmc1-оцДНК имеет размер шага спирали ~96Å и диаметр ~133Å. Хиральность обеих структур определена подгонкой моделей атомов (см. ниже).Обе нити имеют непрерывную плотность, которая близко следует к центральной оси, что можно отнести к оцДНК (рис. 2A, B, C и D). Спиралевидная «нить» плотности ДНК внутри нуклеопротеидных нитей имеет диаметр ~18Å и 30Å в вытянутой и сжатой формах соответственно. Растянутое и сжатое состояния имеют плотность протомеров, ориентированную по-разному относительно центральной оси. Протомеры четко определяются при анализе порогов высокой плотности (рис. 2C, E, D и F).Каждая плотность протомеров, по-видимому, состоит из одной большей и одной меньшей областей плотности, при этом меньшая область соединена с большей линкером. Небольшой домен (S), по-видимому, взаимодействует с плотностью большого домена (L) соседнего протомера (рис. 2C и D). Два состояния филаментов hDmc1-оцДНК, удлиненное и сжатое, скорее всего, являются следствием того, что протомеры hDmc1 связываются с ДНК на разных стадиях гидролиза АТФ, подобно таковым у Rad51, RadA и RecA [26], [27], [29]. ], [37].Известно, что для RecA и Rad51 сжатые филаменты образуются в присутствии ADP; они неактивны, потому что АДФ не поддерживает активность этих белков по спариванию ДНК. Удлиненные (активные) филаменты образуются в присутствии АТФ. Соотношение активного (70%) и неактивного (25%) в состоянии филамента hDmc1-оцДНК предположительно смещено в сторону вытянутого (активного) состояния из-за присутствия Ca 2+ , замедляющего скорость гидролиза АТФ [31]. ]. Это было подтверждено анализом филаментов hDmc1-оцДНК, образованных в присутствии Ca 2+ и негидролизуемого аналога АТФ AMP-PNP.Филаменты, сформированные в этих условиях, напоминают растянутое состояние нитей hDmc1-ssDNA по их соответствующим значениям шага (∼100Å) и диаметра (∼120Å) (рис. S2A). Присутствие Ca 2+ необходимо для формирования филаментов, как сообщалось ранее [31]–[33]. Комплексы hDmc1 на оцДНК в присутствии АТФ и Mg 2+ hDmc1 образовывали стопки колец на матрице оцДНК (рис. S2B и C), как описано другими группами [14], [18], [31].

    Рис. 1. Трехмерная реконструкция филаментов hDmc1-оцДНК с разрешением 16 Å.

    (A) Микрофотография окрашенных нуклеопротеиновых филаментов hDmc1-ssDNA. Масштабная линейка составляет 500 Å. Кольцевидные частицы обозначены желтыми кружками. (B) Репрезентативные средние значения для класса с торца и сбоку для расширенного состояния показаны на верхней и нижней панелях соответственно. (C) представитель среднего класса концевых и боковых видов для сжатого состояния. Синие и зеленые линии показывают размеры филаментов. Шаг спирали составляет ∼110Å и ∼96Å для растянутого и сжатого состояния нити соответственно.(D) Верхний ряд представляет первые четыре собственных изображения для концевых видов нитей hDmc1-ssDNA. Второе собственное изображение показывает вариации диаметров, а третье и четвертое изображения демонстрируют спиралевидную природу нитей. В нижней строке показаны те же собственные изображения, что и в верхней строке, где зеленые и синие кружки обозначают диаметры расширенного и сжатого состояний соответственно. Приблизительные положения протомеров указаны красными/желтыми линиями с углом между ними ∼42°. (E) Контрольный образец hDmc1 в присутствии Ca 2+ и АТФ, но в отсутствие оцДНК состоял только из колец hDmc1.Первые три собственных изображения, полученные в результате статистического анализа этих кольцевых частиц без ДНК hDmc1, показаны в верхнем ряду (в желтой рамке). Средние характеристические классы колец показаны в двух нижних строках. Хорошо видна восьмикратная вращательная симметрия и хиральность колец.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g001

    Рисунок 2. Трехмерная реконструкция нитей hDmc1-ssDNA.

    (A) и (D) показывают виды расширенного (синий) и сжатого (зеленый) состояния нитей hDmc1-ssDNA соответственно.Рендеринг поверхности показан при пороге плотности 1σ. Центральная плотность филамента, соответствующая ДНК, показана оранжевым цветом на пороге плотности 3σ. (B) и (E) показывают комбинированные виды с разными порогами плотности. Полупрозрачная поверхность показана при 1σ, а непрозрачная поверхность обзора при 5,5σ. Внутренняя плотность филамента, соответствующая ДНК, показана оранжевым цветом при пороге плотности 4,5σ. Области меньшей и большей плотности одного протомера отмечены как область S (в желтом кружке) и область L (в красном кружке) соответственно.(C) и (F) показывают изображения сжатого (зеленый) и расширенного (синий) состояния нитей hDmc1-ssDNA при пороге плотности 5,5σ.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g002

    Общий вид правозакрученных филаментов hDmc1-оцДНК аналогичен наблюдаемому для нуклеопротеиновых комплексов Rad51 и RadA-ДНК [27], [29], [37]. Однако, несмотря на ранее сообщавшуюся консервативность между известными рекомбиназами, наши данные демонстрируют, что филаменты hDmc1-ssDNA имеют значительно больший диаметр.Более того, анализ плотности ясно показывает, что, в отличие от семейства RecA/RadA/Rad51, филаменты hDmc1-оцДНК имеют ∼9 и ∼8,5 протомеров на спиральный виток в растянутом и сжатом состояниях соответственно, вместо ∼6, найденных для других RecA. члены семьи. Чтобы проверить разницу между нитями hDmc1-ssDNA и RecA-ssDNA, мы проанализировали изображения последних (см. Методы, рисунок S3). Филаменты RecA-оцДНК имеют шаг ~82 Å и диаметр ~114 Å и, таким образом, хорошо коррелируют со сжатой конформацией филамента RecA-оцДНК, что согласуется с результатами, опубликованными другими группами [26], [27], [37]. , [38].Наши результаты также отличались от структуры, описанной для нуклеопротеинового филамента hDmc1, сформированного на двухцепочечной ДНК [34]. Чтобы получить дальнейшее представление о происхождении этого различия, мы проанализировали структуру филаментов hDmc1, сформированных на двухцепочечной ДНК, в условиях, описанных Sheridan и соавт. [34]. Филаменты, сформированные в этих условиях, оказались более прямыми и жесткими по сравнению с гибкими филаментами hDmc1-ssDNA. Хотя шаг остался прежним и составил ~106 Å, эти нити были тоньше (диаметр ~104 Å), чем нити, сформированные на матрице оцДНК (диаметр 116 Å) (рис. S4).

    Локализация домена

    Стыковка координат атомов с трехмерными картами двух состояний филамента была предпринята для анализа относительного положения N-концевого и корового доменов АТФазы. Поскольку N-концевые домены Rad51 и RadA отделены от их основных доменов гибкими междоменными линкерами [19], [24], мы решили провести одновременную стыковку двух структур в карту: основной домен hDmc1 (код PDB 1V5W ) [22] и модель структурной гомологии N-концевого домена hDmc1 (аминокислотные остатки 1–81), основанная на структуре, доступной для hRad51 (код PDB 1B22) [39].Автоматический поиск с использованием программного обеспечения UROX [40] и пакета UCSF Chimera [41] был использован для стыковки этих структур с тремя соседними протомерами. Процедура подгонки дала однозначные положения для доменов hDmc1 как в растянутом, так и в сжатом состоянии нити hDmc1-ssDNA (рис. 3).

    Рис. 3. Стыковка координат атома hDmc1 с трехмерными картами.

    коровый домен hDmc1 (код PDB 1V5W) [22] и модель N-концевого домена hDmc1 (аминокислотные остатки 1–81), основанная на структуре, доступной для hRad51 (код PDB 1B22), были помещены в 3D-карты. обеих нитей.(A) и (B) показывают вертикальные центральные плиты толщиной 30Å карты плотности с подогнанными протомерами hDmc1 (N-конец выделен красным). Рендеринг поверхности показан при пороге плотности 1σ. Области с большей плотностью отмечены буквой L (в красном кружке), а S’ (в желтом кружке) обозначает область с меньшей плотностью, которая принадлежит соседнему протомеру. (C) и (D) показывают передние пластины вытянутых и сжатых филаментов с тремя соседними протомерами hDmc1, приспособленными к соответствующим электронным плотностям. Общая полупрозрачная поверхность обоих нитей показана при 1σ, а внутренняя поверхность при 3σ (оранжевый на C и красный на D).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g003

    Подгонка поместила N-концевой домен hDmc1 (окрашенный красным) в верхнюю часть плотности протомера в меньшей области S (рис. 3), аналогично наблюдаемому для филаментов RecA, Rad51 и RadA [19], [26], [27], [29], [37]. Однако, согласно нашей подгонке, N-концевой домен hDmc1 в области меньшей плотности S расположен на противоположной стороне основного домена по сравнению с ориентацией, указанной для структур Rad51 и RadA [19], [27]. ], [37] (рис. S5).Разница, вероятно, является результатом более высокого разрешения 3D-карт hDmc1 и автоматической гибкой подгонки двух отдельных доменов, в отличие от стыковки полноразмерной белковой структуры как одного твердого тела. Относительная ориентация ядерных доменов hDmc1 после докинга согласуется с ориентацией протомеров hDmc1 внутри октамерного кольца, полученной с помощью рентгеновской кристаллографии [22]. Сравнение растянутых и сжатых филаментов показывает, что протомеры повернуты на 15° вокруг оси, перпендикулярной оси филамента, и на 10° против часовой стрелки в плоскости, параллельной оси филамента (рис. S6).

    Виды вдоль осей вращения кольцевой структуры и моделей филаментов hDmc1, связанных с оцДНК (рис. 4A, B и C), показывают, что диаметр сжатого состояния филамента hDmc1 (133Å) очень близок к диаметру кольца. (130 Å, [22]). Диаметр внутренних каналов для растянутого и сжатого состояния филамента и октамерного кольца составляет 17,8 Å, 28,6 Å и 27 Å соответственно.

    Рис. 4. Сравнение кольца hDmc1 и сборок нитей.

    Октамерная кольцевая структура ядерных доменов hDmc1 (код PDB 1V5W) (A) по сравнению с конечными видами моделей филаментов в растянутом и сжатом состояниях соответственно (B и C).Ниже указаны соответствующие диаметры нитей и кольца. (D) Организация домена с цветовой кодировкой последовательности белка hDmc1 соответствует цветам, использованным в (A-C). «N» указывает на N-концевой домен hDmc1 (1–81 а.о.), а «ядро» указывает на ДНК-связывающий домен АТФазы hDmc1 (82–340 а.о.).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g004

    Позиция N-концевого домена

    Сопоставление структуры N-концевого домена с реконструкциями филамента выявило ориентацию, при которой его С-концевая α-спираль соприкасается с N-концевой петлей соседнего корового домена hDmc1 протомера с правой стороны (рис. 5). .Полученная комбинация двух доменов демонстрирует удивительное сходство с кристаллической структурой филамента RadA (2DFL) [24]. Действительно, когда молекула RadA (выделена оранжевым цветом) накладывается на эту комбинацию доменов hDmc1, она довольно хорошо выравнивается (рис. 5А и В). Такая пространственная организация двух доменов hDmc1 соответствует плотности протомеров в обоих состояниях филамента. Это убедительно указывает на то, что протомеры являются не просто соседями внутри филамента, но и активно взаимодействуют друг с другом посредством замены N-концевого домена (рис. 5C и D).Взаимодействие между доменами может быть достигнуто частично за счет внешнего основного участка сердцевинного домена и отрицательных остатков N-концевого домена, которые находятся в непосредственной близости друг от друга. Такие взаимодействия обеспечивают связывающий цепной стабилизирующий эффект для всей нити (рис. 5E и F).

    Рисунок 5. Внутренняя организация нити оцДНК-hDmc1.

    Структура протомера филамента RadA (выделена оранжевым цветом) наложена на сжатое (A) и расширенное (B) состояния филамента hDmc1-ssDNA.Протомеры выровнены по своим основным доменам. (C) и (D) показывают модели для обоих состояний филамента, где N-концевые домены меняются местами между соседними протомерами. N-концевой и ядерный домены, принадлежащие одному и тому же протомеру, окрашены соответствующим образом, чередуя желтый и зеленый (C) и голубой и синий (D). Модель схематично показана на (E) и (F) для растянутых и сжатых нитей соответственно.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g005

    Как и Rad51 и RadA, hDmc1 отличается от RecA тем, что имеет N-концевой домен длиной ~80 аминокислот, который обладает способностью связываться с ДНК. [25], [33].RecA имеет аналогичный функциональный домен на С-конце, тогда как его N-концевая часть, непосредственно предшествующая коровому АТФазному домену, очень короткая и представлена ​​одиночной α-спиралью [26] (рис. 6). Положение N-концевого домена одного протомера hDmc1 по отношению к положению корового АТФазного домена очень похоже на пространственное расположение С-концевого и корового доменов RecA (коды PDB 2REB и 1U94) [42], [43] (Рисунок 6). Сравнение кристаллической структуры RecA с моделью, полученной при докинге доменов hDmc1 в 3D ЭМ-карты нуклеопротеиновых филаментов, свидетельствует о том, что, несмотря на различие в порядке расположения их доменов в белковой последовательности, филамент hDmc1 демонстрирует высокую степень сохранения четвертичной структуры с RecA.

    Рисунок 6. Сравнение модели протомера hDmc1 со структурой RecA.

    (A) Схематическое изображение доменной организации семейства рекомбиназ RecA/Rad51. (B) Структура протомера hDmc1 по сравнению с кристаллической структурой RecA. N-концевой домен hDmc1 показан оранжевым, C-концевой домен RecA — синим, а основной домен — зеленым. N-концевой домен и коровый домен двух соседних протомеров hDmc1 имеют те же относительные положения, что и пары корового и C-концевого доменов одного протомера RecA.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g006

    Сайт АТФазы и интерфейс протомеров

    Подгонка структур hDmc1 позволила нам проанализировать расположение консервативных аминокислотных остатков, которые участвуют либо в связывании ДНК, либо в каталитической активности АТФазы. Консервативные аминокислотные остатки каталитического сайта АТФазы, такие как Lys132 и Thr133 (мотив Уокера А) и Asp159 и Glu162 (мотив Уокера В), расположены на поверхности раздела соседних молекул hDmc1, подобно местам, описанным в кристалле. структура октамерного кольца (рис. 7А и В, окрашены в розовый цвет).Аминокислотные остатки, участвующие в связывании АТФ, а именно Arg169 и Pro321, разделены в соседних протомерах примерно на 13 Å и 8,5 Å в растянутом и сжатом состояниях соответственно (рис. 7C и D). Эти значения близко соответствуют расстояниям (19 Å и 9,4 Å), указанным для аналогичной пары остатков Arg158 и Pro307 в M. voltae RadA [27]. Это изменение расстояний согласуется с ролью, которую эти два остатка играют в связывании АТФ-оснований [21]. Ожидается, что они будут сближены в активном расширенном состоянии филамента за счет изменений, вызванных связыванием с оцДНК.Хотя относительное положение протомеров сходно в октамерном кольце и филаментах, связанных с одноцепочечной ДНК, протомеры в кольце разнесены на большее расстояние. Расстояние между двумя связывающими основания остатками составляет ∼23Å, что почти наверняка слишком велико для эффективного размещения основания в АТФ-связывающем кармане, что объясняет, почему АТФ не гидролизуется кольцом hDmc1 [31]. Для сравнения, расстояние между этими остатками, принадлежащими соседним протомерам в филаменте hDmc1-дцДНК, составляло ~16Å, что согласуется с тем фактом, что этот тип нуклеопротеинового филамента непродуктивен в рекомбинационном отношении.

    Рис. 7. Функциональные сайты АТФазы в филаменте hDmc1-ssDNA.

    Аминокислотные остатки мотивов Walker A и B показаны розовым цветом для (A) сжатого и (B) растянутого состояния нитей hDmc1-ssDNA. (C и D) изображают относительные положения остатков АТФ-карманов в сжатом и расширенном состояниях соответственно. Arg132 и Glu162 (каталитические остатки) отмечены розовым цветом, а Arg169 и Pro321 (остатки связывания оснований) отмечены желтым кругом и окрашены в оранжевый цвет.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g007

    ДНК-связывающие участки в нити

    Электростатическая поверхность подогнанных молекул как для удлиненных, так и для сжатых филаментов, образованных протомерами hDmc1, связанными с оцДНК, демонстрирует преимущественно отрицательный заряд на внешней поверхности и положительный заряд на внутренних сторонах (не показано), что согласуется с тем фактом, что оцДНК связывается внутри филаментного канала. Из кристаллической структуры кольца hDmc1 положительно заряженные аминокислотные остатки Arg230, Arg236 и Arg242, а также консервативный остаток Phe233 образуют так называемый «внутренний» участок, который участвует в связывании одноцепочечной ДНК и тестируется с помощью сайт-анализа. направленный мутагенез [22].В соответствии с рентгеновской структурой все эти остатки расположены во внутреннем канале как растянутых, так и сжатых филаментов hDmc1 (рис. 8А и В, остатки окрашены в оранжевый цвет). Кроме того, положение N-концевого домена указывает на то, что группа положительно заряженных остатков, включая Lys29, His30, Lys38, Lys41 и Lys63, образует еще один основной участок, обращенный к внутреннему каналу филамента (рис. 8A и B, остатки окрашены в темный цвет). красный). Сообщалось, что два остатка из этой группы, Lys38 и Lys63, участвуют в связывании ДНК [25], [39].

    Рисунок 8. Взаимодействие hDmc1-оцДНК.

    Растянутое (A) и сжатое (B) состояние филаментов hDmc1-ssDNA с аминокислотными остатками «внутреннего участка» корового домена оранжевым цветом и основными остатками участка N-концевого домена красным цветом ( C) Стереовид модели расширенной филаментной подгонки hDmc1-ssDNA. ОцДНК длиной 15 нуклеотидов (темно-желтый цвет) из кристаллической структуры RecA-оцДНК (идентификатор PDB: 3CMU) помещали в плотность ДНК, представленную в виде сетки (желтый цвет) при пороге плотности 3σ.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.g008

    Для анализа относительного положения доменов hDmc1 по отношению к оцДНК мы состыковали структуры одноцепочечных ДНК из комплексов RecA-оцДНК. Тетрануклеотид dTdAdCdG из ЯМР-структуры (код PDB 1EW1) [44] и 15-мерный олигонуклеотид из кристаллической структуры комплекса RecA-оцДНК (код PDB 3CMU) [36] хорошо укладывались в центральную колонку плотности 3D-ЭМ карты удлиненная нить.Действительно, состыкованная оцДНК длиной 15 нуклеотидов повторяет кривизну центральной нити плотности. Стыковка этих структур дополнительно подтвердила наше отнесение центральной плотности на трехмерной электронной карте hDmc1 к оцДНК (рис. 8C).

    Подогнанные нити одноцепочечной ДНК вдоль семи протомеров hDmc1, при этом каждый коровый домен hDmc1, таким образом, покрывает примерно 2,1 нуклеотида. Это приводит к примерно 19 нуклеотидам на шаг спирали для 8,9 протомеров на виток, обнаруживаемых в растянутом состоянии филамента hDmc1-ssDNA. Это согласуется с предыдущими сообщениями о том, что в комплексе рекомбиназа-ДНК 5.Осевой подъем на 1Å на основание приводит к примерно 19 нуклеотидам на оборот [26], [29], [36], [45]–[47]. Внутренние положительные участки ядерных доменов, по-видимому, находятся в непосредственной близости (на расстоянии 3–4 Å) от фосфатного остова цепи ДНК (рис. 8C). На этом уровне разрешения мы не можем сказать, сохраняется ли здесь специфический порядок упаковки нуклеотидов, наблюдаемый для комплекса RecA-ssDNA, или нет. Однако, учитывая тот факт, что большее количество протомеров hDmc1 участвует в покрытии одной и той же длины оцДНК, можно было бы ожидать, что она будет другой.

    N-концевых домена, по-видимому, не контактируют с оцДНК; ~ 20Å отделяют цепь ДНК от N-концевых основных остатков (рис. 8C). Вполне вероятно, что основная роль N-концевого домена hDmc1 в связывании с ДНК используется во время образования синаптических комплексов, когда N-конец может соединять связь между филаментом и двухцепочечной ДНК. Судя по нашим данным, hDmc1, по-видимому, является первой зарегистрированной ДНК-рекомбиназой, которая использует ~9 протомеров на виток филамента для формирования филамента на одноцепочечной ДНК.Это согласуется с измерениями, основанными на АСМ-анализе филаментов Dmc1-оцДНК, которые показывают, что число протомеров на виток больше шести и близко к восьми [32].

    Обсуждение

    Как и другие рекомбиназы, филаменты hDmc1-ssDNA, описанные здесь, правозакручены, что отражает тот факт, что dsDNA сама по себе является правозакрученной спиралью. Общая организация нуклеопротеиновых филаментов hDmc1-оцДНК в присутствии Ca 2+ и АТФ демонстрирует высокую степень эволюционной, структурной и функциональной консервативности с ДНК-связанными спиральными филаментами других человеческих, архейных и бактериальных рекомбиназ [26]. [27], [29], [37].В структурах филаментов hDmc1-ssDNA наблюдаются два значительных уровня эволюционной консервативности в отношениях структура-функция. Первый уровень консервативности, по-видимому, заключается в пространственном расположении между двумя доменами молекул рекомбиназы. Интересно, что N-концевой домен и ядерный домен двух соседних протомеров hDmc1 имеют те же относительные положения, что и ядра и C-концевой домен одного протомера RecA (рис. 6). Это согласуется с тем фактом, что N-концевой домен hDmc1, сходный с таковым у Rad51 и RadA, и С-концевой домен RecA ранее участвовали в связывании ДНК, сборке и функционировании филаментов [25]. 26], [28], [39], [48].Это также подтверждает идею о том, что N-концевой домен hDmc1 и С-концевой домен RecA выполняют общие структурные и функциональные роли [26]. Следовательно, второй ДНК-связывающий домен, по-видимому, всегда позиционируется одним и тем же образом по отношению к коровому домену, независимо от порядка доменов в последовательности рекомбиназного белка.

    Положение меньшего ДНК-связывающего домена связано со вторым уровнем консервативности, а именно с заменой N-концевой спирали между протомерами.Замена трехмерного домена, по-видимому, является обычным механизмом аллостерической координации олигомерных белковых комплексов [49]. Ранее сообщалось об обмене N-концевых α-спиралей на соседние протомерные субъединицы в филаментах RecA [20], [37]. Этот принцип связи между протомерами сохраняется в организации спиральных филаментов hDmc1, т.к. весь N-концевой домен hDmc1, по-видимому, участвует в обмене доменами между соседними молекулами (Рис. 5). Относительное положение N-концевого и корового доменов соседних протомеров hDmc1 обеспечивает простой механизм поддержания архитектуры филаментов и может представлять собой оптимальную организационную систему для совместного действия протомеров во время процесса обмена цепями ДНК.

    Сообщалось, что

    RecA, Rad51 и RadA имеют 6,2, 6,4 и 6,6 протомеров на спиральный виток соответственно [34], [38]. Наш анализ спиральных нитей RecA-оцДНК также подтвердил эти спиральные параметры, а соотношение протомеров на виток идентично предыдущим отчетам, подразумевающим 1 протомер, покрывающий 3 нуклеотида (рис. S3). Однако структуры филаментов hDmc1-ssDNA обнаруживают поразительную особенность, которая отличает hDmc1 тем, что он использует 1 протомер для покрытия 2 нуклеотидов. Наши результаты отличаются от недавнего сообщения Sheridan and Coators [34] о том, что все рекомбиназы имеют одинаковые параметры структуры филаментов.

    Одной из возможных причин расхождений между нашими результатами и результатами Шеридана могут быть матрицы ДНК, используемые для сборки нитей. Наш структурный анализ филаментов hDmc1-дцДНК показал, что на спиральный виток приходится около 6,4 белковых субъединиц (рис. S4), что согласуется с реконструкцией филамента hDmc1-дцДНК Шериданом и соавторами [34]. В то же время структура филамента hDmc1-оцДНК имеет ~9 белковых субъединиц на спиральный виток. Эти результаты показывают, что филаменты hDmc1, сформированные на матрицах оцДНК и дцДНК, различаются по своей архитектуре.

    Нити hDmc1-ssDNA, которые мы использовали для структурного анализа, соответствуют биологии первой стадии процесса рекомбинации. Внутренний узкий канал растянутого филамента соответствует диаметру оцДНК, а широкий внутренний канал сжатого филамента соответствует диаметру двухцепочечной ДНК. Эти данные коррелируют со стоячей моделью, согласно которой расширенная конформация соответствует начальному активному состоянию пресинаптического рекомбинационного комплекса. Таким образом, мы полагаем, что наша структура hDmc1-ssDNA отражает истинные биологические и механические свойства пресинаптического комплекса.Различия в количестве протомеров на спиральный виток между Dmc1 и остальной частью семейства RecA на матрице одноцепочечной ДНК могут возникать из-за различных рекомбинационных событий, в которые они вовлечены, а именно мейотической рекомбинации и гомологичной репарации соответственно. Например, архитектура филаментов Dmc1 может отражать тот факт, что они взаимодействуют со специфическими белковыми кофакторами во время мейотической рекомбинации [3], [5].

    В заключение мы сообщаем о подробной молекулярной структуре нуклеопротеинового филамента, образованного на одноцепочечной ДНК человеческой мейотической рекомбиназой Dmc1.Трехмерная ЭМ-структура филамента согласуется с предыдущими данными биохимии и рентгеновской кристаллографии и позволяет нам выяснить принципы его внутренней архитектуры. Мы показываем, что на спиральный виток филамента hDmc1-оцДНК в активном состоянии приходится примерно 9 протомеров, что может отражать специфическую роль hDmc1 в мейозе. Филаменты, по-видимому, стабилизируются за счет замены N-концевых доменов между соседними протомерами. Это обеспечивает структурный каркас, который обеспечивает аллостерическую связь между протомерами hDmc1 и их кооперативную функцию во время рекомбинации.

    Материалы и методы

    Получение рекомбинантных белков и комплексов белок-оцДНК

    Белок

    человека Dmc1 очищали, как описано ранее [50]. ОцДНК φX174 была приобретена у Invitrogen. Нуклеопротеиновые комплексы формировали путем инкубации белка hDmc1 (10 мкМ) с оцДНК φX174 (15 мкМ) в буфере, содержащем 25 мМ трис-ацетата (рН 7,0), 2 мМ АТФ, 100 мМ NaCl, 1 мМ ДТТ и 2 мМ CaCl 2 при 37°С в течение 30 мин, а затем выдерживали на льду еще 30 мин [31].Аналогичный образец hDmc1, но без одноцепочечной ДНК, инкубировали в качестве контроля для визуализации октамерных колец, не содержащих ДНК hDmc1. Когда Mg 2+ использовали вместо Ca 2+ в контрольных экспериментах, его концентрация составляла 2,5 мМ. При использовании AMP-PNP (Sigma) его концентрация составляла 2 мМ. Нуклеопротеиновые комплексы на двухцепочечной ДНК формировали путем инкубации белка hDmc1 (10 мкМ) с релаксированной двухцепочечной ДНК в буфере, содержащем 25 мМ трис-ацетата (рН 7,0), 2 мМ АТФ, 100 мМ NaCl, 1 мМ ДТТ и 2 мМ CaCl 2 при 37°C в течение 30 мин, а затем выдерживали на льду еще 30 мин, как описано в [31].Bacterial RecA был приобретен в New England Biolabs (США). Нуклеопротеиновые комплексы готовили в соответствии с условиями производителя путем инкубации белка RecA (10 мкМ) с одноцепочечной ДНК φX174 (15 мкМ) в буфере, содержащем 50 мМ Трис-HCl (pH 7,5), 5 мМ MgC1 2 и 50 мМ NaCl при 37°С в течение 30 мин.

    Электронная микроскопия, обработка изображений

    Образцы для электронной микроскопии окрашивали 2% метиламин-вольфраматом (MT), pH 6,8 (Nano-W, Nanoprobes Inc.), чтобы поддерживать pH близко к физиологическим условиям.Чтобы проверить влияние окрашивания МТ на внешний вид комплекса, образцы также окрашивали более обычным 2% уранилацетатом (UA) (pH ~ 4,5). Все изображения были записаны на пленку Kodak SO163 с использованием микроскопа FEI Tecnai T10 в режиме низкой дозы, работающего при ускоряющем напряжении 100 кВ и увеличении 44000×. Негативы проявляли в полносильном проявителе Kodak D-19 в течение 12 минут, а их качество оценивали с помощью оптической дифракции. Микрофотографии оцифровывали на микроденситометре Zeiss SCAI (Z/I Imaging) с размером шага 7 мкм, соответствующим размеру пикселя 1.59Å. Контрастную передаточную функцию (CTF) микроскопа оценивали по некогерентно усредненным преобразованиям Фурье выбранных пятен для каждой микрофотографии. Изображения были скорректированы с учетом эффектов CTF с помощью процедуры обращения фазы.

    Сегменты филаментов hDmc1-оцДНК, образованных в присутствии АТФ и Са 2+ (~12 000 в МТ и ∼2000 в UA) и филаментов RecA-оцДНК (~3000 в МТ и ∼2000 в UA), были отобраны вручную в течение кадры размером 160х160 пикселей. При обработке изображений различий между окрашиванием МТ и УК не обнаружено.Аналогичным образом обрабатывали контрольные образцы hDmc1-оцДНК в присутствии AMP-PNP, hDmc1-оцДНК в присутствии Mg 2+ , комплексов hDmc1-дцДНК и hDmc1, образованных в отсутствие ДНК. Предварительная обработка изображений включала нормализацию до того же стандартного отклонения с последующим обращением фазы и полосовой фильтрацией для удаления неровного фона: отсечка низкого разрешения была установлена ​​​​на ~ 100 Å с оставшимся пропусканием низкочастотной составляющей 10%; отсечка высокого разрешения составляла ∼7Å.Анализ изображений проводили с помощью IMAGIC-5 [36].

    Сегменты нити были выбраны с использованием только двух ограничений: (i) они должны были быть прямыми и (ii) длина сегментов должна составлять не менее 3 шагов спирали. На микрофотографиях образцов, окрашенных МТ, были выбраны отчетливые концевые виды комплексов hDmc1-оцДНК и колец hDmc1, образованных в отсутствие оцДНК. Концевые виды филаментов (образец в присутствии оцДНК) и колец (образец без оцДНК) подвергали статистическому анализу, причем каждый набор обрабатывали отдельно [51].Общая сумма (среднее значение всех изображений с торца, образец с одноцепочечной ДНК) рассматривается как первое собственное изображение. В то время как собственное изображение 2 демонстрирует изменения диаметра [52], собственные изображения 3 и 4 отражают нецелое число субъединиц за оборот (рис. 1D). Круговые вариации в распределении плотности, обнаруженные на третьем и четвертом собственных изображениях, связаны с распределением протомеров в спиралях. Статистический анализ колец (hDmc1 без ДНК) показал, что число протомеров в них отличается от числа протомеров в спиралях.Изображения колец не выявили каких-либо вариаций их размеров, а пара дополнительных собственных векторов подтвердила 8-кратную симметрию комплексов (рис. 1Е, верхний ряд). Двойные кольца, где процент наклонных изображений частиц был довольно высоким (рис. S2D и E), не демонстрировали низкочастотных изменений в собственных изображениях, поскольку структура двойного кольца имеет целое число субъединиц.

    Выравнивание и классификацию сегментов филаментов hDmc1 проводили, как описано [51].Мультистатистический анализ (MSA) видов сбоку дал определенные классы, которые выявили различия в шаге и диаметре (рис. 1B и C, нижние панели). Предварительные реконструкции были получены для обоих подмножеств путем угловой реконструкции [51] с использованием коротких сегментов нескольких классов с хорошим контрастом, отличительными чертами, такими как полярность и разделенные субъединицы, и нескольких классов торцевых изображений hDmc1-оцДНК [51]. Последующее уточнение проводилось аналогично описанному Галкиным и Коаторсом [27].Первый этап уточнения параметров проводился с шагом 3,2 Å и 2° для нахождения глобального минимума в диапазоне 35–48°. Пять исходных моделей, полученных из лучших классов, усредняли и центральную часть каждой модели симметризировали по спиральным параметрам шага (100 Å) и угла поворота между протомерами (40°). Репроекции усредненной модели использовались для уточнения выравнивания всех изображений выбранных сегментов. Следующий раунд уточнения проводился с шагом 0.5Å и 0,5° в области установленного минимума (рис. S7). В результате были получены две группы параметров, соответствующих растянутому и сжатому состояниям нити, которые обрабатывались независимо. Вытянутое состояние имеет шаг 110 Å, диаметр ∼116 Å, угол между протомерами 40,5°. В сжатом состоянии филамент имеет шаг 96 Å, диаметр 133 Å и угол между протомерами 42,5°. Количество полученных классов составило 550 для расширенной формации и 250 для сжатой конформации, каждый из которых содержит ∼15 изображений на класс.Окончательные реконструкции филамента hDmc1-оцДНК рассчитывали с использованием 300 классов для расширенного и 150 классов для сжатого состояния.

    Аналогичная процедура использовалась для анализа изображений филаментов RecA-ssDNA. Стартовый поиск производился в диапазоне 40–70 градусов с шагом 3° с последующим уточнением по найденным минимумам с шагом 1°. В результате угол между протомерами составил ~59°. Окончательные реконструкции сжатой нити RecA-ssDNA были получены из нескольких лучших классов (рис. S3).Для изображений филаментов hDmc1-дцДНК поиск проводился в диапазоне 30–70 градусов с шагом 3° с последующим уточнением по найденным минимумам с шагом 1°. В результате угол между протомерами составил 56,5°. Окончательные реконструкции комплекса hDmc1-dsDNA были получены с использованием 50 лучших классов (рис. S4).

    Ориентации изображений классов были уточнены с помощью процедуры сопоставления проекций в Spider [51]. Трехмерные карты были рассчитаны с использованием алгоритма обратной проекции с точным фильтром [50], [53].Разрешение карт филаментов оценивалось с использованием порога 0,5 корреляционной функции Фурье [54], [55] и соответствовало 16 Å для филаментов hDmc1-оцДНК и ∼27 Å для филаментов RecA-оцДНК.

    Фитинг модели

    Предсказание вторичной структуры было выполнено с использованием Swiss-Model (http://swissmodel.expasy.org/) [56] и PHYRE (http://www.sbg.bio.ic.ac.uk/phyre/html/) из Группа структурной биоинформатики, Имперский колледж, Лондон. Наилучшая результирующая модель была построена на основе структуры Rad51 человека (PDB ID: 1b22) (40% идентичности аминокислотной последовательности) с E-значением 7.9e-14 и 100% расчетной точности.

    Подгонка домена к 3D-карте hDmc1 была выполнена автоматически с использованием UROX (http://mem.ibs.fr/UROX/) [40] и пакета UCSF Chimera из Ресурса биокомпьютеров, визуализации и информатики Университета Калифорния, Сан-Франциско (при поддержке NIH P41 RR-01081), (http://www.cgl.ucsf.edu/chimera/) [41]. Вписывание атомной структуры RecA-оцДНК (идентификатор PDB: 3CMU [38]) в трехмерную карту RecA-оцДНК выполняли вручную в PyMol (http://pymol.sourceforge.net/) и Химера.

    Представления поверхности были созданы с использованием PyMOL и, если не указано иное, отображаются на пороговом уровне 1σ, соответствующем ~100% ожидаемой массы (удельная плотность белка составляет 0,84 кДа/Å 3 ).

    Код доступа.

    ЭМ-карты белка Dmc1 человека были депонированы в базу данных макромолекулярных структур (EBI) под номерами доступа EMD-1492 и EMD-1493 для удлиненных и сжатых филаментов соответственно.

    Дополнительная информация

    Рисунок S1.

    Очищенный Dmc1 человека эффективно катализирует обмен цепей ДНК. A. Dmc1 человека был сверхэкспрессирован в штамме E. coli BLR(DE3) (Novagen) в виде белка с N-концевой гексагистидиновой меткой, очищен и проанализирован электрофорезом в 15% SDS-полиакриламидном геле. Экстракт из 6-литровой клеточной культуры (дорожка 2) подвергали осаждению сульфатом аммония (дорожка 3) и хроматографическому фракционированию на колонках HisTrap HP (дорожка 4), HiTrap Heparin HP (дорожка 5) и Mono Q для очистки Dmc1 почти до гомогенности. (5 мкг на дорожке 6).На дорожке 1 показана миграция маркеров молекулярной массы. Б — Активность очищенного Dmc1 человека по обмену цепей ДНК тестировали в анализе D-петли по схеме. Красная звездочка указывает на метку 32P на 5′-конце ДНК. C – Продукты обмена цепей ДНК анализировали электрофорезом в 1% агарозном геле. Чтобы сформировать D-петли, 32P-меченая оцДНК; 5′-ACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCCGCATATGGTGCACTCTCAGTACA ATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCG-3′; 3 мкМ, нуклеотиды) предварительно инкубировали с Dmc1 (в указанной концентрации) в буфере, содержащем 25 мМ трис-ацетата, рН 7.5, 2 мМ АТФ, 2 мМ хлорида кальция, 2 мМ DTT и БСА (100 мкг/мл) в течение 15 мин при 37°С. 15-минутная инкубация. В контроле (дорожка 1) вместо Dmc1 добавляли буфер для хранения. Реакции останавливали добавлением 1,5% SDS и протеиназы К (800 мкг/мл), смешивали с 0,10 объема загрузочного буфера (70% глицерина, 0,1% бромфенолового синего) и анализировали электрофорезом. D — данные панели (C), представленные в виде графика.мкмк

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.s001

    (2,10 МБ TIF)

    Рисунок S2.

    Комплексы hDmc1, собранные на матрице оцДНК в различных условиях. A — Средние классы филаментов hDmc1, сформированных на матрице оцДНК в присутствии AMP-PNP и Ca2+. B — Изображение стеков колец hDmc1, образованных на одноцепочечной ДНК в присутствии АТФ и Mg2+. C — Средние классы стопок колец hDmc1, образованных на одноцепочечной ДНК в присутствии АТФ и Mg2+. D — Средние классы двойных колец hDmc1, образованных на одноцепочечной ДНК в присутствии АТФ и Mg2+.E — собственные изображения из статистического анализа двойных колец, показанные на панели D.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.s002

    (4,87 МБ TIF)

    Рисунок S3.

    Сравнение ЭМ-изображений RecA и Dmc1. A — вид сбоку, представитель среднего класса. Верхняя и нижняя панели показывают RecA и Dmc1 соответственно в сжатом состоянии. B — Сравнение видов сбоку: изображение RecA было совмещено с изображением Dmc1 и вычтено из него. Отчетливо видна разница между диаметрами и шагами двух нитей.На левой панели показаны изображения с размерами, на правой панели представлены те же изображения, не закрытые метками. C — 3D-реконструкция RecA демонстрирует, что угол между протомерами составляет ~ 59 °, что дает 6,1 протомера RecA на спиральный виток. D — центральные отделы нити. Правые панели для C и D показывают пластины 3D EM плотности с подобранной атомной структурой комплекса RecA-ssDNA (идентификатор PDB: 3CMU). Линии розового цвета обозначают толщину и положение плиты.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.s003

    (4,23 МБ TIF)

    Рисунок S4.

    Нити hdmc1, собранные на матрице двухцепочечной ДНК. A — Изображение комплекса hDmc1-dsDNA демонстрирует прямые и жесткие филаменты. B — Средние значения класса филаментов hdmc1-dsDNA. C — 3D-карта филамента hDmc1-dsDNA. Угол между протомерами составляет ~ 56,5 °, что дает 6,4 протомера на спиральный виток. D — Срезы пластин филамента hDmc1-дцДНК с присоединенной моделью двухцепочечной ДНК, коровым доменом hDmc1 (код PDB 1V5W) и моделью гомологии N-концевого домена, основанной на структуре hRad51 (код PDB 1B22).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.s004

    (4,54 МБ TIF)

    Рисунок S5.

    Положение N-концевого домена Dmc1 по сравнению с известными структурами рекомбиназы. Структура протомера Dmc1 по сравнению с кристаллическими структурами RadA (2DFL), RecA (2REB) и Rad51 (1SZP). N-концевые домены Dmc1, RadA и Rad51 и С-концевой домен RecA выделены оранжевым цветом. Основные домены показаны радужной окраской, где N-концы показаны синим цветом, а C-концы — красным.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.s005

    (1,23 МБ TIF)

    Рисунок S6.

    Ориентация основного домена изменяется между сжатым и растянутым состояниями филамента Dmc1-ssDNA. Протомер в растянутом филаменте (синий) повернут на 15° по часовой стрелке от своего положения в сжатом филамоне (зеленый) относительно оси филамента (оранжевый), левая панель, и на 10° против часовой стрелки в направлении, перпендикулярном ось нити, правая панель.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.s006

    (1,66 МБ TIF)

    Рисунок S7.

    Поиск спиральных параметров филаментов Dmc1-оцДНК. Это было выполнено путем минимизации ошибок между изображениями и их повторными проекциями. В результате образовались две группы параметров, которые соответствовали сжатому и растянутому состояниям филамента. В сжатом состоянии филамент имеет шаг 9,6 нм, диаметр 13,3 нм и угол между протомерами 42,5°. Расширенное состояние имеет шаг 11 нм, диаметр ∼11.6 нм, угол между протомерами 40,5°. Желтые стрелки указывают положения глобальных минимумов.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008586.s007

    (5,40 МБ TIF)

    Благодарности

    Мы благодарны Х. Сайбилу за стимулирующие обсуждения и комментарии, Р. Уэстлейку и Д. Холдершоу за вычислительную поддержку и Аманде Хадсон и Андриасу О’Рейли за критическое прочтение рукописи.

    Авторские взносы

    Задумал и спроектировал эксперименты: ALO AVM EVO.Проведены эксперименты: ALO YLC DVB JH AVM EVO. Проанализированы данные: ALO YLC JH EVO. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: DVB AVM. Написал статью: ALO YLC EVO.

    Каталожные номера

    1. 1. Пейдж С.Л., Хоули Р.С. (2003) Хромосомная хореография: мейотический балет. Наука 301: 785–789.
    2. 2. Епископ Д.К. (2006) Множественные механизмы мейотической рекомбинации. Ячейка 127: 1095–1097.
    3. 3. Нил М.Дж., Кини С. (2006) Прояснение механики обмена цепями ДНК при мейотической рекомбинации.Природа 442: 153–158.
    4. 4. Hoeijmakers JH (2001)Механизмы поддержания генома для предотвращения рака. Природа 411: 366–374.
    5. 5. West SC (2003)Молекулярные взгляды на рекомбинационные белки и их контроль. Nat Rev Mol Cell Biol 6: 435–445.
    6. 6. Wyman C, Kanaar R (2006) Восстановление двухцепочечного разрыва ДНК: все хорошо, что хорошо кончается. Annu Rev Genet 40: 363–383.
    7. 7. Линн А., Эшли Т., Хассолд Т. (2004)Вариация мейотической рекомбинации человека.Annu Rev Genomics Hum Genet 5: 317–349.
    8. 8. Keeney S, Giroux CN, Kleckner N (1997)Двухцепочечные разрывы ДНК, специфичные для мейоза, катализируются Spo11, членом широко консервативного семейства белков. Ячейка 88: 375–384.
    9. 9. Seitz EM, Haseltine CA, Kowalczykowski SC (2001) Рекомбинация и репарация ДНК у архей. Adv Appl Microbiol 50: 101–169.
    10. 10. Masson JY, West SC (2001) Рекомбиназы Rad51 и Dmc1: неидентичные близнецовые отношения.Trends Biochem Sci 26: 131–136.
    11. 11. Bishop DK, Park D, Xu L, Kleckner N (1992) DMC1: специфичный для мейоза дрожжевой гомолог E. coli recA, необходимый для рекомбинации, образования синаптонемных комплексов и развития клеточного цикла. Ячейка 69: 439–456.
    12. 12. Питтман Д.Л., Кобб Дж., Шименти К.Дж., Уилсон Л.А., Купер Д.М. и соавт. (1998) Арест профазы мейоза с нарушением хромосомного синапса у мышей с дефицитом Dmc1, гомолога RecA, специфичного для зародышевой линии. Мол Ячейка 1: 697–705.
    13. 13. Йошида К., Кондо Г., Мацуда Ю., Хабу Т., Нисимунэ Ю. и др. (1998) Мышиный RecA-подобный ген Dmc1 необходим для синапсов гомологичных хромосом во время мейоза. Мол Цел 5: 707–718.
    14. 14. Массон Дж.Ю., Дэвис А.А., Хаджибагери Н., Ван Дайк Э., Бенсон Ф.Е. и др. (1999) Специфичная для мейоза рекомбиназа hDmc1 образует кольцевые структуры и взаимодействует с hRad51. EMBO J 18: 6552–6560.
    15. 15. Schwacha A, Kleckner N (1997)Смещение межгомологов во время мейотической рекомбинации: мейотические функции способствуют высокодифференцированному пути только между гомологами.Ячейка 90: 1123–1135.
    16. 16. Хантер Н., Клекнер Н. (2001)Одноконцевая инвазия: асимметричный промежуточный продукт при переходе от двухцепочечного разрыва к переходу двойного холлидейного соединения мейотической рекомбинации. Ячейка 106: 59–70.
    17. 17. Bannister LA, Pezza RJ, Donaldson JR, de Rooij DG, Schimenti KJ, et al. (2007) Доминантный дефектный по рекомбинации аллель Dmc1, вызывающий мужское бесплодие. PLoS Биол 5: e105.
    18. 18. Passy SI, Yu X, Li Z, Radding CM, Masson JY, et al.(1999) Белок Dmc1 человека связывается с ДНК в виде октамерного кольца. Proc Natl Acad Sci U S A 96: 10684–10688.
    19. 19. Шин Д.С., Пеллегрини Л., Дэниелс Д.С., Йелент Б., Крейг Л. и соавт. (2003)Структура и мутанты Rad51 полноразмерных архей: механизмы сборки RAD51 и контроля с помощью BRCA2. EMBO J 22: 4566–4576.
    20. 20. Conway AB, Lynch TW, Zhang Y, Fortin GS, Fung CW и другие. (2004) Кристаллическая структура нити Rad51. Nat Struct Mol Biol 11: 791–796.
    21. 21.Wu Y, He Y, Moya IA, Qian X, Luo Y (2004)Кристаллическая структура архейной рекомбиназы RADA: снимок ее расширенной конформации. Мол Ячейка 15(3): 423–435.
    22. 22. Кинебути Т., Кагава В., Эномото Р., Танака К., Миягава К. и др. (2004)Структурная основа образования октамерного кольца и взаимодействия с ДНК человеческого белка Dmc1, гомологичного спаривания. Мол Ячейка 14: 363–374.
    23. 23. Wu Y, Qian X, He Y, Moya IA, Luo Y (2005)Кристаллическая структура АТФазо-активной формы гомолога Rad51 из Methanococcus voltae.Взгляд на зависимость от калия. J Biol Chem 280: 722–728.
    24. 24. Chen LT, Ko TP, Chang YC, Lin KA, Chang CS и соавт. (2007a) Кристаллическая структура спиральной нити RadA левых архей: идентификация функционального мотива для контроля четвертичных структур и ферментативных функций белков семейства RecA. Рез. нуклеиновых кислот 35: 1787–1801.
    25. 25. Chen LT, Ko TP, Chang YW, Lin KA, Wang AH, et al. (2007b) Структурный и функциональный анализ пяти консервативных положительно заряженных остатков в мотивах связывания L1 и N-концевой ДНК архейного белка RADA.PLoS ONE 2(9): e858.
    26. 26. Yu X, Jacobs SA, West SC, Ogawa T, Egelman EH (2001)Структура и динамика доменов в спиральных филаментах, образованных RecA и Rad51 на ДНК. Proc Natl Acad Sci U S A 98: 8419–8424.
    27. 27. Галкин В.Е., У Ю, Чжан Х.П., Цянь Х., Хе Ю. и др. (2006) N-концевой домен Rad51/RadA активирует АТФазную активность нуклеопротеиновых филаментов. Структура 4: 983–92.
    28. 28. Kinebuchi T, Kagawa W, Kurumizaka H, ​​Yokoyama S (2005)Роль N-концевого домена белка DMC1 человека в формировании октамера и связывании ДНК.J Biol Chem 280: 28382–28387.
    29. 29. Yang S, Yu X, Seitz EM, Kowalczykowski SC, Egelman EH (2001)Белок RadA архей связывает ДНК как спиральные нити, так и октамерные кольца. Дж. Мол Биол 314: 1077–1085.
    30. 30. Sehorn MG, Sigurdsson S, Bussen W, Unger VM, Sung P (2004)Человеческая мейотическая рекомбиназа Dmc1 способствует АТФ-зависимому обмену гомологичной ДНК. Природа 429: 433–437.
    31. 31. Бугреев Д.В., Голуб Е.И., Стасяк А.З., Стасяк А.В., Мазин А.В. (2005) Активация мейоз-специфичной рекомбиназы Dmc1 человека Ca 2+ .J Biol Chem 280: 26886–26895.
    32. 32. Lee MH, Chang YC, Hong EL, Grubb J, Chang CS, et al. (2005) Ион кальция способствует активности Dmc1 дрожжей посредством образования длинных и тонких спиральных нитей с одноцепочечной ДНК. J Biol Chem 280: 40980–40984.
    33. 33. Чанг Ю.С., Ло Ю.Х., Ли М.Х., Ленг Ч.Х., Ху С.М. и др. (2005)Молекулярная визуализация белкового кольца дрожжей Dmc1 и комплекса нуклеопротеинов Dmc1-оцДНК. Биохимия 44: 6052-8.
    34. 34. Шеридан С.Д., Ю.С., Рот Р., Хойзер Дж.Е., Сехорн М.Г. и др.(2008) Сравнительный анализ нуклеопротеиновых филаментов Dmc1 и Rad51. Nucleic Acids Res 36(12): 4057–4066.
    35. 35. Dube P, Tavares P, Lurz R, van Heel M (1993) Портальный белок бактериофага SPP1: ДНК-насос с 13-кратной симметрией. EMBO J 12: 1303–1309.
    36. 36. ван Хеель М., Харауз Г., Орлова Е.В., Шмидт Р., Шац М. (1996) Новое поколение системы обработки изображений IMAGIC. J Struct Biol 116: 17–24.
    37. 37. VanLoock MS, Yu X, Yang S, Lai AL, Low C и др.(2003)Конформационные изменения, опосредованные АТФ, в нити RecA. Структура 11: 187–196.
    38. 38. Чен З., Ян Х., Павлетич Н.П. (2008)Механизм гомологичной рекомбинации из структур RecA-оцДНК/дцДНК. Природа 453 (7194): 489–494.
    39. 39. Aihara H, Ito Y, Kurumizaka H, ​​Yokoyama S, Shibata T (1999) N-концевой домен человеческого белка Rad51 связывается с ДНК: структура и поверхность связывания ДНК, выявленные с помощью ЯМР. Дж. Мол Биол 290: 495–504.
    40. 40.Наваза Дж., Лепо Дж., Рей Ф.А., Альварес-Руа С., Борге Дж. (2002) О подгонке модельных электронных плотностей к ЭМ-реконструкциям: формулировка в обратном пространстве. Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 58: 1820–1825.
    41. 41. Петтерсен Э.Ф., Годдард Т.Д., Хуанг С.К., Коуч Г.С., Гринблатт Д.М. и др. (2004) UCSF Chimera — система визуализации для поисковых исследований и анализа. J Comput Chem 25: 1605–1612.
    42. 42. Story RM, Weber IT, Steitz TA (1992) Структура E.coli мономер и полимер белка recA. Природа 355: 318–325.
    43. 43. Xing X, Bell CE (2004)Кристаллические структуры Escherichia coli RecA в сжатой спиральной нити. Дж. Мол Биол 342: 1471–1485.
    44. 44. Нишинака Т., Ито Ю., Йокояма С., Шибата Т. (1997) Расширенная структура ДНК за счет укладки оснований дезоксирибозы, индуцированной белком RecA. Proc Natl Acad Sci U S A 94: 6623–6628.
    45. 45. Стасиак А., Ди Капуа Э., Коллер Т. (1981)Удлинение дуплексной ДНК с помощью белка recA.Дж. Мол. Биол. 151: 557–564.
    46. 46. Benson FE, Stasiak A, West SC (1994)Очистка и характеристика человеческого белка Rad51, аналога E. coli RecA. EMBO J 13 (23): 5764–5771.
    47. 47. Egelman EH (2001) Определяет ли растянутая структура ДНК спиральную геометрию RecA-подобных филаментов? Дж. Мол Биол 309: 539–542.
    48. 48. Курумизака Х., Айхара Х., Икава С., Кашима Т., Баземор Л.Р. и др. (1996) Возможная роль С-концевого домена белка RecA.Модель шлюза для связывания двухцепочечной ДНК. J Biol Chem 271: 33515–33524.
    49. 49. Лю Ю, Эйзенберг Д. (2002) Обмен трехмерными доменами: по мере того, как домены продолжают обмениваться. Белковая наука 11 (6): 1285–1299.
    50. 50. Gupta RC, Golub E, Bi B, Radding CM (2001)Синаптическая активность HsDmc1, рекомбинационного белка человека, специфичного для мейоза. Proc Natl Acad Sci USA 98(15): 8433–8439.
    51. 51. ван Хил М., Гоуэн Б., Матадин Р., Орлова Е.В., Финн Р. и соавт.(2000) Одночастичная электронная криомикроскопия: к атомарному разрешению. Q Rev Biophys 33: 307–369.
    52. 52. Уайт Х.Е., Сайбил Х.Р., Игнатиу А., Орлова Е.В. (2004) Распознавание и разделение одиночных частиц с изменением размера путем статистического анализа их изображений. Дж. Мол Биол 336: 453–460.
    53. 53. Франк Дж., Радермахер М., Пенчек П., Чжу Дж., Ли Ю и др. (1996) SPIDER и WEB: обработка и визуализация изображений в трехмерной электронной микроскопии и смежных областях.J Struct Biol 116: 190–199.
    54. 54. Радермахер М. (1988) Трехмерная реконструкция одиночных частиц из случайных и неслучайных рядов наклона. J Electron Microsc Tech 9: 359–394.
    55. 55. Saxton WO, Baumeister W (1986) Принципы организации S-слоев. Дж. Мол. Биол. 187: 251–253.
    56. 56. Schwede T, Kopp J, Guex N, Peitsch MC (2003) SWISS-MODEL: автоматизированный сервер моделирования гомологии белков. Nucleic Acids Research 31: 3381–3385.
    .

    Post A Comment

    Ваш адрес email не будет опубликован.